公开(公告)号：CN116926098B

公开(公告)日：2024-07-23

申请号：CN202310944052.3

申请日：2023-07-31

申请人： 态创生物科技(广州)有限公司

发明人： 刘丽花 ,  张志乾 ,  吴奕瑞 ,  江翱 ,  吴嵩 ,  许波 ,  邱益 ,  陈西朋 ,  何茜 ,  何景涛 ,  周海银

IPC分类号： C12N15/73 ,  C12N15/70 ,  C12N15/54 ,  C07K14/78 ,  C12N9/12 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种增强T7RNAP对胶原蛋白/弹力蛋白转录活性的定向进化系统，包括：(1)M13‑T7噬菌体，所述M13‑T7噬菌体为gIII基因被T7RNAP的编码基因所替代的噬菌体M13；(2)辅助质粒，所述辅助质粒上包含T7启动子介导的胶原蛋白/弹性蛋白‑内含肽‑pIII融合蛋白的表达基因；(3)含F质粒的进化菌株，所述辅助质粒转化到进化菌株中。还公开了相应的进化方法及筛选到的T7RNAP突变体。本发明公开的菌株定向进化方法，可以获得具有高转录胶原蛋白和弹力蛋白活性的T7RNAP突变体，将T7RNAP突变体整合到宿主菌基因组后，可以获得胶原蛋白和弹性蛋白合成能力增强的菌株。

公开(公告)号：CN116855470B

公开(公告)日：2024-06-11

申请号：CN202311008578.7

申请日：2023-08-11

申请人： 态创生物科技(广州)有限公司

发明人： 张志乾 ,  刘丽花 ,  吴奕瑞 ,  江翱 ,  王海梅 ,  许波 ,  邱益 ,  吴嵩 ,  陈西朋

IPC分类号： C12N9/10 ,  C07K19/00 ,  C12N15/70 ,  C12N15/54 ,  C12N1/21 ,  C12P21/00 ,  C12N11/089 ,  C07K17/08 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种酰基转移酶MsAcT变体，是在野生型酰基转移酶MsAcT的基础上进行S11C、T93A、F150I、F154A、T161S五位点突变。还公开了其融合蛋白、编码基因、表达质粒及宿主菌，以及其固定方法和在催化寡肽乙酰基化或棕榈酰基化中的应用。本发明对野生型酰基转移酶MsAcT改造，获得五位点突变体，并且在突变体的N端插入促溶的Spy‑GST标签，获得的酰基转移酶变体可以生物合成，且酶活明显高于野生型酰基转移酶。本发明还将酰基转移酶变体固定在SpyCather树脂上，获得稳定性更高的固定化酰基转移酶变体，使其更具有工业应用的价值。本发明的固定化酰基转移酶变体可催化寡肽乙酰基化和棕榈酰基化，催化效率高，且不产生有害副产物。

公开(公告)号：CN117843742A

公开(公告)日：2024-04-09

申请号：CN202410011040.X

申请日：2024-01-04

申请人： 态创生物科技(广州)有限公司 ,  广州市乾相生物科技有限公司

发明人： 魏家秀 ,  张志乾 ,  王帆 ,  吴奕瑞 ,  曾倩 ,  区涣彩 ,  曾逸锋 ,  徐志强 ,  黄侨 ,  王嘉鹏 ,  王海梅 ,  江翱 ,  郑小茂 ,  崔华 ,  杨刚柱

IPC分类号： C07K14/39 ,  C12N15/31 ,  C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N15/62 ,  C12P19/56 ,  C12R1/84

摘要： 本发明公开了一种细胞壁蛋白PpSAG1，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，DNA序列如SEQ ID NO.1所示。利用该细胞壁蛋白PpSAG1将UGT76G1在毕赤酵母细胞表面进行表达，可以得到高产莱鲍迪苷A的重组毕赤酵母工程菌株。

公开(公告)号：CN116949081A

公开(公告)日：2023-10-27

申请号：CN202311009910.1

申请日：2023-08-10

申请人： 态创生物科技(广州)有限公司

发明人： 张志乾 ,  谭洪群 ,  刘丽花 ,  吴嵩 ,  江翱 ,  吴奕瑞 ,  邱益 ,  陈西朋 ,  何茜

IPC分类号： C12N15/70 ,  C12N15/65 ,  C12N15/12 ,  C12N15/53 ,  C12N15/57 ,  C07K14/435 ,  C12N9/02 ,  C12N9/50 ,  C12Q1/26 ,  G01N21/64 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了脯氨酸羟化酶传感质粒、脯氨酸羟化酶生物传感器及其应用。该生物传感器中含有组成型表达的的mf‑Lon蛋白酶基因和带有pdt#3标签的荧光蛋白和氨基酸羟化酶基因。该生物传感器可以快速检测菌株中脯氨酸羟化酶活性，具有高效高灵敏和可视化等优势。同时也为高活性脯氨酸羟化酶的筛选提供了有利的技术支持，从而实现包括自动化检测和微流控筛选等新领域的应用。

公开(公告)号：CN116042684B

公开(公告)日：2023-10-27

申请号：CN202310044441.0

申请日：2023-01-30

申请人： 态创生物科技(广州)有限公司 ,  广州市乾相生物科技有限公司

发明人： 张志乾 ,  赖诗静 ,  吴奕瑞 ,  江翱 ,  崔华 ,  郑晓茂 ,  谭洪群 ,  许波 ,  吴嵩

IPC分类号： C12N15/70 ,  C12N15/52 ,  C12N15/61 ,  C12N1/21 ,  C12N1/36 ,  C12N13/00 ,  C12N15/01 ,  C12P19/02 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种用于阿洛酮糖生物合成的大肠杆菌，敲除大肠杆菌的FruA基因，在大肠杆菌的基因组上插入cfa、ibpA和ibpB基因，以及DPEase重组基因，使得DPEase蛋白产物锚定在大肠杆菌细胞表面。还公开了其制备方法、CRISPR质粒A和B以及相应的转座酶体系。本发明敲除了大肠杆菌的FruA基因，降低了果糖的非目的性消耗。并插入cfa、pA和ibpB基因，然后对FruA缺失的大肠杆菌菌株进行了耐高温和耐高果糖的驯化，以提高大肠杆菌宿主在催化环境(55℃)中的稳定性。利用酶锚定技术将阿洛酮糖异构酶锚定在大肠杆菌的表面，使得阿洛酮糖异构酶在大肠杆菌表面生长，并催化外界环境中的果糖转化成阿洛酮糖。

公开(公告)号：CN116904382A

公开(公告)日：2023-10-20

申请号：CN202311008580.4

申请日：2023-08-11

申请人： 态创生物科技(广州)有限公司

发明人： 张志乾 ,  吴奕瑞 ,  刘丽花 ,  陈西朋 ,  江翱 ,  郑晓茂 ,  闫修瑜 ,  崔华 ,  吴嵩

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N9/04 ,  C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12P7/28 ,  C12P17/06 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种联产二羟基丙酮和波色因的宿主细胞，其中所述宿主细胞进行了如下工程改造：引入了编码NADPH依赖性甲基乙二醛还原酶GRE2的基因，以及编码甘油脱氢酶GDH的基因。还公开了联产二羟基丙酮和波色因的方法。本发明的宿主菌共表达甘油脱氢酶、波色因还原酶和辅因子转化酶，并敲除sthA基因，从而实现辅因子NADPH和NAD+的循环利用。以甘油和1‑C‑(β‑D‑吡喃木糖基)‑丙酮为底物，通过控制甘油的量，最终达到同时高产二羟基丙酮和波色因的目的。这种方法合成玻色因和二羟基丙酮具有产量高、效率快、成本低和安全性好等优势，适用于玻色因和二羟基丙酮的工业化生产。

公开(公告)号：CN116731126A

公开(公告)日：2023-09-12

申请号：CN202310044442.5

申请日：2023-01-30

申请人： 态创生物科技(广州)有限公司 ,  广州市乾相生物科技有限公司

发明人： 王海梅 ,  张志乾 ,  江翱 ,  王帆 ,  吴奕瑞 ,  崔华 ,  郭羽 ,  邱益 ,  傅玮 ,  王嘉鹏

IPC分类号： C07K14/00 ,  C07K19/00 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P21/02 ,  C07K1/14 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种内含肽ChiATP，其氨基酸序列如SEQ ID:No.2所示。还公开了内含肽ChiATP‑二肽‑2融合蛋白、表达载体和表达宿主菌。以及二肽‑2的表达方法。本发明提供了一种全新的内含肽ChiATP，可以成功将目标蛋白表达出来。本发明所提供的二肽‑2表达分离系统不限于任意一种小分子活性肽，也可以是一些大分子活性肽，通过对活性物质的表达，利用内含肽ChiATP的自切割特性，可应用于药物生产、化妆品等行业。本发明的有益效果在于：利用内含肽介导的多肽纯化系统来纯化重组蛋白，利用内含肽的自我切割功能，构成一种不需要传统分离方法中所需要的昂贵的树脂和切除标签所需要的特殊酶，此方法操作简便，快速，高效而且试用成本低。

公开(公告)号：CN116041451A

公开(公告)日：2023-05-02

申请号：CN202210976738.6

申请日：2022-08-15

申请人： 广州市乾相生物科技有限公司 ,  态创生物科技(广州)有限公司

发明人： 刘丽花 ,  张志乾 ,  吴奕瑞 ,  江翱 ,  罗元廷 ,  胡玉成 ,  王海梅 ,  王嘉鹏

IPC分类号： C07K14/195 ,  C12N15/31 ,  C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C07K1/34 ,  C07K5/083 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种内含肽变体及其在生物法制备蓝铜胜肽中的应用，所述内含肽变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。通过将其与GHK组成融合蛋白，在导入载体质粒后制备得到高效、稳定的蓝铜胜肽的重组表达载体，通过诱导表达能够获得高纯度的蓝铜胜肽。而且，基于该方法的蓝铜胜肽制备难度低，能够有效降低污染和有毒有害副产物的产生，产出量大，适用于蓝铜胜肽的大规模工业化量产，具有较大的市场价值。

公开(公告)号：CN115792046B

公开(公告)日：2023-04-18

申请号：CN202310097151.2

申请日：2023-02-10

申请人： 广州市乾相生物科技有限公司 ,  态创生物科技(广州)有限公司

发明人： 张志乾 ,  王嘉鹏 ,  王海梅 ,  吴奕瑞 ,  朱家平 ,  傅玮 ,  江翱 ,  王帆 ,  崔华 ,  邱益 ,  郭羽 ,  谭洪群 ,  许波

IPC分类号： G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/30 ,  G01N30/32 ,  G01N30/34 ,  G01N30/74 ,  G01N30/86

摘要： 本发明涉及一种适用于类蛇毒肽和芋螺肽混合物质的HPLC分析方法，其特征在于：第一步：设定液相色谱条件；第二步：配制分析用流动相，其中；流动相A为0.1%甲酸水溶液；流动相B为乙腈；第三步：设定分析程序为等度洗脱，洗脱浓度：流动相A：40~80%，流动相B：20~60%，流速：1mL/min；第四步：配制一个或多个类蛇毒肽和芋螺肽混合物质的待测样品溶液，所述类蛇毒肽和芋螺肽混合物质的待测样品为仅类蛇毒肽和芋螺肽混合物质，或者为含类蛇毒肽和芋螺肽的混合物；等。本发明的HPLC分析方法操作简单，连续测定类蛇毒肽和芋螺肽时，节约大量的时间成本和经济成本，简化了操作的复杂性，同时有着很好的分析效果。

公开(公告)号：CN115960045A

公开(公告)日：2023-04-14

申请号：CN202211667603.8

申请日：2022-12-23

申请人： 态创生物科技(广州)有限公司 ,  广州市乾相生物科技有限公司

发明人： 张志乾 ,  王帆 ,  黄俊远 ,  曾逸锋 ,  吴奕瑞 ,  杨敏

IPC分类号： C07D213/82 ,  C12P17/12 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种生物基烟酰胺脱色脱臭的方法，将待处理的烟酰胺溶于无水乙醇中，然后加入活性炭进行吸附反应，过滤去除溶液中的活性炭与残存杂质，再析晶：加热浓缩，再冷却至室温，析出晶体，过滤收集晶体，即可去除烟酰胺中的杂色和臭味。本发明提供的大肠杆菌合成烟酰胺脱色脱臭的方法，操作简便，成本低廉，物质纯度高，回收率高，适合大规模工业化生物发酵生产烟酰胺的脱色脱臭。