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公开(公告)号：CN116559257A
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202310504271.X
申请日：2023-05-07
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: G01N27/327
Abstract: 本发明公开一种可用于摇摆型碱基对等位基因分型的比率型DNA电化学传感器，特点是创新性地利用非特异性扩增策略（连接酶链式反应，LCR），以及与摇摆型碱基对（GT、AC）相比，沃克森碱基对（GC、AT）具有更高扩增效率且在LCR中占主导作用的特性。以等位基因为目标基因，基于沃克森碱基对互补原则，设计了两个LCR（LCRFc→G和LCRMB→A），选用在临床样品中具备稳定检测性能的电活性指示剂二茂铁（Fc）和亚甲基蓝（MB）作为两个LCR的电化学响应信号，并将其电流比值（IMB/IFc）作为等位基因分型的输出信号，最后，依据IMB/IFc区域划分可实现摇摆型碱基对等位基因分型（纯合野生型、纯合突变型、杂合型）的精准测定。
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公开(公告)号：CN119876356A
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202510143930.0
申请日：2025-02-10
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: C12Q1/6862 , C12Q1/6858 , C12Q1/6876 , G01N27/26
Abstract: 本发明公开一种基于瓣状核酸内切酶1辅助连接酶链式反应的基因突变检测方法。其特点是利用瓣状核酸内切酶1辅助连接酶链式反应对突变型DNA进行高效扩增，通过电化学终点定量检测法或实时荧光定量法对扩增产物进行分析，从而实现对低丰度突变型DNA的超灵敏定量检测。所提出的瓣状核酸内切酶1（FEN1）辅助连接酶链式反应（LCR）通过借助FEN1对摇摆碱基对的识别能力，有效解决了传统LCR检测“转换突变”时易出现的假阳性问题，对基因突变检测具有更高的通用性。此外该方法仅在靶标存在时通过FEN1的酶切效应产生磷酸化切刻，因此无须预先对探针进行磷酸化修饰，从而有效避免了非特异性扩增问题，较为显著提高了检测灵敏度。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112326763A
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN202011018217.7
申请日：2020-09-24
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: G01N27/48
Abstract: 本发明公开一种可用于临床样品等位基因分型的DNA纳米筛可再生电化学传感器，特点是通过巯基修饰DNA在金电极表面的自组装构建一种能够区分ssDNA和dsDNA的界面型DNA纳米筛，其空腔大小可以通过改变巯基修饰DNA的浓度来调节，通过以[Ru(NH3)6]3+为氧化还原的电化学计时库仑法对界面上巯基DNA的间距进行表征，当巯基修饰DNA的间距小于dsDNA的长度时，dsDNA由于其刚性结构不能透过DNA纳米筛，而无规则卷曲结构的ssDNA由于其高度的柔韧性可以进入纳米筛，通过引入再生探针，构建了重现性性较好的DNA电化学模型。最后，我们以连接循环反应(LCR)为单链DNA扩增策略，构建了基于可再生纳米筛的DNA电化学传感器，实现了单个传感器的多个临床样本的连续检测。
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公开(公告)号：CN115772568A
公开(公告)日：2023-03-10
申请号：CN202211000633.3
申请日：2022-08-19
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: C12Q1/6886 , C12Q1/6862 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种检测慢性粒细胞白血病BCR/ABL融合基因的引物及试剂盒，包括LCR引物CP，SP，T1，T2，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑SEQID NO:4所示，或如SEQ ID NO:5‑SEQ ID NO:8所示。该引物检测限低和单碱基错配区分的能力强。
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公开(公告)号：CN112326763B
公开(公告)日：2022-10-21
申请号：CN202011018217.7
申请日：2020-09-24
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: G01N27/48
Abstract: 本发明公开一种可用于临床样品等位基因分型的DNA纳米筛可再生电化学传感器，特点是通过巯基修饰DNA在金电极表面的自组装构建一种能够区分ssDNA和dsDNA的界面型DNA纳米筛，其空腔大小可以通过改变巯基修饰DNA的浓度来调节，通过以[Ru(NH3)6]3+为氧化还原的电化学计时库仑法对界面上巯基DNA的间距进行表征，当巯基修饰DNA的间距小于dsDNA的长度时，dsDNA由于其刚性结构不能透过DNA纳米筛，而无规则卷曲结构的ssDNA由于其高度的柔韧性可以进入纳米筛，通过引入再生探针，构建了重现性性较好的DNA电化学模型。最后，我们以连接循环反应(LCR)为单链DNA扩增策略，构建了基于可再生纳米筛的DNA电化学传感器，实现了单个传感器的多个临床样本的连续检测。
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公开(公告)号：CN118604098A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410714362.0
申请日：2024-06-04
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
Abstract: 本发明公开一种用于中药材中赭曲霉毒素A检测的电化学适配体传感器的制备方法，本发明通过运用Exo I辅助适配体均相识别，能够避免溶液中游离适配体和非靶标依赖的弱转换事件的干扰；运用简单的置换策略和Poly T尾修饰的捕获探针能够高效捕获被赭曲霉毒素保护的适配体；采用地高辛标记替代传统的生物素标记避免链霉亲和素修饰的磁珠的非特异性结合，能够提高传感器的检测性能，实现中药材复杂基质中赭曲霉毒A的准确灵敏检测，为中药材外源污染物的有效控制提供技术支撑。
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公开(公告)号：CN115109855A
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202210274079.1
申请日：2022-03-20
Applicant: 福建医科大学附属第一医院
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , C12Q1/6862
Abstract: 本发明公开一种连接酶结合核酸外切酶“零背景”检测CYP2C19*2基因型的电化学方法。特点是选用生物样品检测中稳定性较强的电活性指示剂亚甲蓝（MB）修饰信号探针，作为电信号来源，结合两种酶促反应特异性扩增、剪切的特性，仅当CYP2C19*2存在时，MB修饰长ssDNA才会被指数扩增出来，随后，此ssDNA通过“倒立型”结构形式被具有筛选ssDNA特性的高密度DNA自组装单分子层捕获杂交，MB靠近金电极表面，发生电子传递，最后，使用方波伏安法（SWV）搜集电信号。在人全血临床样品检测中，本发明可区分CYP2C19*2的三种基因型，且实现了“零背景”空白检测。此外，本发明对如何降低检测背景信号具有较为重要的设计参考价值，同时可为个体化药物基因型检测方法提供新思路、新方向。
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