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公开(公告)号：CN111440762B
公开(公告)日：2020-12-04
申请号：CN202010289220.6
申请日：2020-04-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明提供了一种全悬浮MDCK细胞和利用全悬浮MDCK细胞培养猪流感病毒的方法，属于医学或兽医学技术领域，所述全悬浮MDCK细胞为全悬浮MDCK细胞D11‑F11‑D1。本发明提供的全悬浮MDCK细胞能高滴度增殖猪流感病毒，为SI疫苗的研发和生产提供良好的培养介质以及为开发SI疫苗生产的细胞培养工艺奠定基础。
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公开(公告)号：CN111961654A
公开(公告)日：2020-11-20
申请号：CN202010780070.9
申请日：2020-08-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/04 , A61K39/295 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了耐热表型稳定遗传、携带负标记的重组口蹄疫病毒无毒株及O/A型口蹄疫二价灭活疫苗。本发明构建FMDV病毒cDNA感染性克隆质粒，其携带有病毒衣壳耐热表型的分子决定因素、在体内失去复制能力的分子因素、3A和3B蛋白表位缺失的负标记因素及在P1编码区两侧引入Pst I酶切位点，可针对任何流行株替换其衣壳蛋白编码区快速构建并拯救热稳定而且被标记的口蹄疫病毒无毒株，用作口蹄疫灭活疫苗种子病毒。用该通用质粒针对当前两个优势流行株构建两株重组病毒并用其制备O/A型口蹄疫二价灭活疫苗，免疫动物诱导高水平中和抗体并产生免疫保护；用该疫苗接种动物进行抗体检测可实现疫苗接种动物与自然感染动物的鉴别诊断。
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公开(公告)号：CN111876476A
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN202010731784.0
申请日：2020-07-27
Applicant: 暨南大学 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12Q1/6876 , C12Q1/6848 , C12N15/11 , C12N15/85 , C07K16/10
Abstract: 本发明涉及基因工程及抗体制备领域，具体而言，涉及一种用于扩增马抗体的巢式PCR引物、试剂盒及其应用。该巢式PCR引物可匹配的抗体重链及轻链基因的阳性率为56％左右，进而能够从单个B淋巴细胞分离抗体基因的方法，并制备高通量马源抗体。该方法保留了轻链重链可变区的天然配对，具有基因多样性好、效价高、抗体亲和力好、特异性强、实验周期短等优势，为研制传染性疾病及自身免疫性疾病的单克隆抗体的预防与治疗性药物或诊断性抗体提供了一条广阔的途径，同时也为生命科学基础研究获得外源性蛋白的抗体提供了一个更加高效、简单、快速的方法。
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公开(公告)号：CN111849924A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010580477.7
申请日：2020-06-23
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了类NADC30猪蓝耳病强毒株、弱毒株及其应用。本发明的一种类NADC30猪蓝耳病强毒株，命名为类NADC30猪蓝耳病病毒SD株，其微生物保藏号是：CGMCC NO.19691。通过对该SD株进行致弱培养，本发明还获得了一株类NADC30猪蓝耳病弱毒株，命名为类NADC30猪蓝耳病病毒SD-R株，其微生物保藏号是：CGMCC NO.19692。实验证明，本发明的SD株具有毒力强、对仔猪致病力稳定的特征，可用于检验预防或治疗类NADC30猪繁殖与呼吸综合征；本发明的弱毒疫苗株SD-R株具有安全性高、保护效果好的特征，可用于预防类NADC30猪繁殖与呼吸综合征。因此，本发明的SD株及其弱毒疫苗SD-R株可用于制备成防治类NADC30猪繁殖与呼吸综合征的单苗或联苗(活或灭活疫苗)等，也可以制备成诊断类NADC30猪繁殖与呼吸综合征的诊断试剂。
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公开(公告)号：CN106967748B
公开(公告)日：2020-10-16
申请号：CN201710197086.5
申请日：2017-03-29
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12N7/01 , A61K39/275 , A61K39/295 , A61K39/155 , A61P31/20 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种无需噬斑克隆和筛选标签的山羊痘病毒重组系统及双表达PPRV H/F蛋白疫苗的构建，该重组系统不但可以构建单表达、双表达的重组病毒或重组疫苗，甚至可以构建表达三个蛋白以上的重组病毒或重组疫苗，由该重组系统获得的重组病毒，不需要任何筛选标签，避免了筛选标签对疫苗使用中存在的一些潜在不利影响。此外，本发明还公开了通过该重组系统制备的双表达小反刍兽疫病毒H和F蛋白且无筛选标签的重组山羊痘病毒，研究结果表明，该重组病毒能够诱导比单抗原表达更全面的细胞和体液免疫，能够同时预防PPR和羊痘两种重大疫病，且诱导的足够高的中和抗体有利于免疫血清学监测，因此在预防及治疗小反刍兽疫和山羊痘方面将具有良好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111690688A
公开(公告)日：2020-09-22
申请号：CN202010426220.6
申请日：2020-05-19
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/90 , C12N15/869 , C12N15/66 , C12N15/113 , C12N7/01 , A61K39/295 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种表达靶向REV的CRISPR/Cas9的重组马立克氏病病毒及其应用。本发明构建了靶向REV基因组序列的CRISPR/Cas9系统，通过对设计的靶向REV的sgRNAs进行筛选，获得了具有最佳敲除效果的sgRNA。研究发现，靶向REV的CRISPR/Cas9能够有效阻止REV对宿主细胞的感染。将上述CRISPR/Cas9表达框架插入MDV基因组，构建了表达靶向REV的CRISPR/Cas9的重组MDV；该重组病毒能够有效阻止REV对宿主细胞的感染，并对REV强毒的攻击具有明显的预防和病毒清除作用。本发明提出的一种表达靶向REV的CRISPR/Cas9的重组MDV有望作为一种新型疫苗用于禽网状内皮组织增生病的防控。
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公开(公告)号：CN111471102A
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN202010325058.9
申请日：2020-04-23
Applicant: 西北农林科技大学 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明适用于生物技术领域，提供了一种编码基因、载体、抗独特型纳米抗体及其制备方法和应用，该抗独特型纳米抗体的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。该抗独特型纳米抗体是通过噬菌体展示技术成功筛选到所需抗独特型纳米抗体的编码基因，接着，将该编码基因连接到毕赤酵母表达载体中，并电转化至毕赤酵母感受态细胞培养制得的。该抗独特型纳米抗体能够特异性地阻断单抗1E7与PCV2 Cap蛋白的结合，具有模拟PCV2 Cap关键抗原表位的作用，其可用于开发防治PCV2的抗独特性纳米抗体疫苗、诊断试剂及生物试剂等。
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公开(公告)号：CN111458501A
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN202010148906.3
申请日：2020-03-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了一种用于检测马流产沙门氏菌抗体的间接ELISA试剂盒及其制备方法和应用。所述的试剂盒中包含马流产沙门氏菌FljB蛋白包被的酶标板，其中，所述的马流产沙门氏菌FljB蛋白由SEQ ID NO.2所示的序列编码。本发明通过序列分析后，以P3/P4扩增马流产沙门氏菌特异性序列，并将其克隆至原核表达载体pET-28a，构建重组表达质粒pET28a-FljB，转化入Rosetta(DE3)，用IPTG进行诱导表达，以纯化后的FljB蛋白作为包被抗原，建立马流产沙门氏菌抗体的间接ELISA方法，结果显示，以该蛋白作为包被抗原建立的间接ELISA方法，具有良好的特异性、敏感性、重复性，可以用于临床马流产沙门氏菌抗体的检测。
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公开(公告)号：CN111454908A
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN201910048190.7
申请日：2019-01-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明提供一种Tpl2缺陷型MDCK细胞株及其构建方法和应用，涉及生物技术领域，所述MDCK细胞株中Tpl2基因第1外显子第239位～第243位碱基缺失。本发明通过移码突变敲除MDCK细胞株中的Tpl2基因，但该突变对MDCK细胞传代10代后的生长速度和细胞形态无影响；试验表明，本发明提供的Tpl2缺陷型MDCK细胞株可稳定遗传，安全可靠，克服了现有突变MDCK细胞遗传不稳定或不安全的问题。本发明所述Tpl2缺陷型MDCK细胞株接种流感病毒后可用于提高流感病毒产率，相对于常规MDCK细胞培养的上清血凝效价和上清病毒TCID50滴度均有显著提高，克服了现有MDCK细胞培养流感病毒的产量不足问题。
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公开(公告)号：CN108107217B
公开(公告)日：2020-07-24
申请号：CN201711119596.7
申请日：2017-11-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种基于蛋白空间结构设计的猪瘟病毒截短E2蛋白及其应用。本发明根据牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的晶体结构，模拟出猪瘟病毒E2蛋白的空间结构并对其进行截短表达，截短蛋白E2B/C/D/A的氨基酸序列为SEQ ID NO：1所示，其保留了E2蛋白完整的抗原性、且与牛病毒性腹泻病毒抗体无交叉反应。本发明进一步构建了稳定表达截短蛋白E2B/C/D/A的CHO细胞系，其微生物保藏编号为CGMCC No.14722。本发明还公开了一种用于猪瘟病毒抗体检测的间接ELISA试剂盒，其中包被抗原为猪瘟病毒截短蛋白E2B/C/D/A，该试剂盒能够特异性检测猪瘟病毒抗体，特异性、敏感性和重复性好。
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