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公开(公告)号：CN113122655A
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN201911389185.9
申请日：2019-12-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/63 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了非洲猪瘟病毒EP402R基因TaqMan荧光定量PCR检测方法。本发明选择目前中国流行的ASFV重要毒力相关因子EP402R基因(CD2v)基因为靶标，构建了阳性质粒标准品并设计了检测非洲猪瘟病毒EP402R基因的实时荧光定量PCR引物和探针，在此基础上，本发明进一步建立了非洲猪瘟病毒EP402R基因TaqMan荧光定量PCR检测方法。本发明所建立的非洲猪瘟病毒EP402R基因TaqMan荧光定量PCR检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好，与已有的经典检测方法符合率高，不仅丰富了ASFV现有检测靶标，在ASFV疫苗毒与野毒的检测上也有重要的应用前景。
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公开(公告)号：CN104894076B
公开(公告)日：2018-08-31
申请号：CN201510296045.2
申请日：2015-06-02
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/869 , C12N15/40 , A61K39/245 , A61K39/187 , A61P31/22 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株及其应用，属于伪狂犬病病毒变异株的构建及应用领域。本发明以gE/gI双基因缺失重组病毒rPRVTJ‑delgE/gI为基础，在rPRVTJ‑delgE/gI中插入猪瘟病毒E2基因，对所获得的重组病毒克隆最终筛选出一株复制特性好、稳定性好、外源蛋白表达量高的重组病毒株rPRVTJ‑delgE/gI‑E2，其微生物保藏编号为：CGMCC No.10411。本发明重组病毒株rPRVTJ‑delgE/gI‑E2具有良好的安全性和免疫原性，免疫仔猪后能够对PRV及CSFV的攻击提供完全保护，能够应用于制备预防或治疗猪瘟和/或伪狂犬病的疫苗或试剂。
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公开(公告)号：CN105505937A
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201610121443.5
申请日：2014-06-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , A61K48/00 , A61K31/7088 , A61P31/14
CPC classification number: C12N15/1131 , C12N2310/14
Abstract: 本发明公开了抗猪瘟病毒感染的siRNA及其应用，属于抗猪瘟病毒siRNA的鉴定及其应用领域。本发明首先公开了分别靶向猪瘟病毒基因组Npro、P7、NS5A和NS5B基因的抗猪瘟病毒感染的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1-12所示。本发明进一步利用构建的重组猪瘟病毒筛选出对猪瘟病毒干扰或抑制活性最强的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.12所示。本发明还公开了含有所述抗猪瘟病毒感染的siRNA的表达载体及其应用。本发明抗猪瘟病毒感染的siRNA对猪瘟病毒抑制活性强，具有制备成预防或治疗猪瘟的药物或试剂的潜力。
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公开(公告)号：CN104894076A
公开(公告)日：2015-09-09
申请号：CN201510296045.2
申请日：2015-06-02
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/869 , C12N15/40 , A61K39/245 , A61K39/187 , A61P31/22 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株及其应用，属于伪狂犬病病毒变异株的构建及应用领域。本发明以gE/gI双基因缺失重组病毒rPRVTJ-delgE/gI为基础，在rPRVTJ-delgE/gI中插入猪瘟病毒E2基因，对所获得的重组病毒克隆最终筛选出一株复制特性好、稳定性好、外源蛋白表达量高的重组病毒株rPRVTJ-delgE/gI-E2，其微生物保藏编号为：CGMCC？No.10411。本发明重组病毒株rPRVTJ-delgE/gI-E2具有良好的安全性和免疫原性，免疫仔猪后能够对PRV及CSFV的攻击提供完全保护，能够应用于制备预防或治疗猪瘟和/或伪狂犬病的疫苗或试剂。
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公开(公告)号：CN113736746B
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202110788781.5
申请日：2021-07-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了在传代细胞系中良好复制的非洲猪瘟病毒(ASFV)适应毒株及其应用。本发明通过不同传代细胞系的感染实验发现ASFV野毒株(ASFV‑WT)可在HEK293T细胞中低水平复制。将ASFV‑WT在HEK293T细胞中连续传代适应获得了可在HEK293T细胞高效增殖的ASFV适应毒株ASFV‑P61，其病毒滴度最高可以达到107.5TCID50/mL，该适应毒株的微生物保藏编号是CCTCC NO：V202153。此外，该适应毒株基因组5’端的多基因家族缺失基因(包含多个毒力相关基因)序列达20kb左右，表明其毒力可能已经致弱，具有研制成为非洲猪瘟疫苗候选株的潜能。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116355863A
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202310278967.5
申请日：2023-03-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/00 , G01N33/569 , A61K39/12 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了适应传代细胞培养的猪非典型瘟病毒分离株及其用途。本发明从确定为APPV感染的死亡仔猪中分离到一株适应传代细胞培养的APPV分离株，其微生物保藏编号是：CGMCC No.45417。该分离株可以在PK‑15细胞中连续稳定传代和增殖，且传代过程中病毒滴度逐渐增高。病毒中和试验(VNT)表明基于该分离株进行的VNT能够有效区分APPV抗体阳性血清和阴性血清。本发明提供的APPV分离株为APPV的生物学和致病性研究以及疫苗和诊断试剂的开发提供关键材料，对APPV引起的疾病诊断、感染监测体系的完善和所致疾病流行的控制等具有重要应用前景，同时还可用于制备诊断或防治APPV感染的检测试剂或疫苗。
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公开(公告)号：CN113122654A
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN201911389079.0
申请日：2019-12-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了非洲猪瘟病毒的检测靶标以及荧光定量PCR检测引物。本发明以ASFV中国流行毒株为对象，选择多基因家族中相对保守又具研究和应用前景的MGF360‑13L基因为靶标，建立了ASFV MGF360‑13L TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。本发明方法可实现对最低15.6拷贝/μL ASFV核酸的检测，与多种病原不存在交叉反应，相比常规PCR检测方法，本发明检测方法在敏感性上高出3个数量级。本发明所建立的检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好，与已有的经典检测方法符合率高，能够对可疑样品进行二次确认，不仅丰富了ASFV现有检测靶标，也能鉴别ASFV MGF基因趋势疫苗毒与野毒感染。
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公开(公告)号：CN107973850B
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN201711330540.6
申请日：2017-12-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N5/10 , C12N15/867 , A61K39/42 , A61P31/14 , G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了重组猪瘟病毒E2蛋白猪源化单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明首先公开了重组猪瘟病毒E2蛋白猪源化单克隆抗体，其重链的氨基酸序列为SEQ ID No.1所示，轻链的氨基酸序列为SEQ ID No.2所示。本发明还公开了稳定表达重组猪瘟病毒E2蛋白猪源化单克隆抗体的悬浮HEK293细胞系。本发明通过将重组猪瘟病毒E2蛋白猪源化单克隆抗体的重链和轻链编码基因克隆至真核表达载体，利用悬浮HEK293细胞实现重组猪瘟病毒E2蛋白猪源化单克隆抗体的稳定和高效表达。本发明所述重组猪瘟病毒E2蛋白猪源化单克隆抗体具有良好的反应原性和中和活性，在开发新型猪瘟病毒诊断和治疗制剂中具有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN105505938B
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201610121449.2
申请日：2014-06-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , A61K48/00 , A61K31/7088 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了抗猪瘟病毒感染的siRNA及其应用，属于抗猪瘟病毒siRNA的鉴定及其应用领域。本发明首先公开了分别靶向猪瘟病毒基因组Npro、P7、NS5A和NS5B基因的抗猪瘟病毒感染的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1‑12所示。本发明进一步利用构建的重组猪瘟病毒筛选出对猪瘟病毒干扰或抑制活性最强的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.12所示。本发明还公开了含有所述抗猪瘟病毒感染的siRNA的表达载体及其应用。本发明抗猪瘟病毒感染的siRNA对猪瘟病毒抑制活性强，具有制备成预防或治疗猪瘟的药物或试剂的潜力。
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公开(公告)号：CN108107217A
公开(公告)日：2018-06-01
申请号：CN201711119596.7
申请日：2017-11-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种基于蛋白空间结构设计的猪瘟病毒截短E2蛋白及其应用。本发明根据牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的晶体结构，模拟出猪瘟病毒E2蛋白的空间结构并对其进行截短表达，截短蛋白E2B/C/D/A的氨基酸序列为SEQ ID NO：1所示，其保留了E2蛋白完整的抗原性、且与牛病毒性腹泻病毒抗体无交叉反应。本发明进一步构建了稳定表达截短蛋白E2B/C/D/A的CHO细胞系，其微生物保藏编号为CGMCC No.14722。本发明还公开了一种用于猪瘟病毒抗体检测的间接ELISA试剂盒，其中包被抗原为猪瘟病毒截短蛋白E2B/C/D/A，该试剂盒能够特异性检测猪瘟病毒抗体，特异性、敏感性和重复性好。
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