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公开(公告)号:CN112708684A
公开(公告)日:2021-04-27
申请号:CN202011503796.4
申请日:2020-12-17
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6862 , C12Q1/14 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开一种超敏感的电化学LCR传感器用于检测关节液中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,包括如下步骤:(1)根据MecA基因的保守系列设计特异性的两条双链短探针(S‑dsDNA)。(2)在LCR反应体系中,以MecA基因为模板,通过DNA连接酶将两条短系列的探针连接形成长的双链DNA(L‑dsDNA)。接着以L‑dsDNA模板,进行循环扩增形成大量L‑dsDNA。(3)将形成的带有巯基及生物素修饰的L‑dsDNA通过金‑硫键固定于BSA修饰的金电极上,通过滴加亲和素‑PolyHRP与L‑dsDNA上的生物素结合,最后将电极置于含TMB和H2O2的底液中,在HRP的催化下,H2O2能氧化TMB产生电化学信号。本方法具有经济、快速、高灵敏度及特异性等优点,可用于单碱基突变系列的检测,并且实现了对关节假体周围感染病人关节液中MRSA的检测。
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公开(公告)号:CN116559257A
公开(公告)日:2023-08-08
申请号:CN202310504271.X
申请日:2023-05-07
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: G01N27/327
Abstract: 本发明公开一种可用于摇摆型碱基对等位基因分型的比率型DNA电化学传感器,特点是创新性地利用非特异性扩增策略(连接酶链式反应,LCR),以及与摇摆型碱基对(GT、AC)相比,沃克森碱基对(GC、AT)具有更高扩增效率且在LCR中占主导作用的特性。以等位基因为目标基因,基于沃克森碱基对互补原则,设计了两个LCR(LCRFc→G和LCRMB→A),选用在临床样品中具备稳定检测性能的电活性指示剂二茂铁(Fc)和亚甲基蓝(MB)作为两个LCR的电化学响应信号,并将其电流比值(IMB/IFc)作为等位基因分型的输出信号,最后,依据IMB/IFc区域划分可实现摇摆型碱基对等位基因分型(纯合野生型、纯合突变型、杂合型)的精准测定。
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公开(公告)号:CN110124058B
公开(公告)日:2021-11-26
申请号:CN201910488672.4
申请日:2019-06-06
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: A61K47/69 , A61K31/704 , A61P35/00 , C12N5/0775
Abstract: 本发明公开一种来源于骨髓间充质干细胞外泌体‑阿霉素纳米靶向药物的制备及体外抗骨肉瘤的研究。包括如下步骤:(1)以无血清培养基培养BM‑MSC,并用外泌体提取试剂盒提取外泌体。(2)将外泌体与盐酸阿霉素按一定比例混合,加三乙胺脱盐,后将混合液置于透析袋4°C过夜制备外泌体‑阿霉素药物。(3)将制备的药物置于酶标仪,于490 nm处测量其吸收峰,计算药物的包载量。(4)将制备的药物用于体外抗骨肉瘤MG63细胞的疗效研究。本方法选择的MSC具有体内毒副作用小、低免疫原性、肿瘤靶向性及可体外大量扩增等优点,结合外泌体在体内广泛分布及具有归巢性的优点,其包载阿霉素后可有效地增强阿霉素对骨肉瘤细胞的杀伤作用。
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公开(公告)号:CN110434685B
公开(公告)日:2024-07-02
申请号:CN201910785011.8
申请日:2019-08-23
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
Abstract: 本发明公开了一种全自动电极打磨装置,包括机械臂、夹具、打磨装置、外壳及控制系统,所述机械臂的一端连接所述夹具,所述机械臂的另一端设于所述外壳上,所述打磨装置水平设于所述外壳上,所述控制系统分别电连接所述机械臂、所述夹具及所述打磨装置,所述夹具包括第一支架、第一电机、动齿轮组、夹子及弹力调节器。本公开装置可精确设置打磨力度、速度、时间,大大提高电极打磨效果的均一性,解决了手工打磨均一性差的问题,且本公开装置具有小型便携、成本低的优点。
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公开(公告)号:CN115772568A
公开(公告)日:2023-03-10
申请号:CN202211000633.3
申请日:2022-08-19
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: C12Q1/6886 , C12Q1/6862 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种检测慢性粒细胞白血病BCR/ABL融合基因的引物及试剂盒,包括LCR引物CP,SP,T1,T2,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑SEQID NO:4所示,或如SEQ ID NO:5‑SEQ ID NO:8所示。该引物检测限低和单碱基错配区分的能力强。
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公开(公告)号:CN112326763B
公开(公告)日:2022-10-21
申请号:CN202011018217.7
申请日:2020-09-24
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: G01N27/48
Abstract: 本发明公开一种可用于临床样品等位基因分型的DNA纳米筛可再生电化学传感器,特点是通过巯基修饰DNA在金电极表面的自组装构建一种能够区分ssDNA和dsDNA的界面型DNA纳米筛,其空腔大小可以通过改变巯基修饰DNA的浓度来调节,通过以[Ru(NH3)6]3+为氧化还原的电化学计时库仑法对界面上巯基DNA的间距进行表征,当巯基修饰DNA的间距小于dsDNA的长度时,dsDNA由于其刚性结构不能透过DNA纳米筛,而无规则卷曲结构的ssDNA由于其高度的柔韧性可以进入纳米筛,通过引入再生探针,构建了重现性性较好的DNA电化学模型。最后,我们以连接循环反应(LCR)为单链DNA扩增策略,构建了基于可再生纳米筛的DNA电化学传感器,实现了单个传感器的多个临床样本的连续检测。
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公开(公告)号:CN110124058A
公开(公告)日:2019-08-16
申请号:CN201910488672.4
申请日:2019-06-06
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: A61K47/69 , A61K31/704 , A61P35/00 , C12N5/0775
Abstract: 本发明公开一种来源于骨髓间充质干细胞外泌体-阿霉素纳米靶向药物的制备及体外抗骨肉瘤的研究。包括如下步骤:(1)以无血清培养基培养BM-MSC,并用外泌体提取试剂盒提取外泌体。(2)将外泌体与盐酸阿霉素按一定比例混合,加三乙胺脱盐,后将混合液置于透析袋4°C过夜制备外泌体-阿霉素药物。(3)将制备的药物置于酶标仪,于490 nm处测量其吸收峰,计算药物的包载量。(4)将制备的药物用于体外抗骨肉瘤MG63细胞的疗效研究。本方法选择的MSC具有体内毒副作用小、低免疫原性、肿瘤靶向性及可体外大量扩增等优点,结合外泌体在体内广泛分布及具有归巢性的优点,其包载阿霉素后可有效地增强阿霉素对骨肉瘤细胞的杀伤作用。
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公开(公告)号:CN119876356A
公开(公告)日:2025-04-25
申请号:CN202510143930.0
申请日:2025-02-10
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: C12Q1/6862 , C12Q1/6858 , C12Q1/6876 , G01N27/26
Abstract: 本发明公开一种基于瓣状核酸内切酶1辅助连接酶链式反应的基因突变检测方法。其特点是利用瓣状核酸内切酶1辅助连接酶链式反应对突变型DNA进行高效扩增,通过电化学终点定量检测法或实时荧光定量法对扩增产物进行分析,从而实现对低丰度突变型DNA的超灵敏定量检测。所提出的瓣状核酸内切酶1(FEN1)辅助连接酶链式反应(LCR)通过借助FEN1对摇摆碱基对的识别能力,有效解决了传统LCR检测“转换突变”时易出现的假阳性问题,对基因突变检测具有更高的通用性。此外该方法仅在靶标存在时通过FEN1的酶切效应产生磷酸化切刻,因此无须预先对探针进行磷酸化修饰,从而有效避免了非特异性扩增问题,较为显著提高了检测灵敏度。
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公开(公告)号:CN116769909A
公开(公告)日:2023-09-19
申请号:CN202310480301.8
申请日:2023-04-28
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: C12Q1/6886 , C12Q1/6862
Abstract: 本发明公开一种基于三重扩增策略的新型液体活检电化学传感器用于骨肉瘤早期诊断及疗效监测,包括如下步骤:(1)根据MiR‑181b基因系列设计特异性的两条单链短探针。(2)以miR‑181b为模板,在T4RNA连接酶‑2的作用下,将两条单链短探针连接形成长嵌合体探针(L‑cmDNA)。(3)在LCR反应体系中,以L‑cmDNA为模板,通过DNA连接酶将两条互补的短系列探针连接形成长双链DNA(L‑dsDNA)并进行大量循环扩增。(3)将L‑dsDNA通过生物素‑链霉亲和素的共价作用结合到亲和素磁珠(MMBs)表面,通过滴加抗FAM的辣根过氧化物酶与L‑dsDNA上的FAM结合。最后将MMBs固定到磁电极,并将电极置于检测底液中,在HRP的催化下,底液中H2O2能氧化TMB产生电化学信号。本方法具有经济、快速、高灵敏度及特异性等优点。
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公开(公告)号:CN112326763A
公开(公告)日:2021-02-05
申请号:CN202011018217.7
申请日:2020-09-24
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: G01N27/48
Abstract: 本发明公开一种可用于临床样品等位基因分型的DNA纳米筛可再生电化学传感器,特点是通过巯基修饰DNA在金电极表面的自组装构建一种能够区分ssDNA和dsDNA的界面型DNA纳米筛,其空腔大小可以通过改变巯基修饰DNA的浓度来调节,通过以[Ru(NH3)6]3+为氧化还原的电化学计时库仑法对界面上巯基DNA的间距进行表征,当巯基修饰DNA的间距小于dsDNA的长度时,dsDNA由于其刚性结构不能透过DNA纳米筛,而无规则卷曲结构的ssDNA由于其高度的柔韧性可以进入纳米筛,通过引入再生探针,构建了重现性性较好的DNA电化学模型。最后,我们以连接循环反应(LCR)为单链DNA扩增策略,构建了基于可再生纳米筛的DNA电化学传感器,实现了单个传感器的多个临床样本的连续检测。
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