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公开(公告)号：CN114107143A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202111280840.4
申请日：2021-11-01
Applicant: 江苏香地化学有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产5’‑胞苷酸的方法，属于基因工程和微生物工程领域。本发明通过基因敲除技术对大肠杆菌的胞苷单磷酸焦磷酸化酶基因ushA和核苷酸5'‑单磷酸核苷酶基因ppnN进行敲除，获得可高效积累5’‑胞苷酸（5’‑CMP）的大肠杆菌突变体。进一步通过过量表达尿苷激酶基因udk，获得高效生产5’‑CMP的重组大肠杆菌，5’‑CMP的发酵水平可达31.8 g/L以上。这种高效的大肠杆菌菌株可用于实现5’‑CMP的工业化生产，利于降低其生产成本及环境污染，实现绿色生物制造。
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公开(公告)号：CN112852699A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110170739.7
申请日：2021-02-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种生产西柏三烯一醇的重组菌及其应用，本发明通过异源表达GGPP合酶基因ggpps和西柏三烯醇合酶基因cbts，构建了可生产植物来源的西柏三烯一醇的重组菌株。通过过表达DXP途径中碳代谢通量的关键基因1‑脱氧‑D‑木酮糖5‑磷酸合成酶基因dxs和异戊二烯焦磷酸异构酶基因idi提高西柏三烯一醇产量。进一步优化表达质粒过量表达dxs和idi，西柏三烯一醇产量提高至对照的2.60倍。采用本发明获得的西柏三烯一醇高产量菌株及方法可高效生产西柏三烯一醇，可促进其在农业及烟草等领域中的应用。
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公开(公告)号：CN112410236A
公开(公告)日：2021-02-26
申请号：CN202011322518.9
申请日：2020-11-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种类大牻牛儿烯合成酶C突变体及构建方法与应用，属于生物催化技术领域。本发明采用重组DNA技术将类大牻牛儿烯合成酶C编码基因，将其克隆至表达载体，并转化宿主，获得一株高产类大牻牛儿烯合成酶C的重组菌株。针对类大牻牛儿烯合成酶C活性位点E474周围loop结构上的氨基酸残基进行定向进化，筛选获得高活性类大牻牛儿烯合成酶C突变体。本发明还提供了上述方法在制备含西柏三烯醇的产品中的应用。采用本发明获得的高活性类大牻牛儿烯合成酶C突变体及方法可高效催化生产西柏三烯醇，可促进其在农业及烟草等领域中的应用。
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公开(公告)号：CN111826389A
公开(公告)日：2020-10-27
申请号：CN202010455589.X
申请日：2020-05-26
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/57 , C12N1/21 , C12N9/04 , C12N9/08 , C12N9/10 , C12N9/16 , C12N9/26 , C12N9/48 , C07K14/78 , C07K14/435 , C12P21/02 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法，通过同源重组的方法将包含1-4个SD序列的基因片段整合至编码D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶DacA的启动子与DacA编码基因之间。本发明通过整合不同的SD序列至大肠杆菌DacA基因的启动子与DacA编码基因之间，提高了D,D-羧肽酶DacA的表达，从而提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平。
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公开(公告)号：CN105671025A
公开(公告)日：2016-06-15
申请号：CN201610123619.0
申请日：2016-03-04
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/485
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体地，一种D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶dacB基因及应用。本发明提供了一种来源于大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)的D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶dacB，其氨基酸序列如序列1所示，且本发明提供了编码上述dacB的编码基因dacB。本发明的D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶能够从肽聚糖五肽上移除最后一个末端D-丙氨酸(D-Ala)，导致转肽反应中供体不可用，从而控制肽聚糖的网状交联水平，可以提高E.coli蛋白胞外分泌水平。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104774817A
公开(公告)日：2015-07-15
申请号：CN201510179542.4
申请日：2015-04-15
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/1051 , C12P19/18 , C12Y204/01099
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体地，一种果糖基转移酶FWT01及其编码基因与应用。本发明提供了一种来源于黑曲霉(Aspergillus niger)的果糖基转移酶FWT01，其氨基酸序列如序列1所示，且本发明提供了编码上述果糖基转移酶的编码基因FWT-01。本发明的果糖基转移酶具有以下性质：1)可在毕赤酵母(Pichia pastoris)、大肠杆菌(Escherichia coli)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)等宿主中异源表达；2)具有较宽的温度稳定性性，在50以下酶稳定；3)具有较宽的pH稳定范围：在pH4.0-9.0条件下稳定(酶活力残留＞90％)；4)具有高低聚果糖转化率，其浓度为57.3％(w/w)。
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公开(公告)号：CN103484441B
公开(公告)日：2015-05-13
申请号：CN201310422992.2
申请日：2013-09-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的淀粉酶突变体及其制备方法和应用，属于酶工程领域。本发明利用分子生物学技术进行多轮定点突变获得了热稳定性提高的淀粉酶突变体，所得淀粉酶在60℃的半衰期由对照（突变前）例的3.2min提高到23.9min。利用此策略可以显著提高淀粉酶的热稳定性，为其工业化生产提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。
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公开(公告)号：CN102965359B
公开(公告)日：2014-07-09
申请号：CN201210532851.1
申请日：2012-12-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公布了一种耐酸性淀粉酶突变体及其制备方法，属于遗传工程领域。本发明以枯草芽孢杆菌（Bacilus ssubtilis）淀粉酶为母本，采用分子生物学技术对枯草芽孢杆菌淀粉酶序列进行定点突变，在此改造条件下，枯草芽孢杆菌淀粉酶最适反应pH由对照（突变前）例的7.0变为4.5；突变后，在pH4.5条件下，淀粉酶催化效率提高5倍。利用此策略可以大大提高淀粉酶的耐酸性，为其工业化生产提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。
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公开(公告)号：CN102533697B
公开(公告)日：2014-07-09
申请号：CN201110425572.0
申请日：2011-12-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种耐氧化性淀粉酶突变体及其制备方法，属于遗传工程领域。本发明以嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alcalophilus)JN21(CCTCC NO：M 2011231)淀粉酶为母本，采用分子生物学技术对嗜碱芽孢杆菌淀粉酶序列进行定点突变。在此改造条件下，嗜碱芽孢杆菌淀粉酶在500mM H2O2环境下40℃处理30min，酶活性残留由对照(突变前)例的18％变为92％.利用此策略可以大大提高淀粉酶的耐氧化性，为其在纺织退浆、洗涤剂添加剂等工业生产领域提供了基础。此策略对淀粉酶及其它酶的耐氧化性质改造具有重要的指导意义。
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公开(公告)号：CN103484441A
公开(公告)日：2014-01-01
申请号：CN201310422992.2
申请日：2013-09-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的淀粉酶突变体及其制备方法和应用，属于酶工程领域。本发明利用分子生物学技术进行多轮定点突变获得了热稳定性提高的淀粉酶突变体，所得淀粉酶在60℃的半衰期由对照（突变前）例的3.2min提高到23.9min。利用此策略可以显著提高淀粉酶的热稳定性，为其工业化生产提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。
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