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公开(公告)号：CN111996203A
公开(公告)日：2020-11-27
申请号：CN202010212917.3
申请日：2020-03-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 宁建刚 , 马坤 , 郝荣增 , 张伟 , 郑敏 , 魏婷 , 蒋保余 , 田宏 , 张克山 , 党文 , 马旭升 , 李丹 , 茹毅 , 何继军 , 郭建宏 , 刘湘涛
IPC: C12N15/41 , C12N15/42 , C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种重组O型口蹄疫病毒表位基因的塞内卡重组病毒、重组疫苗及其制备方法和应用，涉及基因工程技术领域。本发明获得SVV/FJ/001株全长cDNA，并对其5'UTR进行缺失及突变改造，同时在SVA cDNA中融合进串联的O型FMDV的重组表位基因，构建得到重组口蹄疫抗原表位的塞内卡重组病毒，该重组病毒能够表达融合进的口蹄疫B细胞表位和T细胞表位，且表达产物具有良好的反应原性，重组病毒的致病性显著降低甚至对猪无致病性，显著提高了毒株的生物安全性；制备的灭活疫苗具有良好的免疫原性，在有效激发SVA中和抗体的同时还能产生针对FMDV的特异性抗体，可用于塞内卡病毒及一种或多种非塞内卡病毒的防控。
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公开(公告)号：CN111944017A
公开(公告)日：2020-11-17
申请号：CN202010871921.0
申请日：2020-08-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一类促进猪机体产生广谱获得性免疫应答的多肽，属于生物医学技术领域；所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种；所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.5所示。本发明的多肽能够显著促进猪机体中单核巨噬细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞分泌IFN-γ和促进猪机体中单核巨噬细胞、T细胞和B细胞增殖，从而促使机体产生广谱性免疫应答。本发明的多肽能够促进猪体内ASFV抗原特异性免疫应答，因而能够作为ASFV亚单位疫苗的有效成分，增强猪的免疫应答。
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公开(公告)号：CN111621526A
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN202010522276.1
申请日：2020-06-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/90 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种TOB1基因敲除单克隆细胞系的构建方法和应用。本发明发现在猪肾上皮细胞系IBRS-2中通过基因编辑技术敲除TOB1基因能够获得了一种抑制FMDV复制的单克隆细胞系细胞TOB1-KOs；细胞系TOB1-KOs经FMDV攻毒后，检测不到病毒核酸和蛋白，表明在IBRS-2中敲除TOB1基因获得的单克隆细胞系TOB1-KOs对具有FMDV抗性表型，能够完全抑制FMDV的复制，为未来预防或抑制FMDV感染提供一种可行策略。
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公开(公告)号：CN110042083B
公开(公告)日：2020-08-28
申请号：CN201910249993.9
申请日：2019-03-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及稳定表达MAP3K8蛋白的BHK‑21细胞株及其构建和应用。该细胞株命名为BHK‑21/MAP3K8，保藏编号为CCTCC NO:C2018261。细胞株制备：目的基因MAP3K8合成，重组慢病毒载体Lv‑MAP3K8构建，包装表达MAP3K8的慢病毒，慢病毒感染BHK‑21细胞，经筛选、培养和鉴定获得稳定表达MAP3K8蛋白的BHK‑21细胞株。和BHK‑21相比较，BHK‑21/MAP3K8细胞株更有利于FMDV或SVV复制，更适合FMDV或SVV疫苗的研制和生产，同时为研究MAP3K8的基因功能提供了可靠材料。
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公开(公告)号：CN109628478B
公开(公告)日：2019-10-08
申请号：CN201910007390.8
申请日：2019-01-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及稳定表达CD63‑GFP的PK‑15细胞株及其构建和应用，所述细胞株的保藏编号为：CCTCC NO:C2018253。构建方法包括以下步骤：目的基因合成、目的基因和慢病毒载体双酶切、重组质粒构建和鉴定、转染293T细胞、感染PK‑15细胞、细胞株筛选验证。采用本发明方法构建的稳定表达CD63‑GFP的PK‑15细胞株可用于细胞内、外的外泌体含量评估。利用本发明构建的稳定表达CD63‑GFP融合蛋白的PK‑15细胞株，可用荧光观察绿色荧光蛋白或通过流式细胞仪方便地评估外泌体的分泌量。该细胞株的建立为研究外泌体在病毒感染PK‑15细胞时的应用提供了可靠材料。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110129288A
公开(公告)日：2019-08-16
申请号：CN201910401904.8
申请日：2019-05-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物医药领域，具体涉及TBK1作为E3泛素连接酶的新用途。本发明发现TBK1(TANK结合激酶1)具有泛素化功能，不仅能够在体外发生泛素化，而且能在体内发生泛素化，是一种新的E3泛素连接酶；本发明也发现了TBK1能够降解包括口蹄疫病毒(FMDV)、肠道病毒(EV71)、脑心肌炎病毒(EMCV)以及塞内卡病毒(SVV)在内的小核糖核酸病毒科病毒的结构蛋白VP3，尤其能够特异性地降解FMDV的结构蛋白VP3，可用于制备降解口蹄疫病毒蛋白相关药物，阻止口蹄疫病毒蛋白组装相关药物以及预防或治疗口蹄疫病毒感染相关药物。
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公开(公告)号：CN110129272A
公开(公告)日：2019-08-16
申请号：CN201910249994.3
申请日：2019-03-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及稳定表达MAP3K8蛋白的PK-15细胞株及其构建和应用。该细胞株命名为PK-15/MAP3K8，保藏编号为CCTCC NO:C2018262。该细胞株的制备包括以下步骤：目的基因MAP3K8的合成，重组慢病毒载体Lv-MAP3K8的构建，包装表达MAP3K8的慢病毒，慢病毒感染PK-15细胞，筛选培养和鉴定获得稳定表达MAP3K8蛋白的PK-15细胞株。和野生型PK-15细胞相比较，利用PK-15细胞大量表达MAP3K8可以显著抑制FMDV或SVV的复制。该细胞株的建立为研究猪源细胞中MAP3K8基因功能及其背后的分子机制提供了生物材料。
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公开(公告)号：CN109628478A
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201910007390.8
申请日：2019-01-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及稳定表达CD63‑GFP的PK‑15细胞株及其构建和应用，所述细胞株的保藏编号为：CCTCC NO:C2018253。构建方法包括以下步骤：目的基因合成、目的基因和慢病毒载体双酶切、重组质粒构建和鉴定、转染293T细胞、感染PK‑15细胞、细胞株筛选验证。采用本发明方法构建的稳定表达CD63‑GFP的PK‑15细胞株可用于细胞内、外的外泌体含量评估。利用本发明构建的稳定表达CD63‑GFP融合蛋白的PK‑15细胞株，可用荧光观察绿色荧光蛋白或通过流式细胞仪方便地评估外泌体的分泌量。该细胞株的建立为研究外泌体在病毒感染PK‑15细胞时的应用提供了可靠材料。
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公开(公告)号：CN108103078B
公开(公告)日：2019-02-19
申请号：CN201810003888.2
申请日：2018-01-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/41 , C12N7/00 , A61K39/125 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种分离的塞尼卡谷病毒核酸、一种塞尼卡谷病毒株、一种包含所述塞尼卡谷病毒株的塞尼卡谷病毒疫苗及其制备方法，以及所述塞尼卡谷病毒疫苗在制备用于预防和/或控制动物塞尼卡谷病毒引起的相关疾病的药物中的用途。
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公开(公告)号：CN108384893A
公开(公告)日：2018-08-10
申请号：CN201810415406.4
申请日：2018-05-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于检测口蹄疫病毒和塞尼卡谷病毒的实时荧光定量RT-PCR试剂盒及其应用。所述试剂盒包含分别用于检测口蹄疫病毒和塞尼卡谷病毒的引物以及探针，优选的，所述试剂盒中还包含核酸提取液、2×Direct qRT-PCR Mix、酶混合液、阴性对照、阳性对照。使用本发明的试剂盒检测口蹄疫病毒和塞尼卡谷病毒，具有特异性高，灵敏度高，稳定性好，操作简便等优点，用户无需额外提取病毒RNA，无需反转录，只需将待检样品加入反应管中，利用荧光信号的变化，通过Ct值和标准曲线的关系对起始模板进行定量分析，即可计算待检样品拷贝数。不仅适用于科研单位定量分析，而且适合于各级防控单位，基层兽医站，大中型养殖场等的病原检测分析，具有良好的应用前景。
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