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公开(公告)号:CN116514999B
公开(公告)日:2024-10-01
申请号:CN202310616956.3
申请日:2023-05-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 郝荣增 , 茹毅 , 杨洋 , 李亚军 , 卢炳州 , 刘华南 , 张贵财 , 李丹 , 冯涛 , 田宏 , 曹伟军 , 杨帆 , 张克山 , 朱紫祥 , 党文 , 秦晓东 , 马旭升
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,具体涉及一种嵌合表达口蹄疫病毒多抗原表位融合蛋白、自组装纳米颗粒及其制备方法。本发明发现,将口蹄疫病毒抗原B细胞表位插入到氨基酸序列改造后的Encapsulin蛋白片段的第138‑139位之间,将口蹄疫病毒抗原T细胞表位插入到氨基酸序列改造后的Encapsulin蛋白片段的C末端,能够实现目标蛋白在大肠杆菌中高效、可溶性表达,并且能够成功自组装成蛋白笼纳米颗粒;所述蛋白笼纳米颗粒经抗原乳化后免疫豚鼠和小鼠,可刺激机体产生更高水平的病毒中和性抗体和IFN‑γ、IL‑2、IL‑6、IL‑10、TNF‑α等细胞因子,具有较好的免疫保护作用,可用于口蹄疫疫苗的制备。
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公开(公告)号:CN118615271A
公开(公告)日:2024-09-10
申请号:CN202410826572.9
申请日:2024-06-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: A61K31/198 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于非洲猪瘟治疗技术领域,具体涉及一种化合物DCVC在制备预防或治疗非洲猪瘟药物中的新用途。本发明发现,化合物DCVC能够抑制非洲猪瘟病毒蛋白p72的表达,抑制非洲猪瘟病毒基因拷贝数,抑制ASFV的复制和感染,因此,化合物DCVC可用于制备预防或治疗非洲猪瘟的药物,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN117467617A
公开(公告)日:2024-01-30
申请号:CN202311360016.9
申请日:2023-10-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N15/87 , A61K35/22 , A61K31/7105 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种敲除vimentin基因的MA‑104细胞系MA‑104‑KO‑vimentin及其构建方法和应用。细胞系MA‑104‑KO‑vimentin的保藏编号为CCTCC:C2023142或CCTCC:C2023229。细胞系MA‑104‑KO‑vimentin的构建方法,包括:(1)gRNA设计。(2)将gRNA通过瞬时转染到细胞中,通过CAT Tool分析切割效率,选择切割效率最高的gRNA用于生产KO细胞系。(3)单克隆细胞培养。(4)单克隆细胞筛选。本发明利用CRISPR‑Cas9系统构建了稳敲除vimentin基因的MA‑104细胞系。
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公开(公告)号:CN117417895A
公开(公告)日:2024-01-19
申请号:CN202311352822.1
申请日:2023-10-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/12 , C12N7/00 , C12N15/113
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及ATG16L1或其WD40结构域敲除细胞系作为小RNA病毒科病毒生产细胞系的应用。本发明首先发现,抑制宿主细胞中ATG16L1或其WD40结构域的表达能促进小RNA病毒科病毒的复制;其次,本发明提供了特异性靶向ATG16L1基因WD40结构域的sgRNA,所述sgRNA能够特异性靶向WD40基因,结合CRISPR‑Cas9技术,在细胞系中实现了WD40结构域的敲除,获得的单克隆细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒的复制,提高小RNA病毒科病毒疫苗的生产量和抗原表达量,可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗的生产细胞系,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN117224669A
公开(公告)日:2023-12-15
申请号:CN202310952563.X
申请日:2023-07-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 马旭升 , 李茜 , 辇晓峰 , 尚小粉 , 罗志宽 , 代军飞 , 裴晶晶 , 朱紫祥 , 杨帆 , 曹伟军 , 茹毅 , 冯涛 , 张克山 , 田宏 , 唐静 , 李志煜 , 刘家楠
Abstract: 本发明属于病毒免疫学领域,具体涉及非洲猪瘟病毒MGF360‑21R基蛋白作为免疫诱导剂或者佐剂的应用,同时涉及该蛋白的功能鉴定。具体如:ASFV MGF360‑21R蛋白能够作为免疫应答诱导剂或者佐剂进行应用;ASFV MGF360‑21R可作为炎症应答的激动剂进行应用。本发明构建ASFV MGF360‑21R蛋白的重组慢病毒并感染小鼠后,发现小鼠血清和动物组织的炎性细胞因子产生且分泌上调。本发明为ASFV的防控以及MGF360‑21R蛋白可以作为佐剂激活炎症反应提供了新的支持。
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公开(公告)号:CN116751770A
公开(公告)日:2023-09-15
申请号:CN202310911305.7
申请日:2023-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种基于遗传密码子扩展技术和生物正交翻译系统在脯氨酰寡肽酶(POP)的特定氨基酸残基定点引入非天然氨基酸修饰的方法。所述方法包括使用遗传密码子扩展技术在POP蛋白基因编码区引入提前终止密码子,利用生物正交翻译系统通读琥珀终止密码子UAG,在非天然氨基酸存在的条件下,将非天然氨基酸定点引入POP蛋白,不仅可以条件性的控制POP蛋白的表达,还可利用含特殊基团的非天然氨基酸特异性标记POP蛋白,通过光照交联在与细胞内相互作用的蛋白质间形成稳定共价键,为细胞内POP蛋白质相互作用的研究提供有力的手段;也可用于POP蛋白功能及翻译后修饰研究。
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公开(公告)号:CN116694583A
公开(公告)日:2023-09-05
申请号:CN202310649839.7
申请日:2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 郝荣增 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原蛋白P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合,其中将至少一种抗原或其抗原表位的编码基因插入腺病毒骨架载体构建为表达所述抗原或其抗原表位的重组腺病毒;所述七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合能够产生较强的免疫反应;制备的七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险;且所述的七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗与七组分亚单位疫苗联合,具有更好的免疫保护效力。
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公开(公告)号:CN115725724B
公开(公告)日:2023-09-05
申请号:CN202211375093.7
申请日:2022-11-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 郝荣增 , 茹毅 , 卢炳州 , 杨洋 , 赵要风 , 马坤 , 刘恬然 , 李亚军 , 毛玉涵 , 王凌云 , 李丹 , 张克山 , 田宏 , 刘华南 , 张贵财 , 张越 , 陈娇 , 吴秀萍 , 任蕊芳
IPC: C12Q1/6883 , C12Q1/37 , C12N15/113 , A61K45/00 , A61K31/713 , A61K48/00 , A61K38/46 , A61P31/14 , C12N15/867 , C12N5/10 , C12N7/00 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种POP基因或蛋白为靶点在筛选抑制小RNA病毒科病毒复制药物中的应用。具体为:①本发明发现抑制/沉默POP基因/蛋白能够抑制小RNA病毒的复制,可作为靶点用于筛选抑制小RNA病毒复制的药物;②以POP为靶点的小干扰RNA能够干扰小RNA病毒的复制;③靶向POP的sgRNA结合CRISPR‑Cas9技术实现了POP的完全敲除,获得的细胞系对小RNA病毒具有抗性表型,为研究POP在细胞内的分子机制提供研究工具和材料;④过表达POP可以显著促进小RNA病毒的表达和复制,即POP蛋白可作为病毒/病毒疫苗表达增效剂或生产增效剂的应用,构建的POP过表达细胞系可作为病毒/病毒疫苗生产细胞系。
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公开(公告)号:CN116672443A
公开(公告)日:2023-09-01
申请号:CN202310647769.1
申请日:2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 郝荣增 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: A61K39/12 , A61K39/385 , A61K9/14 , A61K47/34 , A61K47/32 , A61K47/36 , A61K47/10 , A61K47/42 , A61K47/02 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟组合疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合,其中至少一种抗原与纳米颗粒载体形成含有所述抗原或其抗原表位的纳米颗粒;所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合能够刺激机体产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合的疫苗,所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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公开(公告)号:CN116589539A
公开(公告)日:2023-08-15
申请号:CN202310374606.0
申请日:2023-04-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种九组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、E165R蛋白、C129R蛋白、P72蛋白、X蛋白和Y蛋白组成的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合,所述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合能够诱导机体产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合的九组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗,所述九组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题,证明了非洲猪瘟亚单位疫苗研究方案的可行性。
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