一种超敏感的电化学LCR传感器用于检测关节液中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

    公开(公告)号:CN112708684A

    公开(公告)日:2021-04-27

    申请号:CN202011503796.4

    申请日:2020-12-17

    Abstract: 本发明公开一种超敏感的电化学LCR传感器用于检测关节液中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,包括如下步骤:(1)根据MecA基因的保守系列设计特异性的两条双链短探针(S‑dsDNA)。(2)在LCR反应体系中,以MecA基因为模板,通过DNA连接酶将两条短系列的探针连接形成长的双链DNA(L‑dsDNA)。接着以L‑dsDNA模板,进行循环扩增形成大量L‑dsDNA。(3)将形成的带有巯基及生物素修饰的L‑dsDNA通过金‑硫键固定于BSA修饰的金电极上,通过滴加亲和素‑PolyHRP与L‑dsDNA上的生物素结合,最后将电极置于含TMB和H2O2的底液中,在HRP的催化下,H2O2能氧化TMB产生电化学信号。本方法具有经济、快速、高灵敏度及特异性等优点,可用于单碱基突变系列的检测,并且实现了对关节假体周围感染病人关节液中MRSA的检测。

    一种来源于骨髓间充质干细胞外泌体-阿霉素纳米靶向药物的制备及体外抗骨肉瘤的研究

    公开(公告)号:CN110124058A

    公开(公告)日:2019-08-16

    申请号:CN201910488672.4

    申请日:2019-06-06

    Abstract: 本发明公开一种来源于骨髓间充质干细胞外泌体-阿霉素纳米靶向药物的制备及体外抗骨肉瘤的研究。包括如下步骤:(1)以无血清培养基培养BM-MSC,并用外泌体提取试剂盒提取外泌体。(2)将外泌体与盐酸阿霉素按一定比例混合,加三乙胺脱盐,后将混合液置于透析袋4°C过夜制备外泌体-阿霉素药物。(3)将制备的药物置于酶标仪,于490 nm处测量其吸收峰,计算药物的包载量。(4)将制备的药物用于体外抗骨肉瘤MG63细胞的疗效研究。本方法选择的MSC具有体内毒副作用小、低免疫原性、肿瘤靶向性及可体外大量扩增等优点,结合外泌体在体内广泛分布及具有归巢性的优点,其包载阿霉素后可有效地增强阿霉素对骨肉瘤细胞的杀伤作用。

    一种来源于骨髓间充质干细胞外泌体-阿霉素纳米靶向药物的制备及体外抗骨肉瘤的研究

    公开(公告)号:CN110124058B

    公开(公告)日:2021-11-26

    申请号:CN201910488672.4

    申请日:2019-06-06

    Abstract: 本发明公开一种来源于骨髓间充质干细胞外泌体‑阿霉素纳米靶向药物的制备及体外抗骨肉瘤的研究。包括如下步骤:(1)以无血清培养基培养BM‑MSC,并用外泌体提取试剂盒提取外泌体。(2)将外泌体与盐酸阿霉素按一定比例混合,加三乙胺脱盐,后将混合液置于透析袋4°C过夜制备外泌体‑阿霉素药物。(3)将制备的药物置于酶标仪,于490 nm处测量其吸收峰,计算药物的包载量。(4)将制备的药物用于体外抗骨肉瘤MG63细胞的疗效研究。本方法选择的MSC具有体内毒副作用小、低免疫原性、肿瘤靶向性及可体外大量扩增等优点,结合外泌体在体内广泛分布及具有归巢性的优点,其包载阿霉素后可有效地增强阿霉素对骨肉瘤细胞的杀伤作用。

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