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公开(公告)号：CN119060990A
公开(公告)日：2024-12-03
申请号：CN202411443601.X
申请日：2024-10-16
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种耐高温碱性α‑半乳糖苷酶突变体及其制备方法，所述突变体对来源于嗜维生素无氧芽孢杆菌的α‑半乳糖苷酶进行定点突变，将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第444位、第457位、第509位这三个位点中至少有一个氨基酸进行置换；第444位天冬酰胺Asn突变为苯丙氨酸Phe，第457位天冬氨酸Asp突变为甲硫氨酸Met，第509位精氨酸Arg突变为色氨酸Trp。本发明通过对嗜维生素无氧芽孢杆菌(Anoxybacillus vitaminiphilus WMF1)来源的α‑半乳糖苷酶进行定点突变，获得α‑半乳糖苷酶突变体具有良好的热稳定性和碱稳定性。
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公开(公告)号：CN119752746A
公开(公告)日：2025-04-04
申请号：CN202411734598.7
申请日：2024-11-29
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种高产特定表面活性素的枯草芽孢杆菌及其制备方法与应用，所述枯草芽孢杆菌由基因改造方法获得，能够高产C15组分表面活性素，最高可达72.5%；本发明还提供参与所述枯草芽孢杆菌生产表面活性素的酶突变体，包括羧基转移酶accAD、生物素羧化酶IdeHA、生物素羧化酶accBC和脂肪酸过加氧酶cypC；此外，本发明还提供所述枯草芽孢杆菌的制备方法与应用。本发明提供的高产特定表面活性素的枯草芽孢杆菌及其制备方法，有助于提高表面活性素产量，特别是C15组分表面活性素的工业化生产与商业化应用。
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公开(公告)号：CN119193551A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202411444882.0
申请日：2024-10-16
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种耐高浓度盐的内切β‑1,4‑葡聚糖酶突变体及其制备方法，所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第39位、第137位、第183位这三个位点中至少有一个氨基酸进行置换；第39位天冬氨酸Asp突变为苏氨酸Thr，第137位谷氨酸Glu突变为天冬酰胺Asn，第183位天冬氨酸Asp突变为丝氨酸Ser。通过对野生型内切β‑1,4‑葡聚糖酶进行三维建模确定突变位点，获得的突变体在含有大量盐分的环境下仍然能够保持较好的催化效率和稳定性，优化了内切β‑1,4‑葡聚糖酶在高浓度盐环境中的应用。
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公开(公告)号：CN118910016A
公开(公告)日：2024-11-08
申请号：CN202411305408.X
申请日：2024-09-19
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明以地芽孢杆菌（Geobacillus sp. 70PC53）来源的内切葡聚糖酶作为原始酶，公开了3种pH耐受性提高的内切葡聚糖酶突变体，分别为V217L、A123S/I165V和A123G/I165L/V185S/V217C。本发明提供的内切葡聚糖酶突变体pH耐受性优于原始酶，在pH9.0的条件下，突变体相比原始酶的残留酶活可提高66%；本发明提供的内切葡聚糖酶突变体在pH3.0~11.0内的相对酶活均高于原始酶，能够在该条件下保持稳定高效的催化性能，工业应用前景较好。
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公开(公告)号：CN118910015A
公开(公告)日：2024-11-08
申请号：CN202411305403.7
申请日：2024-09-19
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明以地芽孢杆菌（Geobacillus sp.70PC53）来源的内切葡聚糖酶作为原始酶，公开了3种热稳定性提高的内切葡聚糖酶突变体，分别为V217L、N264Y和R170P/N264Y。本发明提供的内切葡聚糖酶突变体热稳定性优于原始酶，经95℃处理后，突变体相比原始酶的残留酶活可提高217%；本发明提供的内切葡聚糖酶突变体在65℃~95℃内的相对酶活均高于原始酶，能够在更高且更广的温度范围内保持良好的催化性能，工业应用前景较好。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119120428A
公开(公告)日：2024-12-13
申请号：CN202411298447.1
申请日：2024-09-18
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种耐酸性的α‑淀粉酶突变体及其制备方法，对贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)来源的α‑淀粉酶进行定点突变，所述突变为S242E、N569E、N605D中至少一种。本发明提供的α‑淀粉酶突变体具有良好的酸稳定性，在pH 1.9‑4.0时，本发明提供的α‑淀粉酶突变体催化淀粉水解的能力均有明显提升，增加了α‑淀粉酶在更宽的pH条件下的可用性，解决了现有α‑淀粉酶耐酸性较差而造成应用受限的问题。本发明对提高淀粉加工产业中的原料利用率和产品质量、降低生产成本具有显著效果，满足了能源、食品和饲料等领域中对于耐酸性α‑淀粉酶的需求，具有重要的社会和经济效益，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN119020226A
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202411298421.7
申请日：2024-09-18
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种高产特定表面活性素的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）NJUXR‑YS001及其应用，所述枯草芽孢杆菌NJUXR‑YS001的保藏编号为CGMCC No.30289。本发明提供的枯草芽孢杆菌NJUXR‑YS001由诱变筛选得到，遗传稳定且能高产C15组分表面活性素，该菌株的表面活性素总产量达到1.85 g/L，其中C15组分表面活性素的产量1.32 g/L，占比达到71.3%；本发明提供的枯草芽孢杆菌NJUXR‑YS001使用常规的培养条件即可得到较高的C15组分表面活性素产量，适合于工业化生产，具有较高的应用价值和良好的开发前景。
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公开(公告)号：CN119913228A
公开(公告)日：2025-05-02
申请号：CN202510405137.3
申请日：2025-04-02
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明提供了一种高产单一组分鼠李糖脂的方法，属于生物技术领域，能够高产单一组分的性质稳定的鼠李糖脂，从而提高鼠李糖脂的应用效果。该方法对铜绿假单胞菌的野生型鼠李糖基转移酶rhlB或rhlA进行改造，改造后的鼠李糖基转移酶rhlB的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；改造后的鼠李糖基转移酶rhlA的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
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公开(公告)号：CN119662604A
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202411925108.1
申请日：2024-12-25
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了耐高温的β‑甘露聚糖酶突变体及其制备方法，野生型β‑甘露聚糖酶来自灰盖鬼伞菌(Coprinopsis cinerea)，使用定向进化的手段对其进行改造，得到耐高温的β‑甘露聚糖酶突变体，所述突变体的突变包括N381K、R123Y、M439L中的至少一种。本发明所述的β‑甘露聚糖酶突变体在碱性条件、更长加热时间下具有良好热稳定性，在pH 10的缓冲液中，90℃高温处理2 h，突变体的酶活性相比原始酶提高了107.0%，酶突变体催化β‑甘露聚糖酶水解的能力均有明显提升，具备广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN119662507A
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202411924439.3
申请日：2024-12-25
Applicant: 南京大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/90 , C12N15/52 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N9/00 , C12N9/02 , C12N9/10 , C12P21/02 , C12R1/125 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了高产表面活性素的枯草芽孢杆菌、相关酶突变体及其制备方法，所述枯草芽孢杆菌由基因改造方法获得，能够高产表面活性素，最高可达9.4 g/L；本发明还提供所述枯草芽孢杆菌中参与表面活性素合成的关键酶突变体，包括生物素羧化酶IdeHA突变体、生物素羧化酶accBC突变体、烯酰还原酶fabI突变体、丙二酰转移酶fabD突变体和二氢硫辛酰脱氢酶IPdU突变体。本发明公开的高产表面活性素的枯草芽孢杆菌及其制备方法，有助于实现表面活性素的工业化生产与商业化应用。
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