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公开(公告)号：CN105462909B
公开(公告)日：2019-09-27
申请号：CN201511030146.1
申请日：2015-12-31
Applicant: 哈药集团技术中心
Inventor： 李国军 , 杨新春 , 张道旭 , 张雪亭 , 吕中华 , 王莹 , 孟庆勇 , 张磊 , 高红梅 , 姜媛媛 , 刘珊珊 , 张译文 , 刘宇庭 , 葛京城 , 黄炎 , 丁辉 , 刘佳吉 , 张新岩 , 袁淑杰 , 李郑武 , 王锐 , 关录凡 , 高晶 , 赵华南 , 袁媛
Abstract: 本发明公开了一种高效表达人促卵泡激素的CHO细胞的培养方法，属于生物制药技术领域。本发明所提供的培养方法是将种子细胞配制成细胞悬液，在利用无血清基础培养基重悬后进行传代培养，获得种子悬液，再将所得的种子悬液接种到生物反应器中进行培养，培养过程中定期流加无血清补充培养基，并监测细胞生长情况并补充葡萄糖溶液，培养结束后收获细胞。本发明所提供的方法全程采用无血清悬浮培养，摇瓶复苏、扩增后转入发酵罐培养，工艺流程简单，并且细胞培养密度大，可达到4×107个/mL，细胞活率达到98％以上，在高密度和高活率下维持时间长，终产物收率可达到40mg/L，适合工业化生产。
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公开(公告)号：CN105462909A
公开(公告)日：2016-04-06
申请号：CN201511030146.1
申请日：2015-12-31
Applicant: 哈药集团技术中心
Abstract: 本发明公开了一种高效表达人促卵泡激素的CHO细胞的培养方法，属于生物制药技术领域。本发明所提供的培养方法是将种子细胞配制成细胞悬液，在利用无血清基础培养基重悬后进行传代培养，获得种子悬液，再将所得的种子悬液接种到生物反应器中进行培养，培养过程中定期流加无血清补充培养基，并监测细胞生长情况并补充葡萄糖溶液，培养结束后收获细胞。本发明所提供的方法全程采用无血清悬浮培养，摇瓶复苏、扩增后转入发酵罐培养，工艺流程简单，并且细胞培养密度大，可达到4×107个/mL，细胞活率达到98％以上，在高密度和高活率下维持时间长，终产物收率可达到40mg/L，适合工业化生产。
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公开(公告)号：CN103103237B
公开(公告)日：2014-11-12
申请号：CN201110351281.1
申请日：2011-11-09
Applicant: 哈药集团技术中心
Abstract: 本发明公开了一种动物细胞大规模、高密度、微载体技术灌注培养细胞生产重组蛋白的方法。其特点是利用摇动式反应器，微载体悬浮于反应器中，并处于不间断的流动状态，采用连续灌注的方式，不断补充营养物质并排出代谢废物，同时收获重组蛋白的方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103102417B
公开(公告)日：2014-11-12
申请号：CN201110351260.X
申请日：2011-11-09
Applicant: 哈药集团技术中心
Abstract: 本发明涉及到一种分离纯化重组人干扰素α2b-CTP融合蛋白的方法，该方法包括将含CHO细胞表达重组人干扰素α2b-CTP的澄清丰收液采用以下层析方法（a）蓝胶染料亲和层析；（b）阳离子层析；（c）阴离子层析进行纯化。蓝胶染料亲和层析能使丰收液无需稀释直接上柱进行纯化，并稳定重组人干扰素α2b-CTP融合蛋白，阳离子层析可以去除非干扰素类杂蛋白，阴离子层析可去除与目的蛋白同源的不同糖基化程度的干扰素类杂蛋白。
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公开(公告)号：CN103102417A
公开(公告)日：2013-05-15
申请号：CN201110351260.X
申请日：2011-11-09
Applicant: 哈药集团技术中心
Abstract: 本发明涉及到一种分离纯化重组人干扰素α2b-CTP融合蛋白的方法，该方法包括将含CHO细胞表达重组人干扰素α2b-CTP的澄清丰收液采用以下层析方法（a）蓝胶染料亲和层析；（b）阳离子层析；（c）阴离子层析进行纯化。蓝胶染料亲和层析能使丰收液无需稀释直接上柱进行纯化，并稳定重组人干扰素α2b-CTP融合蛋白，阳离子层析可以去除非干扰素类杂蛋白，阴离子层析可去除与目的蛋白同源的不同糖基化程度的干扰素类杂蛋白。
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公开(公告)号：CN109628407A
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201910081199.8
申请日：2019-01-28
Applicant: 哈药集团技术中心
CPC classification number: C12N5/0682 , C07K16/2863 , C12M23/14 , C12M25/12 , C12N2510/02
Abstract: 本发明公开了高密度长期培养表达抗VEGF人源化单克隆抗体重组CHO细胞的方法，涉及高密度长期培养CHO细胞生产抗VEGF人源化单克隆抗体的方法。步骤：(一)准备工作；(二)接种细胞；(三)细胞截留换液操作：第一阶段：细胞增殖阶段，该阶段的目的是促进细胞的快速增殖，在达到所需的细胞浓度时进入第二阶段。第二阶段：抗VEGF人源化单克隆抗体表达阶段在该阶段。本发明有效实现在长期高密度培养CHO细胞过程中可以在线进行中空纤维柱的清洗，有效降低堵塞的发生，达到长期培养的目的。
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公开(公告)号：CN103182073A
公开(公告)日：2013-07-03
申请号：CN201110448790.6
申请日：2011-12-29
Applicant: 哈药集团技术中心
Abstract: 本发明提供一种重组人干扰素融合蛋白的药物注射剂，由水、重组人干扰素融合蛋白、缓冲剂、保护剂、表面活性剂组成。它不含人血白蛋白，其配方安全，合理，生产工艺简单，制备成具有长期储存稳定性的注射剂，无病毒污染及白蛋白过敏的潜在危险。
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公开(公告)号：CN103103237A
公开(公告)日：2013-05-15
申请号：CN201110351281.1
申请日：2011-11-09
Applicant: 哈药集团技术中心
Abstract: 本发明公开了一种动物细胞大规模、高密度、微载体技术灌注培养细胞生产重组蛋白的方法。其特点是利用摇动式反应器，微载体悬浮于反应器中，并处于不间断的流动状态，采用连续灌注的方式，不断补充营养物质并排出代谢废物，同时收获重组蛋白的方法。
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