-
公开(公告)号:CN116790519A
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202310649962.9
申请日:2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 郝荣增 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、E165R蛋白、C129R蛋白、P72蛋白和Y蛋白组成的九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合,其中将至少一种抗原或其抗原表位的编码基因插入腺病毒骨架载体构建为表达所述抗原或其抗原表位的重组腺病毒;所述九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合能够产生较强的免疫反应;制备的九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株攻毒具有良好的免疫保护力,无生物安全风险;且所述九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗与九组分亚单位疫苗联合具有更好的免疫保护效力。
-
公开(公告)号:CN116514999A
公开(公告)日:2023-08-01
申请号:CN202310616956.3
申请日:2023-05-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 郝荣增 , 茹毅 , 杨洋 , 李亚军 , 卢炳州 , 刘华南 , 张贵财 , 李丹 , 冯涛 , 田宏 , 曹伟军 , 杨帆 , 张克山 , 朱紫祥 , 党文 , 秦晓东 , 马旭升
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,具体涉及一种嵌合表达口蹄疫病毒多抗原表位融合蛋白、自组装纳米颗粒及其制备方法。本发明发现,将口蹄疫病毒抗原B细胞表位插入到氨基酸序列改造后的Encapsulin蛋白片段的第138‑139位之间,将口蹄疫病毒抗原T细胞表位插入到氨基酸序列改造后的Encapsulin蛋白片段的C末端,能够实现目标蛋白在大肠杆菌中高效、可溶性表达,并且能够成功自组装成蛋白笼纳米颗粒;所述蛋白笼纳米颗粒经抗原乳化后免疫豚鼠和小鼠,可刺激机体产生更高水平的病毒中和性抗体和IFN‑γ、IL‑2、IL‑6、IL‑10、TNF‑α等细胞因子,具有较好的免疫保护作用,可用于口蹄疫疫苗的制备。
-
公开(公告)号:CN113956329B
公开(公告)日:2023-07-21
申请号:CN202111340790.4
申请日:2020-08-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一类促进猪机体产生广谱性免疫应答的多肽及其应用,属于生物医学技术领域;所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种;所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.5所示。本发明的多肽能够显著通过促进猪机体中IFN‑β信号通路激活、促进单核巨噬细胞、T细胞和B细胞分泌IFN‑γ和促进脾脏淋巴细胞和单核巨噬细胞发生增殖,从而促使猪机体产生广谱性免疫应答;并且,本发明的多肽能够促进猪体内ASFV抗原特异性免疫应答,因而能够作为ASFV亚单位疫苗的有效成分,增强猪的免疫应答。
-
公开(公告)号:CN114075264B
公开(公告)日:2023-06-16
申请号:CN202111361588.X
申请日:2020-08-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一类促进猪机体产生非洲猪瘟病毒抗原特异性免疫应答的多肽及其应用,属于生物医药技术领域;所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种;所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.5所示。本发明的多肽能够显著促进ASFV致敏免疫细胞增殖,并且能够通过促进猪CD4+T及CD8+T淋巴细胞分泌IFN‑γ促进猪机体产生ASFV抗原特异性免疫应答。免疫动物后,能显著促进猪机体免疫应答。本发明所述多肽或者由多肽聚合得到的多肽聚合物能够用于制备非洲猪瘟病毒的亚单位疫苗。
-
公开(公告)号:CN113248574B
公开(公告)日:2023-06-13
申请号:CN202110515657.1
申请日:2021-05-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/085 , C12N15/70 , C12N15/62 , C07K1/22 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域,具体涉及一种高效表达A型塞内卡病毒结构蛋白的方法。本发明首先对编码A型塞内卡病毒三种结构蛋白VP0、VP3和VP1的基因进行原核表达密码子优化,并借助小泛素样融合蛋白,获得了在大肠杆菌中同时可溶性表达三种结构蛋白的单个质粒;其次,在大肠杆菌中转入分子伴侣质粒和上述A型塞内卡病毒结构蛋白质粒,进一步提高了A型塞内卡病毒结构蛋白的可溶性表达,并解决了目标蛋白表达量不均一的问题,获得的目标蛋白约占菌体总蛋白25%以上;由表达获得的三种结构蛋白配制获得的塞内卡病毒病亚单位疫苗,能够激发猪体产生较高水平的中和性抗体,对国内A型塞内卡流行毒具有良好的保护作用。
-
公开(公告)号:CN111925994B
公开(公告)日:2023-05-26
申请号:CN202010631604.1
申请日:2020-07-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于预防兽医领域,具体涉及一种DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒及其制备方法和应用。本发明发现了非洲猪瘟病毒DP71L蛋白能够抑制cGAS+MITA或MITA诱导的IFNβ的活性,本发明还提供一种DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒,该重组非洲猪瘟病毒是将非洲猪瘟病毒的DP71L基因缺失后得到的。将本发明构建的基因缺失非洲猪瘟病毒感染细胞,与野生毒株比较显示,毒力减弱;将本发明构建的基因缺失非洲猪瘟病毒免疫猪后,无死亡等临床症状,血液病毒含量在感染后期显著降低,存活率均为100%,表明该重组病毒充分致弱,作为疫苗是非常安全的。因此可以将上述DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒在制备非洲猪瘟疫苗中进行应用,具有相应的社会价值。
-
公开(公告)号:CN115948466A
公开(公告)日:2023-04-11
申请号:CN202310019982.8
申请日:2023-01-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12N7/00 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12R1/93 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及Tollip敲除细胞系的构建及作为小RNA病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。本发明首先发现,抑制宿主细胞中Tollip基因表达能促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制;其次,本发明提供了一种特异性靶向Tollip的sgRNA,所述sgRNA能够特异性靶向Tollip基因,结合CRISPR‑Cas9技术实现了Tollip基因的敲除,获得的单克隆细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制,提高FMDV疫苗的生产量和抗原表达量,可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗尤其是FMDV疫苗的生产细胞系,具有广阔的应用前景。
-
公开(公告)号:CN114316036B
公开(公告)日:2023-03-28
申请号:CN202210011206.9
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 茹毅 , 秦晓东 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种O型口蹄疫病毒广谱中和抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,筛选获得一株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,并获得了一种鼠单克隆抗体9H6‑VP1,所述单克隆抗体9H6‑VP1为IgG1型单克隆抗体。免疫印迹试验表明所述单克隆抗体9H6‑VP1对O型不同谱系病毒(O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93)具有广谱反应性,而不和A型毒株进行反应;而且病毒中和实验表明所述单克隆抗体对O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93均具有中和活性,可阻止病毒入侵,保护机体免受感染。
-
公开(公告)号:CN114958782B
公开(公告)日:2023-03-24
申请号:CN202210258522.6
申请日:2022-03-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种IPTG诱导性缺失D1133L基因的非洲猪瘟病毒减毒株及其应用。本发明首先发现了非洲猪瘟病毒D1133L蛋白能够抑制IFN‑β及其下游因子ISG‑15、ISG‑56细胞因子的产生,具有较强的免疫抑制作用,可作为免疫抑制剂应用。另外构建了IPTG诱导性缺失D1133L基因的非洲猪瘟病毒减毒株,具体是将大肠杆菌lac操纵基因‑阻遏物系统将筛选表达盒插入到ASFV的非结构蛋白D1133L之前得到重组病毒。在存在IPTG的情况下,此重组病毒与野生型具有相似特征,无IPTG存在时,D1133L蛋白的表达会被抑制。
-
公开(公告)号:CN110205405B
公开(公告)日:2022-09-23
申请号:CN201711420252.X
申请日:2017-12-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种检测和鉴别塞尼卡谷病毒、口蹄疫病毒O、A和Asial型的试剂盒及引物和探针。用于检测和鉴别塞尼卡谷病毒、O型口蹄疫病毒、A型口蹄疫病毒和Asial型口蹄疫病毒,其引物和探针序列为:塞尼卡谷病毒检测引物和探针序列SEQ1、SEQ2和SEQ3;O型口蹄疫病毒检测引物和探针序列SEQ4、SEQ5和SEQ6;A型口蹄疫病毒检测引物和探针序列SEQ7、SEQ8和SEQ9;Asia1型口蹄疫病毒检测引物和探针序列SEQ10、SEQ11和SEQ12。本发明的试剂盒可同时进行塞尼卡谷病毒和口蹄疫病毒O、A和Asial型的检测和鉴别,简化了操作步骤,缩短了检测时间提高检测准确度。
-
-
-
-
-
-
-
-
-