增强T7 RNAP对胶原蛋白/弹力蛋白转录活性的定向进化系统和方法
摘要:
本发明公开了一种增强T7RNAP对胶原蛋白/弹力蛋白转录活性的定向进化系统,包括:(1)M13‑T7噬菌体,所述M13‑T7噬菌体为gIII基因被T7RNAP的编码基因所替代的噬菌体M13;(2)辅助质粒,所述辅助质粒上包含T7启动子介导的胶原蛋白/弹性蛋白‑内含肽‑pIII融合蛋白的表达基因;(3)含F质粒的进化菌株,所述辅助质粒转化到进化菌株中。还公开了相应的进化方法及筛选到的T7RNAP突变体。本发明公开的菌株定向进化方法,可以获得具有高转录胶原蛋白和弹力蛋白活性的T7RNAP突变体,将T7RNAP突变体整合到宿主菌基因组后,可以获得胶原蛋白和弹性蛋白合成能力增强的菌株。
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