公开(公告)号：CN116769909A

公开(公告)日：2023-09-19

申请号：CN202310480301.8

申请日：2023-04-28

Applicant: 福建医科大学附属第一医院

Inventor： 钟光贤 ,  陈锦元 ,  林建华 ,  王蕴清 ,  林煌锋 ,  余露莹

IPC: C12Q1/6886 ,  C12Q1/6862

Abstract: 本发明公开一种基于三重扩增策略的新型液体活检电化学传感器用于骨肉瘤早期诊断及疗效监测，包括如下步骤：（1）根据MiR‑181b基因系列设计特异性的两条单链短探针。（2）以miR‑181b为模板，在T4RNA连接酶‑2的作用下，将两条单链短探针连接形成长嵌合体探针（L‑cmDNA）。（3）在LCR反应体系中，以L‑cmDNA为模板，通过DNA连接酶将两条互补的短系列探针连接形成长双链DNA（L‑dsDNA）并进行大量循环扩增。（3）将L‑dsDNA通过生物素‑链霉亲和素的共价作用结合到亲和素磁珠（MMBs）表面，通过滴加抗FAM的辣根过氧化物酶与L‑dsDNA上的FAM结合。最后将MMBs固定到磁电极，并将电极置于检测底液中，在HRP的催化下，底液中H2O2能氧化TMB产生电化学信号。本方法具有经济、快速、高灵敏度及特异性等优点。