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公开(公告)号:CN115806943A
公开(公告)日:2023-03-17
申请号:CN202210763914.8
申请日:2022-06-30
摘要: 本发明公开了双荧光标记的重组伪狂犬病病毒株及其构建方法和应用。本发明利用PRV TJ株Fosmid文库在病毒基因组US9和US2基因之间非编码区插入ANCHOR3系统的完整序列,同时在UL10基因的终止密码子前插入了mCherry基因序列,获得了基因组和囊膜蛋白分别标记绿色荧光和红色荧光的重组伪狂犬病病毒株。经体内外评估,外源基因的插入不影响重组病毒的生长特征、病毒形态、遗传稳定性和安全性。采用该重组病毒成功示踪了完整的PRV复制周期并评价了抗病毒药物抑制PRV复制的效果,建立了PRV体外温控可视化潜伏感染模型,可用于PRV潜伏感染模型及抗病毒药物筛选、神经回路示踪、病毒和宿主蛋白功能研究等。
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公开(公告)号:CN113122655A
公开(公告)日:2021-07-16
申请号:CN201911389185.9
申请日:2019-12-30
IPC分类号: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/63 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要: 本发明公开了非洲猪瘟病毒EP402R基因TaqMan荧光定量PCR检测方法。本发明选择目前中国流行的ASFV重要毒力相关因子EP402R基因(CD2v)基因为靶标,构建了阳性质粒标准品并设计了检测非洲猪瘟病毒EP402R基因的实时荧光定量PCR引物和探针,在此基础上,本发明进一步建立了非洲猪瘟病毒EP402R基因TaqMan荧光定量PCR检测方法。本发明所建立的非洲猪瘟病毒EP402R基因TaqMan荧光定量PCR检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好,与已有的经典检测方法符合率高,不仅丰富了ASFV现有检测靶标,在ASFV疫苗毒与野毒的检测上也有重要的应用前景。
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公开(公告)号:CN104894076B
公开(公告)日:2018-08-31
申请号:CN201510296045.2
申请日:2015-06-02
申请人: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC分类号: C12N7/01 , C12N15/869 , C12N15/40 , A61K39/245 , A61K39/187 , A61P31/22 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要: 本发明公开了表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株及其应用,属于伪狂犬病病毒变异株的构建及应用领域。本发明以gE/gI双基因缺失重组病毒rPRVTJ‑delgE/gI为基础,在rPRVTJ‑delgE/gI中插入猪瘟病毒E2基因,对所获得的重组病毒克隆最终筛选出一株复制特性好、稳定性好、外源蛋白表达量高的重组病毒株rPRVTJ‑delgE/gI‑E2,其微生物保藏编号为:CGMCC No.10411。本发明重组病毒株rPRVTJ‑delgE/gI‑E2具有良好的安全性和免疫原性,免疫仔猪后能够对PRV及CSFV的攻击提供完全保护,能够应用于制备预防或治疗猪瘟和/或伪狂犬病的疫苗或试剂。
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公开(公告)号:CN105505937A
公开(公告)日:2016-04-20
申请号:CN201610121443.5
申请日:2014-06-09
申请人: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC分类号: C12N15/113 , C12N15/85 , A61K48/00 , A61K31/7088 , A61P31/14
CPC分类号: C12N15/1131 , C12N2310/14
摘要: 本发明公开了抗猪瘟病毒感染的siRNA及其应用,属于抗猪瘟病毒siRNA的鉴定及其应用领域。本发明首先公开了分别靶向猪瘟病毒基因组Npro、P7、NS5A和NS5B基因的抗猪瘟病毒感染的siRNA,其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1-12所示。本发明进一步利用构建的重组猪瘟病毒筛选出对猪瘟病毒干扰或抑制活性最强的siRNA,其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.12所示。本发明还公开了含有所述抗猪瘟病毒感染的siRNA的表达载体及其应用。本发明抗猪瘟病毒感染的siRNA对猪瘟病毒抑制活性强,具有制备成预防或治疗猪瘟的药物或试剂的潜力。
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公开(公告)号:CN104894076A
公开(公告)日:2015-09-09
申请号:CN201510296045.2
申请日:2015-06-02
申请人: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC分类号: C12N7/01 , C12N15/869 , C12N15/40 , A61K39/245 , A61K39/187 , A61P31/22 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要: 本发明公开了表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株及其应用,属于伪狂犬病病毒变异株的构建及应用领域。本发明以gE/gI双基因缺失重组病毒rPRVTJ-delgE/gI为基础,在rPRVTJ-delgE/gI中插入猪瘟病毒E2基因,对所获得的重组病毒克隆最终筛选出一株复制特性好、稳定性好、外源蛋白表达量高的重组病毒株rPRVTJ-delgE/gI-E2,其微生物保藏编号为:CGMCC?No.10411。本发明重组病毒株rPRVTJ-delgE/gI-E2具有良好的安全性和免疫原性,免疫仔猪后能够对PRV及CSFV的攻击提供完全保护,能够应用于制备预防或治疗猪瘟和/或伪狂犬病的疫苗或试剂。
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公开(公告)号:CN101696454A
公开(公告)日:2010-04-21
申请号:CN200910180317.7
申请日:2009-10-22
申请人: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
摘要: 本发明公开了一套用于可视化检测猪瘟病毒野毒株的RT-LAMP引物,所述RT-LAMP引物由一对外围引物和一对内引物组成,其中,这一对外围引物的序列为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:1所示,一对内引物的序列分别为SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。以本发明所设计的引物采用RT-LAMP检测方法对各种基因型CSFV野毒株进行检测,检测结果均为阳性,而对猪瘟兔化弱毒疫苗株、牛病毒性腹泻病毒以及其它常见猪源病毒检测结果均为阴性。应用本发明引物序列采用RT-LAMP检测方法,可以非常准确地区分CSFV野毒株和CSFV疫苗株,具有特异性强、灵敏性高、重复性好等优点。
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公开(公告)号:CN1458280A
公开(公告)日:2003-11-26
申请号:CN03132416.9
申请日:2003-06-02
申请人: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC分类号: C12P19/34 , C12N15/46 , C12N15/63 , C07H21/00 , G01N33/96 , A61K39/15 , A61K48/00 , A61P31/12
摘要: 两个人工合成PRRS病毒多表位串联核苷酸序列及其应用,即两个人猪繁殖与呼吸综合征病毒多表位串联核苷酸序列及其应用。根据PRRSV的GP5蛋白基因和N蛋白基因上的抗原表位,设计了8个串联的表位并进行人工合成,合成的核苷酸片段用PVUII酶切成两段,分别克隆到含GST基因的质粒载体中,并进行表达。两个分别含3个串联的PRRSV表位和5个串联的PRRSV表位的核苷酸序列在大肠杆菌表达系统中表达的多肽用作诊断抗原或制备疫苗。此两种表达产物单独和混合可作为检测PRRSV抗体的诊断抗原,也可制备亚单位疫苗或核酸疫苗。
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公开(公告)号:CN113736746B
公开(公告)日:2023-07-14
申请号:CN202110788781.5
申请日:2021-07-13
摘要: 本发明公开了在传代细胞系中良好复制的非洲猪瘟病毒(ASFV)适应毒株及其应用。本发明通过不同传代细胞系的感染实验发现ASFV野毒株(ASFV‑WT)可在HEK293T细胞中低水平复制。将ASFV‑WT在HEK293T细胞中连续传代适应获得了可在HEK293T细胞高效增殖的ASFV适应毒株ASFV‑P61,其病毒滴度最高可以达到107.5TCID50/mL,该适应毒株的微生物保藏编号是CCTCC NO:V202153。此外,该适应毒株基因组5’端的多基因家族缺失基因(包含多个毒力相关基因)序列达20kb左右,表明其毒力可能已经致弱,具有研制成为非洲猪瘟疫苗候选株的潜能。
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公开(公告)号:CN116355863A
公开(公告)日:2023-06-30
申请号:CN202310278967.5
申请日:2023-03-21
IPC分类号: C12N7/00 , G01N33/569 , A61K39/12 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要: 本发明公开了适应传代细胞培养的猪非典型瘟病毒分离株及其用途。本发明从确定为APPV感染的死亡仔猪中分离到一株适应传代细胞培养的APPV分离株,其微生物保藏编号是:CGMCC No.45417。该分离株可以在PK‑15细胞中连续稳定传代和增殖,且传代过程中病毒滴度逐渐增高。病毒中和试验(VNT)表明基于该分离株进行的VNT能够有效区分APPV抗体阳性血清和阴性血清。本发明提供的APPV分离株为APPV的生物学和致病性研究以及疫苗和诊断试剂的开发提供关键材料,对APPV引起的疾病诊断、感染监测体系的完善和所致疾病流行的控制等具有重要应用前景,同时还可用于制备诊断或防治APPV感染的检测试剂或疫苗。
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公开(公告)号:CN112877231B
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN201911206844.0
申请日:2019-11-29
摘要: 本发明公开了具有抑菌和抗氧化活性的乳酸菌及其应用。为了获得安全、具有良好益生特性的菌株,本发明从中国大兴安岭地区的野猪粪便中分离乳酸菌,经16S rDNA鉴定和耐酸、耐胆盐试验初步筛选出了4株候选菌株;本发明进一步通过自凝集和共凝集试验、体外黏附试验、抑菌试验、清除自由基试验和安全性评价,分别检测了4株分离菌株的益生特性和安全性。检测结果表明,GKM5‑30菌株相比于其他的乳酸菌表现出更为优异的黏附能力、凝集能力、抑菌活性及抗氧化能力,具有良好的益生特性和安全性,具备进一步开发益生菌制剂的潜力。
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