公开(公告)号：CN119060990A

公开(公告)日：2024-12-03

申请号：CN202411443601.X

申请日：2024-10-16

Applicant: 南京大学

Inventor： 任鑫坤 ,  程冰洁 ,  余克洋 ,  屈展 ,  吴怡菲 ,  李志恒 ,  王天奇

IPC: C12N9/40 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种耐高温碱性α‑半乳糖苷酶突变体及其制备方法，所述突变体对来源于嗜维生素无氧芽孢杆菌的α‑半乳糖苷酶进行定点突变，将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第444位、第457位、第509位这三个位点中至少有一个氨基酸进行置换；第444位天冬酰胺Asn突变为苯丙氨酸Phe，第457位天冬氨酸Asp突变为甲硫氨酸Met，第509位精氨酸Arg突变为色氨酸Trp。本发明通过对嗜维生素无氧芽孢杆菌(Anoxybacillus vitaminiphilus WMF1)来源的α‑半乳糖苷酶进行定点突变，获得α‑半乳糖苷酶突变体具有良好的热稳定性和碱稳定性。

公开(公告)号：CN119193551A

公开(公告)日：2024-12-27

申请号：CN202411444882.0

申请日：2024-10-16

Applicant: 南京大学

Inventor： 任鑫坤 ,  吴怡菲 ,  余克洋 ,  程冰洁 ,  屈展 ,  黄锦贤

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种耐高浓度盐的内切β‑1,4‑葡聚糖酶突变体及其制备方法，所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第39位、第137位、第183位这三个位点中至少有一个氨基酸进行置换；第39位天冬氨酸Asp突变为苏氨酸Thr，第137位谷氨酸Glu突变为天冬酰胺Asn，第183位天冬氨酸Asp突变为丝氨酸Ser。通过对野生型内切β‑1,4‑葡聚糖酶进行三维建模确定突变位点，获得的突变体在含有大量盐分的环境下仍然能够保持较好的催化效率和稳定性，优化了内切β‑1,4‑葡聚糖酶在高浓度盐环境中的应用。