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公开(公告)号：CN119162129A
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202411276972.3
申请日：2024-09-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了共表达高斯荧光素酶与绿色荧光蛋白的重组非洲猪瘟病毒株及其应用。本发明构建了由p72启动子启动的Gluc与EGFP报告基因转移载体；利用同源重组，插入到ASFV MGF300‑4L基因的终止密码子之后，得到共表达Gluc与EGFP的重组非洲猪瘟病毒株；作为首个未缺失任何病毒基因的表达荧光蛋白和荧光素酶的重组ASFV，其插入的报告基因EGFP与Gluc能稳定表达，并且该报告病毒的生物学特性与亲本毒株无显著差异；与缺失病毒基因的现有重组ASFV病毒株相比，本发明构建的重组非洲猪瘟病毒株在代替亲本毒株研究病毒的感染、致病机制或用于抗病毒药物筛选时更具代表性。
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公开(公告)号：CN113106071A
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN202010033003.0
申请日：2020-01-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/00 , C12N15/63 , C12N5/10 , A61K39/187 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了HQ06表位突变的猪瘟候选标记疫苗株及其应用。本发明以C株为骨架，单个点突变E2蛋白HQ06抗原表位的3个关键氨基酸117F、119G和122P，构建了3株突变体病毒。本发明所构建的3株突变体病毒均失去了与单克隆抗体(mAb)HQ06的反应性，保留了与CSFV E2蛋白其他抗原位点的反应性，生物学特性与C株保持一致；其中，rHCLV‑E2P122A在体外可达到亲本病毒的生长滴度，在家兔和家猪体内均能够诱导机体产生针对CSFV E2的抗体和针对CSFV的中和抗体，但失去了诱导机体产生针对HQ06抗原表位的特异性抗体，本发明的rHCLV‑E2P122A毒株能够开发成猪瘟标记疫苗。
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公开(公告)号：CN107723281B
公开(公告)日：2021-02-12
申请号：CN201710808897.4
申请日：2017-09-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , C12N15/34 , A61K39/295 , A61K39/187 , A61K39/12 , A61P31/14 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组猪瘟兔化弱毒疫苗株及其应用。本发明以猪瘟兔化弱毒株(C株)为活病毒载体，在C株Npro和C基因之间引入去除核定位信号并在N端加有分泌信号肽的猪圆环病毒2型Cap基因，构建了表达分泌型猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组猪瘟兔化弱毒疫苗株rHCLV‑uspCap和rHCLV‑pspCap，其微生物保藏编号分别为CGMCC No.14321和CGMCC No.14322。本发明所构建的2株重组病毒株能够稳定表达Cap蛋白，并保持亲本病毒的生长特性，而且能诱导家兔同时产生针对猪瘟病毒和猪圆环病毒2型的抗体，在制备防控猪瘟和猪圆环病毒病的二价疫苗中具有应用潜力。
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公开(公告)号：CN105802921B
公开(公告)日：2020-08-18
申请号：CN201610236150.1
申请日：2016-04-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/01 , A61K39/295 , A61K39/187 , A61K39/245 , A61P31/14 , A61P31/22
Abstract: 本发明公开了表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株及其构建方法和应用。本发明首先公开了一株表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株，是以gE、gI及TK三基因缺失的重组伪狂犬病病毒变异株为载体构建的表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株，其微生物保藏编号为：CGMCC No.12038。本发明所述表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株具有遗传稳定性，能够稳定表达E2蛋白，对仔猪具有很高的安全性，能够同时诱导高水平的伪狂犬病病毒和猪瘟病毒的特异性抗体及中和抗体，对猪瘟病毒和伪狂犬病病毒变异株的攻击能够提供完全的保护，可作为防控当前流行的伪狂犬病病毒变异株及猪瘟病毒混合感染的二价基因工程疫苗候选株。
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公开(公告)号：CN105505937B
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201610121443.5
申请日：2014-06-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , A61K48/00 , A61K31/7088 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了抗猪瘟病毒感染的siRNA及其应用，属于抗猪瘟病毒siRNA的鉴定及其应用领域。本发明首先公开了分别靶向猪瘟病毒基因组Npro、P7、NS5A和NS5B基因的抗猪瘟病毒感染的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1‑12所示。本发明进一步利用构建的重组猪瘟病毒筛选出对猪瘟病毒干扰或抑制活性最强的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.12所示。本发明还公开了含有所述抗猪瘟病毒感染的siRNA的表达载体及其应用。本发明抗猪瘟病毒感染的siRNA对猪瘟病毒抑制活性强，具有制备成预防或治疗猪瘟的药物或试剂的潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108754616A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810374527.9
申请日：2018-04-24
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
CPC classification number: C40B50/06 , C07K14/43595 , C12N7/00 , C12N2710/16721 , C40B40/06
Abstract: 本发明公开了伪狂犬病病毒(PRV)基因组Fosmid文库、构建方法及其在构建PRV突变体中的应用。本发明构建了PRVTJ株基因组Fosmid文库，从中选取了10组能覆盖完整PRV基因组且相互有重叠区域的5粘粒系统，从中筛选出5组可拯救出完整PRV的粘粒并鉴定出最佳粘粒组合，应用该粘粒组合构建了与VP26融合表达EGFP的重组PRV，该报告病毒与亲本病毒在滴度与生长特性上无差异。本发明将庞大的PRV基因组分成几个小片段构建Fosmid文库，提高了文库的稳定性，同时使PRV基因的改造和修饰更加简单、方便，缩短了构建文库的周期。本发明为对PRV基因组进行快速、准确修饰及构建重组疫苗等奠定了基础。
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公开(公告)号：CN104059889B
公开(公告)日：2017-01-25
申请号：CN201410105058.2
申请日：2014-03-20
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/04 , C12N15/63 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了伪狂犬病病毒变异株双基因缺失毒株及其构建方法和应用。本发明提供了一株缺失gI和gE基因的伪狂犬病病毒株，其微生物保藏编号是CGMCC.No.8786。本发明进一步提供了构建所述双基因缺失毒株的方法，包括（：1）构建含有EGFP和Neo基因完整表达盒的伪狂犬病病毒TJ株转移载体；（2）将转移载体转染于接种伪狂犬病病毒TJ株后的细胞，获得过渡病毒（；3）过渡病毒基因组酶切处理后与转移载体共转染细胞，经蚀斑筛选即得。本发明缺失毒株被完全致弱，免疫猪只后未出现任何临床反应，能够迅速诱导伪狂犬病病毒特异性抗体的产生，中和抗体滴度高，对当前流行的伪狂犬病病毒变异株的攻击能提供完全的免疫保护。
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公开(公告)号：CN105779650A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610202313.4
申请日：2016-04-01
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于鉴别伪狂犬病病毒经典株、变异株和Bartha?K61疫苗株的三重荧光定量PCR的引物、探针和试剂盒。本发明首先公开了用于鉴别伪狂犬病病毒经典株、变异株和Bartha?K61疫苗株的三重荧光定量PCR的引物及探针，其中引物序列为SEQ ID No.8?9、SEQ ID No.14?15所示，探针序列为SEQ ID No.1、4和6所示。本发明进一步公开一种三重荧光定量PCR检测试剂盒，该试剂盒基于三种标记不同荧光信号的TaqMan探针，可以准确鉴别伪狂犬病病毒经典株、变异株和Bartha?K61疫苗株，具有良好的敏感性和特异性，能够应用于伪狂犬病病毒毒株的区别检测。
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公开(公告)号：CN105505938A
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201610121449.2
申请日：2014-06-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , A61K48/00 , A61K31/7088 , A61P31/14
CPC classification number: C12N15/1131 , C12N2310/14
Abstract: 本发明公开了抗猪瘟病毒感染的siRNA及其应用，属于抗猪瘟病毒siRNA的鉴定及其应用领域。本发明首先公开了分别靶向猪瘟病毒基因组Npro、P7、NS5A和NS5B基因的抗猪瘟病毒感染的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1-12所示。本发明进一步利用构建的重组猪瘟病毒筛选出对猪瘟病毒干扰或抑制活性最强的siRNA，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.12所示。本发明还公开了含有所述抗猪瘟病毒感染的siRNA的表达载体及其应用。本发明抗猪瘟病毒感染的siRNA对猪瘟病毒抑制活性强，具有制备成预防或治疗猪瘟的药物或试剂的潜力。
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公开(公告)号：CN103255111A
公开(公告)日：2013-08-21
申请号：CN201310069486.X
申请日：2013-03-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/01 , G01N33/569 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了绿色荧光蛋白标记的重组猪瘟病毒及其拯救方法和应用。本发明将绿色荧光蛋白编码基因插入到猪瘟病毒感染性克隆Npro蛋白编码区的第13位与第14位氨基酸之间，通过转染PK-15细胞、传代，拯救出可视化的绿色荧光蛋白标记的重组猪瘟病毒。所述重组猪瘟病毒的生长特性与其亲本病毒一致，感染PK-15细胞后通过荧光显微镜直接可视，用其建立的改进中和试验方法（EGFP-NT）能够借助荧光显微镜直接观察猪瘟病毒的存在与否并确定待检血清中的中和抗体效价，无需额外的免疫荧光试验步骤，其特异性和敏感性与传统的中和免疫荧光试验一致，却更加方便快捷，可替代中和免疫荧光试验方法用于猪瘟血清学检测和流行病学调查。
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