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公开(公告)号:CN113122655A
公开(公告)日:2021-07-16
申请号:CN201911389185.9
申请日:2019-12-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/63 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了非洲猪瘟病毒EP402R基因TaqMan荧光定量PCR检测方法。本发明选择目前中国流行的ASFV重要毒力相关因子EP402R基因(CD2v)基因为靶标,构建了阳性质粒标准品并设计了检测非洲猪瘟病毒EP402R基因的实时荧光定量PCR引物和探针,在此基础上,本发明进一步建立了非洲猪瘟病毒EP402R基因TaqMan荧光定量PCR检测方法。本发明所建立的非洲猪瘟病毒EP402R基因TaqMan荧光定量PCR检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好,与已有的经典检测方法符合率高,不仅丰富了ASFV现有检测靶标,在ASFV疫苗毒与野毒的检测上也有重要的应用前景。
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公开(公告)号:CN104894076B
公开(公告)日:2018-08-31
申请号:CN201510296045.2
申请日:2015-06-02
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/869 , C12N15/40 , A61K39/245 , A61K39/187 , A61P31/22 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株及其应用,属于伪狂犬病病毒变异株的构建及应用领域。本发明以gE/gI双基因缺失重组病毒rPRVTJ‑delgE/gI为基础,在rPRVTJ‑delgE/gI中插入猪瘟病毒E2基因,对所获得的重组病毒克隆最终筛选出一株复制特性好、稳定性好、外源蛋白表达量高的重组病毒株rPRVTJ‑delgE/gI‑E2,其微生物保藏编号为:CGMCC No.10411。本发明重组病毒株rPRVTJ‑delgE/gI‑E2具有良好的安全性和免疫原性,免疫仔猪后能够对PRV及CSFV的攻击提供完全保护,能够应用于制备预防或治疗猪瘟和/或伪狂犬病的疫苗或试剂。
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公开(公告)号:CN105505937A
公开(公告)日:2016-04-20
申请号:CN201610121443.5
申请日:2014-06-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , A61K48/00 , A61K31/7088 , A61P31/14
CPC classification number: C12N15/1131 , C12N2310/14
Abstract: 本发明公开了抗猪瘟病毒感染的siRNA及其应用,属于抗猪瘟病毒siRNA的鉴定及其应用领域。本发明首先公开了分别靶向猪瘟病毒基因组Npro、P7、NS5A和NS5B基因的抗猪瘟病毒感染的siRNA,其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1-12所示。本发明进一步利用构建的重组猪瘟病毒筛选出对猪瘟病毒干扰或抑制活性最强的siRNA,其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.12所示。本发明还公开了含有所述抗猪瘟病毒感染的siRNA的表达载体及其应用。本发明抗猪瘟病毒感染的siRNA对猪瘟病毒抑制活性强,具有制备成预防或治疗猪瘟的药物或试剂的潜力。
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公开(公告)号:CN104894076A
公开(公告)日:2015-09-09
申请号:CN201510296045.2
申请日:2015-06-02
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/869 , C12N15/40 , A61K39/245 , A61K39/187 , A61P31/22 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株及其应用,属于伪狂犬病病毒变异株的构建及应用领域。本发明以gE/gI双基因缺失重组病毒rPRVTJ-delgE/gI为基础,在rPRVTJ-delgE/gI中插入猪瘟病毒E2基因,对所获得的重组病毒克隆最终筛选出一株复制特性好、稳定性好、外源蛋白表达量高的重组病毒株rPRVTJ-delgE/gI-E2,其微生物保藏编号为:CGMCC?No.10411。本发明重组病毒株rPRVTJ-delgE/gI-E2具有良好的安全性和免疫原性,免疫仔猪后能够对PRV及CSFV的攻击提供完全保护,能够应用于制备预防或治疗猪瘟和/或伪狂犬病的疫苗或试剂。
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公开(公告)号:CN119020260A
公开(公告)日:2024-11-26
申请号:CN202411130700.2
申请日:2024-08-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/071 , C12N5/10 , C12N15/40 , C07K19/00 , C12N15/867 , A61K39/187 , A61P31/14 , A61K39/385 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了表达猪瘟病毒E2蛋白的悬浮CHO细胞系及其在制备猪瘟疫苗中的应用。本发明提供了一株稳定表达猪瘟病毒E2蛋白的悬浮CHO细胞系,其微生物保藏编号是CGMCC No.45825。本发明进一步提供了Fe‑E2NPs纳米颗粒疫苗,包括:由ST‑E2蛋白和铁蛋白偶联得到,所述铁蛋白是将△N‑SpyCatcher蛋白融合到铁蛋白的N‑末端。本发明提供的纳米颗粒疫苗在兔体内诱导比C株疫苗更好的免疫保护,不仅可以诱导IFN‑γ以提供对猪瘟的早期保护,而且更快地诱导有效的体液免疫,兼顾了减毒活疫苗和亚单位疫苗的优点,提供DIVA特性,可为猪瘟的有效替代疫苗、在控制和根除CSF方面发挥重要作用。
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公开(公告)号:CN115704819A
公开(公告)日:2023-02-17
申请号:CN202110904538.5
申请日:2021-08-06
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/58 , A61K39/12 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了p34蛋白作为诊断抗原在检测非洲猪瘟病毒中的用途。本发明首先对p34蛋白的抗原性进行了分析,发现原核及真核表达的p34蛋白均能同ASFV阳性血清发生反应,其中原核表达的p34蛋白产量和纯度高,其抗体可有效抑制ASFV复制,表明其可作为ASFV的候选保护性抗原。本发明以p34蛋白为诊断抗原建立了检测非洲猪瘟病毒间接ELISA方法,其敏感性为1:800,且同其他常见猪源病毒血清无交叉反应。批间及批内的变异系数在2.13%‑8.83%之间,与法国ID.VET ASFV抗体检测试剂盒符合率为96.83%,该间接ELISA检测方法敏感性、特异性以及稳定性良好,可应用于ASFV感染血清的检测。
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公开(公告)号:CN113736746A
公开(公告)日:2021-12-03
申请号:CN202110788781.5
申请日:2021-07-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了在传代细胞系中良好复制的非洲猪瘟病毒(ASFV)适应毒株及其应用。本发明通过不同传代细胞系的感染实验发现ASFV野毒株(ASFV‑WT)可在HEK293T细胞中低水平复制。将ASFV‑WT在HEK293T细胞中连续传代适应获得了可在HEK293T细胞高效增殖的ASFV适应毒株ASFV‑P61,其病毒滴度最高可以达到107.5TCID50/mL,该适应毒株的微生物保藏编号是CCTCC NO:V202153。此外,该适应毒株基因组5’端的多基因家族缺失基因(包含多个毒力相关基因)序列达20kb左右,表明其毒力可能已经致弱,具有研制成为非洲猪瘟疫苗候选株的潜能。
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公开(公告)号:CN112877231A
公开(公告)日:2021-06-01
申请号:CN201911206844.0
申请日:2019-11-29
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了具有抑菌和抗氧化活性的乳酸菌及其应用。为了获得安全、具有良好益生特性的菌株,本发明从中国大兴安岭地区的野猪粪便中分离乳酸菌,经16S rDNA鉴定和耐酸、耐胆盐试验初步筛选出了4株候选菌株;本发明进一步通过自凝集和共凝集试验、体外黏附试验、抑菌试验、清除自由基试验和安全性评价,分别检测了4株分离菌株的益生特性和安全性。检测结果表明,GKM5‑30菌株相比于其他的乳酸菌表现出更为优异的黏附能力、凝集能力、抑菌活性及抗氧化能力,具有良好的益生特性和安全性,具备进一步开发益生菌制剂的潜力。
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公开(公告)号:CN112831477A
公开(公告)日:2021-05-25
申请号:CN201911168617.3
申请日:2019-11-25
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/245 , A61K39/187 , A61K39/12 , A61P31/22 , A61P31/20 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了表达猪瘟病毒E2蛋白和猪圆环病毒Cap蛋白的重组伪狂犬病病毒株及其构建方法和用途。本发明通过fosmid基因操纵系统,将PRV TJ株基因组TK和gE/gI基因部分缺失,将Cap与gG(US4)融合,在US9插入E2表达框,拯救表达猪瘟病毒E2蛋白和猪圆环病毒Cap蛋白的重组伪狂犬病病毒株,其在体外的复制和生长动力学与亲本病毒相当,外源基因的插入不影响重组病毒株的遗传稳定性;用该重组伪狂犬病毒株免疫猪,能诱导出较强的PRV特异性体液免疫应答,未显示出任何PRV特异性的临床症状。本发明所构建的重组伪狂犬病病毒株能用于制备预防伪狂犬病、猪瘟病或/和猪圆环病毒所导致疾病疫苗。
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公开(公告)号:CN105695634B
公开(公告)日:2019-05-14
申请号:CN201610183350.5
申请日:2016-03-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了检测非洲猪瘟病毒的PCR引物、试剂盒及其应用,属于非洲猪瘟病毒的检测领域。本发明首先根据GenBank上ASFV p72基因的保守区域设计了4对引物,从中筛选出特异性强、敏感性高的引物,该引物由SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的核苷酸序列组成。本发明进一步公开了用所述引物制备得到的检测非洲猪瘟病毒的试剂盒并建立了相应的PCR检测方法,本发明建立的检测方法比OIE推荐的两种非洲猪瘟病毒PCR检测方法更特异、更敏感;临床样品检测结果表明本发明PCR检测方法操作简单,成本低,特异性好,敏感性高,能有效的应用于非洲猪瘟的筛查和快速诊断。
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