公开(公告)号：CN109628407A

公开(公告)日：2019-04-16

申请号：CN201910081199.8

申请日：2019-01-28

Applicant: 哈药集团技术中心

Inventor： 吕中华 ,  杨新春 ,  张道旭 ,  张雪亭 ,  孟庆勇 ,  姜媛媛 ,  张磊 ,  高红梅 ,  王冰 ,  安小丽 ,  梁秋波 ,  汪霖 ,  张译文 ,  刘姗姗 ,  徐轶尔

IPC: C12N5/10 ,  C07K16/28 ,  C12M3/00 ,  C12M1/00

CPC classification number: C12N5/0682 ,  C07K16/2863 ,  C12M23/14 ,  C12M25/12 ,  C12N2510/02

Abstract: 本发明公开了高密度长期培养表达抗VEGF人源化单克隆抗体重组CHO细胞的方法，涉及高密度长期培养CHO细胞生产抗VEGF人源化单克隆抗体的方法。步骤：(一)准备工作；(二)接种细胞；(三)细胞截留换液操作：第一阶段：细胞增殖阶段，该阶段的目的是促进细胞的快速增殖，在达到所需的细胞浓度时进入第二阶段。第二阶段：抗VEGF人源化单克隆抗体表达阶段在该阶段。本发明有效实现在长期高密度培养CHO细胞过程中可以在线进行中空纤维柱的清洗，有效降低堵塞的发生，达到长期培养的目的。

公开(公告)号：CN105462909B

公开(公告)日：2019-09-27

申请号：CN201511030146.1

申请日：2015-12-31

Applicant: 哈药集团技术中心

Inventor： 李国军 ,  杨新春 ,  张道旭 ,  张雪亭 ,  吕中华 ,  王莹 ,  孟庆勇 ,  张磊 ,  高红梅 ,  姜媛媛 ,  刘珊珊 ,  张译文 ,  刘宇庭 ,  葛京城 ,  黄炎 ,  丁辉 ,  刘佳吉 ,  张新岩 ,  袁淑杰 ,  李郑武 ,  王锐 ,  关录凡 ,  高晶 ,  赵华南 ,  袁媛

IPC: C12N5/02 ,  C12N5/071 ,  C12P21/02 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种高效表达人促卵泡激素的CHO细胞的培养方法，属于生物制药技术领域。本发明所提供的培养方法是将种子细胞配制成细胞悬液，在利用无血清基础培养基重悬后进行传代培养，获得种子悬液，再将所得的种子悬液接种到生物反应器中进行培养，培养过程中定期流加无血清补充培养基，并监测细胞生长情况并补充葡萄糖溶液，培养结束后收获细胞。本发明所提供的方法全程采用无血清悬浮培养，摇瓶复苏、扩增后转入发酵罐培养，工艺流程简单，并且细胞培养密度大，可达到4×107个/mL，细胞活率达到98％以上，在高密度和高活率下维持时间长，终产物收率可达到40mg/L，适合工业化生产。

公开(公告)号：CN105462909A

公开(公告)日：2016-04-06

申请号：CN201511030146.1

申请日：2015-12-31

Applicant: 哈药集团技术中心

Inventor： 袁淑杰 ,  李郑武 ,  李国军 ,  王莹 ,  袁媛 ,  张雪亭 ,  王锐 ,  孟庆勇 ,  张磊 ,  关录凡 ,  姜媛媛 ,  吕中华 ,  高红梅 ,  高晶 ,  赵华南

IPC: C12N5/02 ,  C12N5/071 ,  C12P21/02 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种高效表达人促卵泡激素的CHO细胞的培养方法，属于生物制药技术领域。本发明所提供的培养方法是将种子细胞配制成细胞悬液，在利用无血清基础培养基重悬后进行传代培养，获得种子悬液，再将所得的种子悬液接种到生物反应器中进行培养，培养过程中定期流加无血清补充培养基，并监测细胞生长情况并补充葡萄糖溶液，培养结束后收获细胞。本发明所提供的方法全程采用无血清悬浮培养，摇瓶复苏、扩增后转入发酵罐培养，工艺流程简单，并且细胞培养密度大，可达到4×107个/mL，细胞活率达到98％以上，在高密度和高活率下维持时间长，终产物收率可达到40mg/L，适合工业化生产。