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公开(公告)号：CN116559257A
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202310504271.X
申请日：2023-05-07
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: G01N27/327
Abstract: 本发明公开一种可用于摇摆型碱基对等位基因分型的比率型DNA电化学传感器，特点是创新性地利用非特异性扩增策略（连接酶链式反应，LCR），以及与摇摆型碱基对（GT、AC）相比，沃克森碱基对（GC、AT）具有更高扩增效率且在LCR中占主导作用的特性。以等位基因为目标基因，基于沃克森碱基对互补原则，设计了两个LCR（LCRFc→G和LCRMB→A），选用在临床样品中具备稳定检测性能的电活性指示剂二茂铁（Fc）和亚甲基蓝（MB）作为两个LCR的电化学响应信号，并将其电流比值（IMB/IFc）作为等位基因分型的输出信号，最后，依据IMB/IFc区域划分可实现摇摆型碱基对等位基因分型（纯合野生型、纯合突变型、杂合型）的精准测定。
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公开(公告)号：CN112326763A
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN202011018217.7
申请日：2020-09-24
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: G01N27/48
Abstract: 本发明公开一种可用于临床样品等位基因分型的DNA纳米筛可再生电化学传感器，特点是通过巯基修饰DNA在金电极表面的自组装构建一种能够区分ssDNA和dsDNA的界面型DNA纳米筛，其空腔大小可以通过改变巯基修饰DNA的浓度来调节，通过以[Ru(NH3)6]3+为氧化还原的电化学计时库仑法对界面上巯基DNA的间距进行表征，当巯基修饰DNA的间距小于dsDNA的长度时，dsDNA由于其刚性结构不能透过DNA纳米筛，而无规则卷曲结构的ssDNA由于其高度的柔韧性可以进入纳米筛，通过引入再生探针，构建了重现性性较好的DNA电化学模型。最后，我们以连接循环反应(LCR)为单链DNA扩增策略，构建了基于可再生纳米筛的DNA电化学传感器，实现了单个传感器的多个临床样本的连续检测。
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公开(公告)号：CN115109855A
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202210274079.1
申请日：2022-03-20
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , C12Q1/6862
Abstract: 本发明公开一种连接酶结合核酸外切酶“零背景”检测CYP2C19*2基因型的电化学方法。特点是选用生物样品检测中稳定性较强的电活性指示剂亚甲蓝（MB）修饰信号探针，作为电信号来源，结合两种酶促反应特异性扩增、剪切的特性，仅当CYP2C19*2存在时，MB修饰长ssDNA才会被指数扩增出来，随后，此ssDNA通过“倒立型”结构形式被具有筛选ssDNA特性的高密度DNA自组装单分子层捕获杂交，MB靠近金电极表面，发生电子传递，最后，使用方波伏安法（SWV）搜集电信号。在人全血临床样品检测中，本发明可区分CYP2C19*2的三种基因型，且实现了“零背景”空白检测。此外，本发明对如何降低检测背景信号具有较为重要的设计参考价值，同时可为个体化药物基因型检测方法提供新思路、新方向。
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公开(公告)号：CN112326763B
公开(公告)日：2022-10-21
申请号：CN202011018217.7
申请日：2020-09-24
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: G01N27/48
Abstract: 本发明公开一种可用于临床样品等位基因分型的DNA纳米筛可再生电化学传感器，特点是通过巯基修饰DNA在金电极表面的自组装构建一种能够区分ssDNA和dsDNA的界面型DNA纳米筛，其空腔大小可以通过改变巯基修饰DNA的浓度来调节，通过以[Ru(NH3)6]3+为氧化还原的电化学计时库仑法对界面上巯基DNA的间距进行表征，当巯基修饰DNA的间距小于dsDNA的长度时，dsDNA由于其刚性结构不能透过DNA纳米筛，而无规则卷曲结构的ssDNA由于其高度的柔韧性可以进入纳米筛，通过引入再生探针，构建了重现性性较好的DNA电化学模型。最后，我们以连接循环反应(LCR)为单链DNA扩增策略，构建了基于可再生纳米筛的DNA电化学传感器，实现了单个传感器的多个临床样本的连续检测。
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