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公开(公告)号：CN111876476A
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN202010731784.0
申请日：2020-07-27
Applicant: 暨南大学 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12Q1/6876 , C12Q1/6848 , C12N15/11 , C12N15/85 , C07K16/10
Abstract: 本发明涉及基因工程及抗体制备领域，具体而言，涉及一种用于扩增马抗体的巢式PCR引物、试剂盒及其应用。该巢式PCR引物可匹配的抗体重链及轻链基因的阳性率为56％左右，进而能够从单个B淋巴细胞分离抗体基因的方法，并制备高通量马源抗体。该方法保留了轻链重链可变区的天然配对，具有基因多样性好、效价高、抗体亲和力好、特异性强、实验周期短等优势，为研制传染性疾病及自身免疫性疾病的单克隆抗体的预防与治疗性药物或诊断性抗体提供了一条广阔的途径，同时也为生命科学基础研究获得外源性蛋白的抗体提供了一个更加高效、简单、快速的方法。
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公开(公告)号：CN112501273B
公开(公告)日：2021-06-29
申请号：CN202011488629.7
申请日：2020-12-16
Applicant: 暨南大学 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/6876 , C12Q1/6848 , C12N15/11 , C12N15/85 , C07K16/10
Abstract: 本发明涉及基因工程及抗体制备领域，具体而言，涉及一种用于扩增马抗体的巢式PCR引物、试剂盒及其应用。该巢式PCR引物可匹配的抗体重链及轻链基因的阳性率为56％左右，进而能够从单个B淋巴细胞分离抗体基因的方法，并制备高通量马源抗体。该方法保留了轻链重链可变区的天然配对，具有基因多样性好、效价高、抗体亲和力好、特异性强、实验周期短等优势，为研制传染性疾病及自身免疫性疾病的单克隆抗体的预防与治疗性药物或诊断性抗体提供了一条广阔的途径，同时也为生命科学基础研究获得外源性蛋白的抗体提供了一个更加高效、简单、快速的方法。
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公开(公告)号：CN112501273A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011488629.7
申请日：2020-12-16
Applicant: 暨南大学 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/6876 , C12Q1/6848 , C12N15/11 , C12N15/85 , C07K16/10
Abstract: 本发明涉及基因工程及抗体制备领域，具体而言，涉及一种用于扩增马抗体的巢式PCR引物、试剂盒及其应用。该巢式PCR引物可匹配的抗体重链及轻链基因的阳性率为56％左右，进而能够从单个B淋巴细胞分离抗体基因的方法，并制备高通量马源抗体。该方法保留了轻链重链可变区的天然配对，具有基因多样性好、效价高、抗体亲和力好、特异性强、实验周期短等优势，为研制传染性疾病及自身免疫性疾病的单克隆抗体的预防与治疗性药物或诊断性抗体提供了一条广阔的途径，同时也为生命科学基础研究获得外源性蛋白的抗体提供了一个更加高效、简单、快速的方法。
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公开(公告)号：CN104020294A
公开(公告)日：2014-09-03
申请号：CN201410239152.7
申请日：2014-05-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: G01N33/68
CPC classification number: G01N33/56983 , G01N33/54373 , G01N33/58 , G01N33/581 , G01N33/582 , G01N2333/155
Abstract: 本发明公开了一种用于检测马传染性贫血病毒p26蛋白的试剂盒及其用途。本发明所述试剂盒中包含由保藏号CGMCC NO.9106以及保藏号为CGMCC NO.9107的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体，其中任选一种单克隆抗体是用辣根过氧化物酶或异硫氰酸荧光素或生物素标记的。本发明发明人制备并筛选得到的两株杂交瘤细胞株能够识别马传染性贫血病毒p26蛋白不同抗原表位，且实验证明该两株杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体只与马传染性贫血病毒而不与其他马源病毒反应，使用本发明的方法检测马传染性贫血病毒p26蛋白抗原，其最低检测下限为98pg。本发明为马传染性贫血病毒的检测提供了一种有效的，准确性高的新的检测手段，同时为马传染性贫血病毒的防治提供了技术支撑。
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公开(公告)号：CN101935714B
公开(公告)日：2013-01-09
申请号：CN201010274291.5
申请日：2010-09-07
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了鉴别中国马传染性贫血病毒弱毒疫苗株和美洲毒株的引物。鉴别中国马传染性贫血病毒弱毒疫苗株的引物由引物对1和引物对2所组成，其中，引物对1的序列为SEQ ID NO.1和SEQ IDNO.2所示，引物对2序列为SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；鉴别美洲株的引物由引物对3和引物对4所组成，引物对3的序列为SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示，引物对4的序列为SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示。以本发明特异性引物所建立的环介导等温扩增方法，可以准确的鉴别中国马传染性贫血病毒弱毒疫苗株和美洲毒株，该方法特异性强、灵敏度高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102277451A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110235671.2
申请日：2011-08-17
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了扩增马传染性贫血病毒主要经典毒株gp90基因的通用nest-PCR引物组，还涉及使用所述的引物组对待测样品进行nest-PCR扩增，检测马传染性贫血病毒的方法以及所述引物组在制备检测或诊断马传染性贫血病毒的生物试剂中的用途。本发明基于EIAV主要经典毒株EIAVwyo、EIAVArgen、EIAVLN40的全基因序列比对，基于保守区设计扩增引物。实验结果表明，本发明设计的nest-PCR引物可通用于EIAV主要代表毒株gp90基因的扩增，对于现地分离株同样具有扩增特异性。本研究建立的nest-PCR引物，可用于临床EIAV流行毒株分子流行病学研究，是扩增gp90基因的有效通用引物。
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公开(公告)号：CN117843773A
公开(公告)日：2024-04-09
申请号：CN202410059115.1
申请日：2024-01-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 珠海泰诺麦博制药股份有限公司
Inventor： 王亚玉 , 林跃智 , 廖化新 , 王晓钧 , 郑伟宏 , 郭巍 , 王月明 , 胡哲 , 袁晓辉 , 杜承 , 刘彤 , 王雪峰 , 王孝丽 , 刘荻萩 , 吴昌文 , 孙留克 , 贾振兴
Abstract: 本发明公开了一种能够中和马流感病毒的全马源单克隆抗体及其应用。所述的全马源单克隆抗体由轻链和重链组成，其中轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，重链的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。细胞实验以及动物实验均证明该全马源单克隆抗体具有很好的中和马流感流行毒株JL89的能力。因此，该全马源单克隆抗体具有极高的研究价值，可以在大流行早期进行被动免疫保护，以减轻病毒在疫苗生产期间的危害。同时，本发明重点分析了该全马源单克隆抗体与HA蛋白的结合表位，为保护性流感疫苗的开发提供了基础。
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公开(公告)号：CN101696398B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN200910180318.1
申请日：2009-10-22
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了马传染性贫血病毒(Equine Infectious AnemiaVirus，EIAV)致病强毒株EIAVDLV34的驴胎皮肤(FDD)细胞适应株及其应用。本发明选择FDD细胞作为感染介质，将EIAVDLV34毒株在FDD细胞进行6次传代，获得的毒株命名为EIAV-DLV34-F6，其微生物保藏号是：CGMCC No.3231。本发明所建立的毒株可以在体外培养的FDD细胞上进行良好复制，并保持其致病性和基因特点，该毒株的建立为EI AV及慢病毒毒力和免疫原性相关研究提供了重要的研究材料。
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公开(公告)号：CN117843773B
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202410059115.1
申请日：2024-01-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 珠海泰诺麦博制药股份有限公司
Inventor： 王亚玉 , 林跃智 , 廖化新 , 王晓钧 , 郑伟宏 , 郭巍 , 王月明 , 胡哲 , 袁晓辉 , 杜承 , 刘彤 , 王雪峰 , 王孝丽 , 刘荻萩 , 吴昌文 , 孙留克 , 贾振兴
Abstract: 本发明公开了一种能够中和马流感病毒的全马源单克隆抗体及其应用。所述的全马源单克隆抗体由轻链和重链组成，其中轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，重链的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。细胞实验以及动物实验均证明该全马源单克隆抗体具有很好的中和马流感流行毒株JL89的能力。因此，该全马源单克隆抗体具有极高的研究价值，可以在大流行早期进行被动免疫保护，以减轻病毒在疫苗生产期间的危害。同时，本发明重点分析了该全马源单克隆抗体与HA蛋白的结合表位，为保护性流感疫苗的开发提供了基础。
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公开(公告)号：CN117143826A
公开(公告)日：2023-12-01
申请号：CN202311002569.7
申请日：2023-08-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/24 , G01N33/68 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种检测马IL‑1β双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用。本发明分别使用由保藏号CGMCC No.45601和CGMCC No.45602的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体作为捕获抗体和检测抗体，建立了双抗体夹心ELISA方法。特异性试验结果表明该方法特异性良好，与IL‑1α、IL‑1Ra、IFN‑α和SAA均不发生反应。灵敏性试验表明该方法对IL‑1β的最低检出量为143pg/mL，灵敏度为9.3pg/mL；检测范围为200‑10000pg/mL。重复性试验表明该方法变异系数均小于5％，确定该方法具有良好的重复性。通过对临床样品的检测发现，本发明建立的双抗体夹心ELISA方法与RD公司的DY3340双抗体夹心ELISA方法的检测结果基本一致，符合率为94％。本发明的提出为检测马IL‑1β提供了一种快速检测方法和监测手段。
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