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公开(公告)号：CN108107217B
公开(公告)日：2020-07-24
申请号：CN201711119596.7
申请日：2017-11-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种基于蛋白空间结构设计的猪瘟病毒截短E2蛋白及其应用。本发明根据牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的晶体结构，模拟出猪瘟病毒E2蛋白的空间结构并对其进行截短表达，截短蛋白E2B/C/D/A的氨基酸序列为SEQ ID NO：1所示，其保留了E2蛋白完整的抗原性、且与牛病毒性腹泻病毒抗体无交叉反应。本发明进一步构建了稳定表达截短蛋白E2B/C/D/A的CHO细胞系，其微生物保藏编号为CGMCC No.14722。本发明还公开了一种用于猪瘟病毒抗体检测的间接ELISA试剂盒，其中包被抗原为猪瘟病毒截短蛋白E2B/C/D/A，该试剂盒能够特异性检测猪瘟病毒抗体，特异性、敏感性和重复性好。
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公开(公告)号：CN105671046B
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201610121446.9
申请日：2014-06-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , A61K48/00 , A61K31/7088 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了抗猪瘟病毒感染的siRNA及其应用，属于抗猪瘟病毒siRNA的鉴定及其应用领域。本发明首先公开了分别靶向猪瘟病毒基因组Npro、P7、NS5A和NS5B基因的抗猪瘟病毒感染的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1‑12所示。本发明进一步利用构建的重组猪瘟病毒筛选出对猪瘟病毒干扰或抑制活性最强的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.12所示。本发明还公开了含有所述抗猪瘟病毒感染的siRNA的表达载体及其应用。本发明抗猪瘟病毒感染的siRNA对猪瘟病毒抑制活性强，具有制备成预防或治疗猪瘟的药物或试剂的潜力。
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公开(公告)号：CN105861453A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610202329.5
申请日：2016-04-01
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/86 , C12N15/62 , A61K39/187 , A61P31/14
CPC classification number: C12N7/00 , A61K39/187 , C07K14/18 , C07K2319/60 , C12N2770/24334
Abstract: 本发明公开了表达增强型绿色荧光蛋白的标记猪瘟病毒C株及其构建方法和应用，属于标记猪瘟病毒C株的构建及应用领域。本发明以C株感染性克隆为骨架，将猪瘟病毒强毒石门株Npro蛋白替换C株Npro蛋白，再将EGFP基因引入Npro蛋白第13和14位氨基酸之间，获得一株表达增强型绿色荧光蛋白的标记猪瘟病毒C株，其微生物保藏编号为：CGMCC No.12039。本发明获得的标记猪瘟病毒C株能够稳定表达EGFP基因，并成功观察到其绿色荧光，而且其保留了亲本病毒的生物学特性和免疫原性，能够应用于制备预防猪瘟的标记疫苗。本发明证实在C株Npro蛋白上可以进行修饰以获得标记的猪瘟病毒，为发展标记C株疫苗奠定基础。
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公开(公告)号：CN105671046A
公开(公告)日：2016-06-15
申请号：CN201610121446.9
申请日：2014-06-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , A61K48/00 , A61K31/7088 , A61P31/14
CPC classification number: C12N15/1131 , C12N2310/14
Abstract: 本发明公开了抗猪瘟病毒感染的siRNA及其应用，属于抗猪瘟病毒siRNA的鉴定及其应用领域。本发明首先公开了分别靶向猪瘟病毒基因组Npro、P7、NS5A和NS5B基因的抗猪瘟病毒感染的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1-12所示。本发明进一步利用构建的重组猪瘟病毒筛选出对猪瘟病毒干扰或抑制活性最强的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.12所示。本发明还公开了含有所述抗猪瘟病毒感染的siRNA的表达载体及其应用。本发明抗猪瘟病毒感染的siRNA对猪瘟病毒抑制活性强，具有制备成预防或治疗猪瘟的药物或试剂的潜力。
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公开(公告)号：CN104059914A
公开(公告)日：2014-09-24
申请号：CN201410252667.0
申请日：2014-06-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/113 , A61K48/00 , A61P35/00 , C12N15/861 , C12N15/867 , C12N15/85
Abstract: 本发明公开了抗猪瘟病毒感染的siRNA及其应用，属于抗猪瘟病毒siRNA的鉴定及其应用领域。本发明首先公开了分别靶向猪瘟病毒基因组Npro、P7、NS5A和NS5B基因的抗猪瘟病毒感染的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1-12所示。本发明进一步利用构建的重组猪瘟病毒筛选出对猪瘟病毒干扰或抑制活性最强的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.12所示。本发明还公开了含有所述抗猪瘟病毒感染的siRNA的表达载体及其应用。本发明抗猪瘟病毒感染的siRNA对猪瘟病毒抑制活性强，具有制备成预防或治疗猪瘟的药物或试剂的潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113106071A
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN202010033003.0
申请日：2020-01-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/00 , C12N15/63 , C12N5/10 , A61K39/187 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了HQ06表位突变的猪瘟候选标记疫苗株及其应用。本发明以C株为骨架，单个点突变E2蛋白HQ06抗原表位的3个关键氨基酸117F、119G和122P，构建了3株突变体病毒。本发明所构建的3株突变体病毒均失去了与单克隆抗体(mAb)HQ06的反应性，保留了与CSFV E2蛋白其他抗原位点的反应性，生物学特性与C株保持一致；其中，rHCLV‑E2P122A在体外可达到亲本病毒的生长滴度，在家兔和家猪体内均能够诱导机体产生针对CSFV E2的抗体和针对CSFV的中和抗体，但失去了诱导机体产生针对HQ06抗原表位的特异性抗体，本发明的rHCLV‑E2P122A毒株能够开发成猪瘟标记疫苗。
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公开(公告)号：CN105505937B
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201610121443.5
申请日：2014-06-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , A61K48/00 , A61K31/7088 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了抗猪瘟病毒感染的siRNA及其应用，属于抗猪瘟病毒siRNA的鉴定及其应用领域。本发明首先公开了分别靶向猪瘟病毒基因组Npro、P7、NS5A和NS5B基因的抗猪瘟病毒感染的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1‑12所示。本发明进一步利用构建的重组猪瘟病毒筛选出对猪瘟病毒干扰或抑制活性最强的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.12所示。本发明还公开了含有所述抗猪瘟病毒感染的siRNA的表达载体及其应用。本发明抗猪瘟病毒感染的siRNA对猪瘟病毒抑制活性强，具有制备成预防或治疗猪瘟的药物或试剂的潜力。
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公开(公告)号：CN104059889B
公开(公告)日：2017-01-25
申请号：CN201410105058.2
申请日：2014-03-20
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/04 , C12N15/63 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了伪狂犬病病毒变异株双基因缺失毒株及其构建方法和应用。本发明提供了一株缺失gI和gE基因的伪狂犬病病毒株，其微生物保藏编号是CGMCC.No.8786。本发明进一步提供了构建所述双基因缺失毒株的方法，包括（：1）构建含有EGFP和Neo基因完整表达盒的伪狂犬病病毒TJ株转移载体；（2）将转移载体转染于接种伪狂犬病病毒TJ株后的细胞，获得过渡病毒（；3）过渡病毒基因组酶切处理后与转移载体共转染细胞，经蚀斑筛选即得。本发明缺失毒株被完全致弱，免疫猪只后未出现任何临床反应，能够迅速诱导伪狂犬病病毒特异性抗体的产生，中和抗体滴度高，对当前流行的伪狂犬病病毒变异株的攻击能提供完全的免疫保护。
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公开(公告)号：CN105505938A
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201610121449.2
申请日：2014-06-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , A61K48/00 , A61K31/7088 , A61P31/14
CPC classification number: C12N15/1131 , C12N2310/14
Abstract: 本发明公开了抗猪瘟病毒感染的siRNA及其应用，属于抗猪瘟病毒siRNA的鉴定及其应用领域。本发明首先公开了分别靶向猪瘟病毒基因组Npro、P7、NS5A和NS5B基因的抗猪瘟病毒感染的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1-12所示。本发明进一步利用构建的重组猪瘟病毒筛选出对猪瘟病毒干扰或抑制活性最强的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.12所示。本发明还公开了含有所述抗猪瘟病毒感染的siRNA的表达载体及其应用。本发明抗猪瘟病毒感染的siRNA对猪瘟病毒抑制活性强，具有制备成预防或治疗猪瘟的药物或试剂的潜力。
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公开(公告)号：CN103255111A
公开(公告)日：2013-08-21
申请号：CN201310069486.X
申请日：2013-03-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/01 , G01N33/569 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了绿色荧光蛋白标记的重组猪瘟病毒及其拯救方法和应用。本发明将绿色荧光蛋白编码基因插入到猪瘟病毒感染性克隆Npro蛋白编码区的第13位与第14位氨基酸之间，通过转染PK-15细胞、传代，拯救出可视化的绿色荧光蛋白标记的重组猪瘟病毒。所述重组猪瘟病毒的生长特性与其亲本病毒一致，感染PK-15细胞后通过荧光显微镜直接可视，用其建立的改进中和试验方法（EGFP-NT）能够借助荧光显微镜直接观察猪瘟病毒的存在与否并确定待检血清中的中和抗体效价，无需额外的免疫荧光试验步骤，其特异性和敏感性与传统的中和免疫荧光试验一致，却更加方便快捷，可替代中和免疫荧光试验方法用于猪瘟血清学检测和流行病学调查。
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