蛋白质谷氨酰胺酶在食品级大肠杆菌中的重组表达
摘要:
本发明提供了蛋白质谷氨酰胺酶在食品级大肠杆菌中的重组表达,属于发酵工程技术领域。本发明以大肠杆菌Nissle1917为初始菌株,构建了异源表达蛋白质谷氨酰胺酶的重组菌株,对RBS和启动子进行优化和筛选,通过融合表达绿色荧光蛋白和目的基因,检测细胞荧光强度,对发酵条件进行筛选,得到最佳酶活化时间、发酵温度与IPTG添加量,在该发酵条件下,发酵12h之后,摇瓶发酵酶活可达13.5U/mL。该重组菌株可以广泛应用于蛋白质谷氨酰胺酶的生产,有利于降低蛋白质谷氨酰胺酶的生产成本,且由于大肠杆菌Nissle1917作为食品级大肠杆菌具有无毒害等优势,该重组菌株也扩大了蛋白质谷氨酰胺酶在食品领域的应用。
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