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公开(公告)号：CN116478937A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310686418.1
申请日：2023-06-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株基因III型禽呼肠孤病毒变异株及其在制备疫苗中的应用。本发明从送检的病鸡关节组织中成功分离到1株基因III型禽呼肠孤病毒变异株，命名为ARV‑HLJ21‑1690401，该变异株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.45563。σC基因遗传进化分析结果表明，该变异株位于ARV基因III型分支。该变异株对鸡胚和SPF鸡均具有明显的致病性，可引起接种鸡胚90%死亡，接种6周龄SPF鸡100%发病。将其制备灭活疫苗，免疫SPF鸡可诱导产生较好的抗体水平，并能为同基因型毒株提供完全免疫保护。本发明的提出为预防禽呼肠孤病毒病提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN116445493A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202211216666.1
申请日：2022-09-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种突变后的Tva基因及其在抗A亚群及K亚群禽白血病病毒感染中的应用。所述的突变后的禽白血病病毒受体基因(Tva)所编码的Tva蛋白的第58位的氨基酸G突变为N、第59位的H突变为D，第69位的W突变为L、第70位的G突变为PQR。本发明发现Tva作为A亚群及K亚群禽白血病病毒的共受体分子，将其关键功能性氨基酸位点G58、H59、W69及G70突变后，构建相应的Tva表达质粒，将其转染Tva缺失的DF‑1细胞后，其无法介导A、K亚群ALV感染宿主细胞，丧失了其作为禽白血病病毒受体的功能。本发明的提出为进一步研究Tva基因的功能及建立同时抗A、K亚群ALV感染的细胞系提供了技术手段。
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公开(公告)号：CN115287270B
公开(公告)日：2023-01-06
申请号：CN202211223789.8
申请日：2022-10-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/00 , A61K39/155 , A61P31/14 , A61P11/02 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种B亚型禽偏肺病毒传代致弱株及其应用。本发明通过在Vero细胞中连续传代来致弱LN16‑V毒株，获得了致弱株LN16‑A，命名为LN16‑A株，其保藏号为：CGMCC NO.45261。将传代致弱株LN16‑A免疫3周龄SPF鸡并进行了系统的免疫保护评价，结果表明LN16‑A免疫机体后，可以诱导产生较高水平的aMPV特异性抗体和中和抗体，对强毒的攻击可提供100%的免疫保护，具有良好的免疫保护效果，可以有效预防强毒攻击造成的病理损伤。本发明为B亚型禽偏肺病毒病的防控提供了新的技术手段，对家禽业健康发展具有重要意义。
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公开(公告)号：CN110261599B
公开(公告)日：2022-02-08
申请号：CN201910406683.3
申请日：2019-05-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/535 , G01N33/569 , G01N33/537
Abstract: 本发明公开了一种检测A、B亚群禽白血病病毒抗体的ELISA试剂盒及其应用。包括包被截短表达的ALV‑A gp85蛋白以及截短表达的ALV‑B gp85蛋白的酶标板，其中，所述的截短表达的ALV‑A gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述的截短表达的ALV‑B gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明利用截短表达的A、B亚群禽白血病病毒的gp85蛋白建立了A、B亚群禽白血病病毒的抗体间接ELISA检测方法，试验表明，该试剂盒用于检测A、B亚群禽白血病病毒抗体时，其敏感性与同类进口试剂盒相当，但特异性优于同类进口试剂盒，与J亚群禽白血病病毒抗体无交叉反应。本发明的提出为A、B亚群禽白血病病毒的检测和流行病学调查以及早期诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号：CN111647568A
公开(公告)日：2020-09-11
申请号：CN202010312138.0
申请日：2020-04-20
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒新型变异株反向遗传疫苗株及其应用。所述的鸡传染性法氏囊病病毒新型变异株反向遗传疫苗株，命名为rGtVarVP2，该疫苗株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.19383，保藏时间为2020年3月12日。rGtVarVP2是一株以弱毒株Gt为骨架，其主要保护性抗原基因VP2被新型变异株SHG19相应区段替换的重组IBDV，且SHG19的VP2被引入了双点突变Q253H/A284T。双点突变Q253H/A284T的引入使原本不能够适应体外细胞系的重组毒株能够在DF1细胞上增殖。将重组病毒rGtVarVP2在DF1细胞上扩繁，然后制备成IBDV新型变异株反向遗传疫苗(rGtVarVP2株)，动物试验表明，IBDV新型变异株反向遗传疫苗(rGtVarVP2株)安全、有效。
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公开(公告)号：CN110358733A
公开(公告)日：2019-10-22
申请号：CN201910439753.5
申请日：2019-05-24
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株稳定表达A亚群禽白血病病毒(ALV-A)gp85蛋白的细胞系及应用。所述的稳定表达A亚群禽白血病病毒gp85蛋白的细胞系，命名为293F-Agp85，该细胞系保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其菌种保藏编号为CGMCC NO.17420。实验证明，该细胞系可以高效稳定表达A亚群禽白血病病毒gp85蛋白，其表达量高达25mg/L。此外，通过与细胞受体Tva互作和结合试验结果表明，由本发明细胞系表达获得的ALV-A gp85蛋白具有正常的生物学活性，能够与细胞受体正常结合，并没有影响其生物学活性，且由于其表达量高，不需要转染，成本低，在体外研究ALV-A感染细胞的机制和建立抗体检测方法等防控技术领域将具有良好的应用前景和意义。
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公开(公告)号：CN116836945A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310747124.5
申请日：2023-06-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株基因Ⅳ型禽呼肠孤病毒变异株及其在制备疫苗中的应用。所述的基因Ⅳ型禽呼肠孤病毒变异株，命名为ARV‑JS20‑9304，其保藏号为：CGMCCNO.45564。将本发明分离得到的ARV‑JS20‑9304毒株制备灭活疫苗免疫SPF鸡，攻毒后连续观察10天，每日观察鸡只临床症状并记录发病情况。实验结果发现，灭活疫苗免疫组在整个观察期内，鸡只未出现任何发病状态，所有鸡只精神状态良好，爪垫也未出现任何肿胀状态，表明ARV‑JS20‑9304毒株制备灭活疫苗可为同基因型强毒提供完全保护。本发明的提出为当前鸡呼肠孤病毒新基因型疫苗储备研究提供了新的候选疫苗株，同时也为了解我国ARV变异株的流行及遗传进化特征提供了重要的理论依据。
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公开(公告)号：CN116574696A
公开(公告)日：2023-08-11
申请号：CN202211057927.X
申请日：2022-08-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种构建表达IBDVVP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒疫苗株的方法、该疫苗株和应用，属于医学或兽医学技术领域。所述的表达IBDVVP2基因的重组火鸡疱疹病毒是由含有HVT基因组DNA片段的重组粘粒H1、H2、H3、H5以及含有VP2表达框架的重组粘粒H4UL55‑VP2共转染CEF细胞后，通过病毒拯救获得的。具体地，本发明利用重组克隆技术，将包含IBDVVP2基因以及CMV启动子的基因片段CMV‑VP2插入到火鸡疱疹病毒(HVT)的UL55和HVT066基因之间的间隔区中，构建获得在UL55和HVT066基因之间插入CMV‑VP2表达框架的重组粘粒，由其拯救获得表达IBDVVP2基因的重组HVT疫苗株rHVTUL55‑VP2。本发明还涉及该重组HVT疫苗株在制备鸡传染性法氏囊病疫苗中的应用。
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公开(公告)号：CN115704032A
公开(公告)日：2023-02-17
申请号：CN202210114184.9
申请日：2022-01-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/12 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/55 , C12N15/85 , C07K14/705
Abstract: 本发明公开了一种突变后的A亚群禽白血病病毒(ALV‑A)受体基因及其在抗A亚群禽白血病病毒感染中的应用。本发明鉴定了介导A亚群禽白血病病毒(ALV‑A)感染鸡细胞的受体蛋白Tva的关键功能性氨基酸位点为L55及W69，发现将这两个位点突变后，将导致ALV‑A无法感染宿主细胞。进一步的，本发明还公开了一种构建抗ALV‑A感染的DF‑1细胞系的方法，该方法利用CRISPR/Cas9方法和流式细胞术筛选，将Tva基因作为ALV‑A受体的关键氨基酸位点L55及W69进行突变。结果表明，含有L55及W69位点突变的替换序列可高效定点替换Tva基因的相应序列；Tva基因编辑细胞系可在不影响细胞增殖水平的条件下抵抗ALV‑A的感染。本发明的提出为进一步研究Tva基因的功能及建立抗ALV‑A感染新技术奠定基础。
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公开(公告)号：CN112501129B
公开(公告)日：2022-12-02
申请号：CN202011466765.6
申请日：2020-12-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了抗IBDV VP2蛋白的单克隆抗体组合及其在鉴别检测IBDV中的用途。所述的单克隆抗体组合由抗IBDV VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株7D以及25C所分泌的单克隆抗体组成，其中杂交瘤细胞株7D以及25C的菌种保藏编号分别为CGMCC NO.21009以及CGMCC NO.21008。实验证明，7D对IBDV经典毒、超强毒和变异株均能识别，而25C只能识别IBDV经典毒和超强毒，不能识别IBDV变异株。此外，本发明还利用该两株单克隆抗体建立了间接免疫荧光技术，可鉴别检测IBDV变异株和非变异株(经典毒和超强毒)，因此，本发明的提出为IBDV的鉴别提供了新的技术手段，对于IBD的综合防控具有重要意义。
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