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公开(公告)号：CN110964670A
公开(公告)日：2020-04-07
申请号：CN201911370748.X
申请日：2019-12-26
申请人： 江南大学 , 无锡宸明生物技术有限公司
摘要： 本发明公开了一株产L-赖氨酸的大肠杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。所述大肠杆菌已于2019年6月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2019435，保藏地址为中国武汉，武汉大学。本发明的大肠杆菌(Escherichia coli)FMME-lys，表现出耐受高浓度L-赖氨酸的能力，其耐受能力达260g/L，减少了在发酵过程中因产物对细胞产生毒害的影响，并进一步促进赖氨酸的生成。经发酵罐扩大培养，发酵33h L-赖氨酸产量高达210g/L，葡萄糖得率为75％。
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公开(公告)号：CN110734936A
公开(公告)日：2020-01-31
申请号：CN201911128392.9
申请日：2019-11-18
申请人： 江南大学 , 无锡宸明生物技术有限公司
IPC分类号： C12P7/42
摘要： 本发明公开了一种多酶级联生产(R/S)-羟基蛋氨酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明利用一锅法同步反应催化蛋氨酸生产(R)-HMTBA，通过分批补料解除底物抑制，转化周期由23h缩短至15h，(R)-HMTBA产量可达到97.0g/L，ee>99％，蛋氨酸摩尔转化率达到96.3％；利用一锅法同步反应催化蛋氨酸生产(S)-HMTBA，通过分批补料解除底物抑制，转化周期由23h缩短至18h，(S)-HMTBA产量可达到98.0g/L，ee>99％，蛋氨酸摩尔转化率达到98.6％。
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公开(公告)号：CN110643585B
公开(公告)日：2021-09-03
申请号：CN201911088054.7
申请日：2019-11-08
申请人： 江南大学 , 无锡宸明生物技术有限公司
摘要： 本发明公开了一种利用氨基酸脱氨酶生产α‑酮‑β‑甲基正戊酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明是在氨基酸脱氨酶突变体Pm‑LAAD*的基础上，利用构象动力学的方法进行蛋白质工程改造，获得新的突变体Pm‑LAAD*(V411A/T414A)，其稳定性显著提高，50℃下半衰期从8h增加至10h，4℃冷藏保存的半衰期从150h上升至240h。该酶经过改造后，转化体系中不添加任何缓冲剂，转化通气量仅为0.2vvm，转化体系中添加湿细胞添加量15g/L，转化12h，L‑异亮氨酸摩尔转化率达到95％以上，产量达到98.0g/L，下游纯化简易，极大地降低了生产成本，能够满足工业化需求。
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公开(公告)号：CN110734936B
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN201911128392.9
申请日：2019-11-18
申请人： 江南大学 , 无锡宸明生物技术有限公司
IPC分类号： C12P7/42
摘要： 本发明公开了一种多酶级联生产(R/S)‑羟基蛋氨酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明利用一锅法同步反应催化蛋氨酸生产(R)‑HMTBA，通过分批补料解除底物抑制，转化周期由23h缩短至15h，(R)‑HMTBA产量可达到97.0g/L，ee>99％，蛋氨酸摩尔转化率达到96.3％；利用一锅法同步反应催化蛋氨酸生产(S)‑HMTBA，通过分批补料解除底物抑制，转化周期由23h缩短至18h，(S)‑HMTBA产量可达到98.0g/L，ee>99％，蛋氨酸摩尔转化率达到98.6％。
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公开(公告)号：CN110964670B
公开(公告)日：2022-03-04
申请号：CN201911370748.X
申请日：2019-12-26
申请人： 江南大学 , 无锡宸明生物技术有限公司
摘要： 本发明公开了一株产L‑赖氨酸的大肠杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。所述大肠杆菌已于2019年6月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2019435，保藏地址为中国武汉，武汉大学。本发明的大肠杆菌(Escherichia coli)FMME‑lys，表现出耐受高浓度L‑赖氨酸的能力，其耐受能力达260g/L，减少了在发酵过程中因产物对细胞产生毒害的影响，并进一步促进赖氨酸的生成。经发酵罐扩大培养，发酵33h L‑赖氨酸产量高达210g/L，葡萄糖得率为75％。
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公开(公告)号：CN110643585A
公开(公告)日：2020-01-03
申请号：CN201911088054.7
申请日：2019-11-08
申请人： 江南大学 , 无锡宸明生物技术有限公司
摘要： 本发明公开了一种利用氨基酸脱氨酶生产α-酮-β-甲基正戊酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明是在氨基酸脱氨酶突变体Pm-LAAD*的基础上，利用构象动力学的方法进行蛋白质工程改造，获得新的突变体Pm-LAAD*(V411A/T414A)，其稳定性显著提高，50℃下半衰期从8h增加至10h，4℃冷藏保存的半衰期从150h上升至240h。该酶经过改造后，转化体系中不添加任何缓冲剂，转化通气量仅为0.2vvm，转化体系中添加湿细胞添加量15g/L，转化12h，L-异亮氨酸摩尔转化率达到95％以上，产量达到98.0g/L，下游纯化简易，极大地降低了生产成本，能够满足工业化需求。
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公开(公告)号：CN118853718A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202410837453.3
申请日：2024-06-26
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种用于检测磷酸吡哆醛浓度的可视化生物传感器，属于生物化工技术领域。本发明以PylcH为响应原件，通过优化RBS的方式提高响应灵敏度以及响应范围，将优化后响应灵敏度高的传感器元件构建到pBAD质粒上，得到了在阿拉伯糖诱导下响应磷酸吡哆醛的生物传感器，该传感器可以通过荧光强度反映菌体发酵过程中磷酸吡哆醛浓度，其检测范围广且灵敏度高，在监测胞内辅因子浓度领域具有十分广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN117683759B
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202311752427.2
申请日：2023-12-19
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种3‑脱氢莽草酸脱水酶突变体及产原儿茶酸的重组大肠杆菌，突变体ApAroZR363A的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，通过出发序列的第363位精氨酸突变为丙氨酸得到；本发明还基于该突变体构建了一株重组大肠杆菌，具体地：通过阻断碳流从3‑脱氢莽草酸流向下游莽草酸，敲除了大肠杆菌中3‑脱氢莽草酸脱氢酶基因aroE成功构建了一株高产3‑脱氢莽草酸的底盘菌株，并引入具有抵抗产物抑制的高活性3‑脱氢莽草酸脱水酶突变体ApAroZR363A在底盘菌株中构建原儿茶酸生物合成路径，最终建立了一个高效生物合成原儿茶酸的大肠杆菌重组菌株。
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公开(公告)号：CN117683759A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311752427.2
申请日：2023-12-19
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种3‑脱氢莽草酸脱水酶突变体及产原儿茶酸的重组大肠杆菌，突变体ApAroZR363A的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，通过出发序列的第363位精氨酸突变为丙氨酸得到；本发明还基于该突变体构建了一株重组大肠杆菌，具体地：通过阻断碳流从3‑脱氢莽草酸流向下游莽草酸，敲除了大肠杆菌中3‑脱氢莽草酸脱氢酶基因aroE成功构建了一株高产3‑脱氢莽草酸的底盘菌株，并引入具有抵抗产物抑制的高活性3‑脱氢莽草酸脱水酶突变体ApAroZR363A在底盘菌株中构建原儿茶酸生物合成路径，最终建立了一个高效生物合成原儿茶酸的大肠杆菌重组菌株。
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公开(公告)号：CN114214293B
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202111599580.7
申请日：2021-12-24
申请人： 无锡阿科力科技股份有限公司 , 江南大学
摘要： 本发明公开了一种恶臭假单胞菌细胞色素P450环氧酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明通过对来源于恶臭假单胞菌的细胞色素P450环氧酶进行改造，克服了之前野生型的酶因为过氧化氢逸散和酸醇对质子转化率低而导致的催化效率低的局限，最终得到最佳突变体Q6(PpCytPA250V/T255E/S296V/A297P/P298N)，以此突变体为催化剂，以降冰片烯为底物，转化后10mL规模摇瓶产量为72.05g/L，摩尔产率为61.59％，单位菌体生产环氧降冰片烷的能力为3.6g/g，几乎不产生羟基化副产物。因此大大降低了之前的高菌体量以及繁复的后期分离纯化过程，为环氧降冰片烷的工业化生产和绿色生产奠定了基础。
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