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公开(公告)号:CN118389516A
公开(公告)日:2024-07-26
申请号:CN202410662454.9
申请日:2024-05-27
IPC分类号: C12N15/113 , C12N15/81 , C12N15/55 , C12N1/19 , C12R1/645
摘要: 本发明公开了一种乳酸克鲁维基因组多位点编辑和高效筛选方法,属于基因编辑技术领域。本发明提供了一种基于CRISPR/Cas9的乳酸克鲁维酵母基因编辑系统,具体地,通过对gRNA靶点进行筛选,发现在以TGG为目的基因的PAM序列设计gRNA时,总编辑效率以及同源重组编辑效率均有所提升,并进一步从供体DNA同源臂长度、供体DNA浓度、基因表达框串并联方式等方面进行同源重组编辑效率的优化。将该编辑系统用于基因组的整合表达时大大提升了该物质的表达水平,在乳酸克鲁维酵母相关研究中具有巨大潜力。
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公开(公告)号:CN117603899A
公开(公告)日:2024-02-27
申请号:CN202311762831.8
申请日:2023-12-19
摘要: 本发明提供了蛋白质谷氨酰胺酶在食品级大肠杆菌中的重组表达,属于发酵工程技术领域。本发明以大肠杆菌Nissle1917为初始菌株,构建了异源表达蛋白质谷氨酰胺酶的重组菌株,对RBS和启动子进行优化和筛选,通过融合表达绿色荧光蛋白和目的基因,检测细胞荧光强度,对发酵条件进行筛选,得到最佳酶活化时间、发酵温度与IPTG添加量,在该发酵条件下,发酵12h之后,摇瓶发酵酶活可达13.5U/mL。该重组菌株可以广泛应用于蛋白质谷氨酰胺酶的生产,有利于降低蛋白质谷氨酰胺酶的生产成本,且由于大肠杆菌Nissle1917作为食品级大肠杆菌具有无毒害等优势,该重组菌株也扩大了蛋白质谷氨酰胺酶在食品领域的应用。
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公开(公告)号:CN117535252A
公开(公告)日:2024-02-09
申请号:CN202311476854.2
申请日:2023-11-07
摘要: 本发明公开了一组可降解聚乙烯塑料的祖先漆酶,属于生物技术领域。本发明的可降解PE塑料的祖先漆酶序列可在没有添加介体的条件下,不需要预处理(高温或者UV处理)聚乙烯(PE)塑料,就可以实现对PE的高效降解。本发明的漆酶在PE降解中存在广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN115851801A
公开(公告)日:2023-03-28
申请号:CN202211514262.0
申请日:2022-11-29
摘要: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌基因组编辑方法,属于基因工程领域。本发明以枯草芽孢杆菌作为表达宿主,将单链DNA结合蛋白和DNA退火蛋白整合至枯草芽孢杆菌基因组中,得到重组枯草芽孢杆菌,其中,单链DNA结合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,DNA退火蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过在枯草芽孢杆菌基因组中整合表达单链DNA结合蛋白和DNA退火蛋白,可将枯草芽孢杆菌基因组整合同源臂长度缩短至35bp,为枯草芽孢杆菌内实现高效简易的基因编辑提供了工具。
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公开(公告)号:CN118126968A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202311476574.1
申请日:2023-11-07
摘要: 本发明公开了一组可降解聚乙烯塑料的祖先漆酶,属于生物技术领域。本发明的可降解PE塑料的祖先漆酶序列可在没有添加介体的条件下,不需要预处理(高温或者UV处理)聚乙烯(PE)塑料,就可以实现对PE的高效降解。本发明的漆酶在PE降解中存在广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN117778481A
公开(公告)日:2024-03-29
申请号:CN202311818244.6
申请日:2023-12-27
摘要: 本发明公开了一种全细胞催化生产β‑羟基‑β‑甲基丁酸的方法,属于生物工程技术领域。本发明以大肠杆菌为出发菌株,构建了表达L‑亮氨酸脱氢酶L‑AAD和ɑ‑酮异己酸双加氧酶ɑ‑KICD的基因工程重组大肠杆菌,并对其融合表达方式进行优化,得到的重组菌作为全细胞催化剂,以L‑亮氨酸为底物构建全细胞催化体系用于生产β‑羟基‑β‑甲基丁酸。利用本发明提供的全细胞催化生产β‑羟基‑β‑甲基丁酸具有操作简单、成本低、效率高的特点,具有十分广阔的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN115717152A
公开(公告)日:2023-02-28
申请号:CN202211514538.5
申请日:2022-11-29
摘要: 本发明公开了一种控制枯草芽孢杆菌基因组同源重组概率的方法,属于基因工程领域。本发明以枯草芽孢杆菌为出发菌株,敲除了编码RecA蛋白的基因recA或诱导表达基因recA,通过诱导物质的添加调控微生物的同源重组,使得到的工程菌株产量稳定性大大提高。
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公开(公告)号:CN118291462A
公开(公告)日:2024-07-05
申请号:CN202410360601.7
申请日:2024-03-27
IPC分类号: C12N15/113 , C07K14/77 , C12N15/72 , C12N1/21 , C12R1/19
摘要: 本发明涉及一种产卵清蛋白的重组大肠杆菌及其构建方法与应用,属于基因工程技术领域。本发明以大肠杆菌Nissle 1917为出发菌株,敲除其内源质粒pMUT1,在其内源质粒pMUT2中引入中拷贝复制子p15A、乳糖操纵子和外源卵清蛋白编码基因,使用sigma因子结合位点sigma24串联PP5和Ptac启动子用于增强卵清蛋白的表达,并替换了原启动子的RBS序列,经过上述构建方法得到了一株可在无抗生素条件下生产卵清蛋白的重组大肠杆菌,结合指数补料和DO‑stat正向反馈补料策略,使卵清蛋白产量达到3.7g/L,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN117535254A
公开(公告)日:2024-02-09
申请号:CN202311480854.X
申请日:2023-11-07
摘要: 本发明公开了一组可降解聚乙烯塑料的祖先漆酶,属于生物技术领域。本发明的可降解PE塑料的祖先漆酶序列可在没有添加介体的条件下,不需要预处理(高温或者UV处理)聚乙烯(PE)塑料,就可以实现对PE的高效降解。本发明的漆酶在PE降解中存在广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN116042584A
公开(公告)日:2023-05-02
申请号:CN202310090333.7
申请日:2023-01-17
申请人: 嘉兴未来食品研究院
摘要: 本发明公开了一种通过融合底物结合功能域提升水解能力的角蛋白酶变体,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明采用PCR和Gibson连接技术在角蛋白酶KerZ1的C端通过连接肽成功融合表达来自于里氏木霉的底物结合功能域,得到角蛋白酶变体KerZ1/CBM‑L8。酶活测定结果显示角蛋白酶变体KerZ1/CBM‑L8酶活只有KerZ1的41.5%,但羽毛水解实验结果显示角蛋白酶变体KerZ1/CBM‑L8平均酶活的羽毛水解能力是KerZ1的2.71倍,更具有应用价值与潜力。
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