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公开(公告)号:CN116479031A
公开(公告)日:2023-07-25
申请号:CN202310255632.1
申请日:2023-03-16
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12N15/81 , C12N15/65 , C12N15/53 , C12N1/19 , A62D3/02 , C12N15/66 , C12R1/85 , A62D101/26 , A62D101/28
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种利用布拉迪酵母表达四环素降解酶Tet(X)的方法与应用。通过LoxP/Cre重组酶系统构建尿嘧啶营养缺陷型酵母菌株S.boulardi/URA3‑/‑为表达宿主,将携带经序列优化后tet(X4)基因的质粒pCEV‑αf‑opt(X4)的Zeocin筛选标记ble改造为Uracil筛选标记URA3,同时构建表达载体中的α因子信号肽,实现外源蛋白Tet(X)的胞外分泌表达。以抗生素作为质粒稳定压力的菌株未表达出目的蛋白,而以Uracil为压力的菌株相比前者表达明显增强。构建后的工程酵母外源基因表达的Tet(X)在NADPH、Mg2+、O2的参与下表现出生物功能,对四代四环素类抗生素均具有高效的降解作用。
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公开(公告)号:CN116334115A
公开(公告)日:2023-06-27
申请号:CN202310255638.9
申请日:2023-03-16
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体公开了一种胞内表达四环素降解酶Tet(X)的基因工程酵母菌及应用。本发明以毕赤酵母GS115为表达宿主菌,以GAP或TEF1为启动子替代pPIC9K‑opt(X4)质粒的甲醇诱导型启动子,并删除质粒的分泌信号肽,构建得到能在胞内自主表达四环素降解酶Tet(X)的基因工程菌。该基因工程酵母裂解产物可在不额外添加辅酶NADPH的前提下能够高效降解不同环境样本中的四环素残留。通过基因工程菌制备的酶制剂具有良好的储存稳定性,同时对环境的pH和温度均具有良好的耐受性。该基因工程酵母生物降解策略具有低成本,高效率,低风险,应用范围广的优点。
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公开(公告)号:CN116479030A
公开(公告)日:2023-07-25
申请号:CN202310255631.7
申请日:2023-03-16
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12N15/81 , C12N15/55 , C12N1/19 , C12N15/64 , C12N9/18 , A61K48/00 , A61K38/46 , A61P39/02 , A23L33/135 , C12R1/85
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种表达红霉素降解酶EreA的布拉迪酵母的构建及应用。本发明首先构建尿嘧啶营养缺陷型菌株S.boulardi/URA3‑/‑,将携带优化的opereA基因插入到含URA3基因的质粒pURA中,提取阳性转化子质粒转至S.boulardi/URA3‑/‑感受态,经过比对染色体和质粒介导的工程酵母表达水平筛选得到高水平表达的工程益生菌酵母。该工程酵母可高效表达红霉素降解酶EreA,具有生物功能,对体内和体外的红霉素均具有高效的降解作用。该工程酵母的使用不会影响红霉素在组织和血浆中的分布,对全身治疗作用无影响,且杜绝了临床重要耐药基因ereA的外泄。
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公开(公告)号:CN115572731A
公开(公告)日:2023-01-06
申请号:CN202210921282.3
申请日:2022-08-02
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种基于Tn558转座子构建的能表达荧光的自杀型质粒、构建方法及应用。该自杀型质粒的构建方法包括:将Tn558和sfGFP进行重叠PCR得到Tn558::sfGFP片段,该片段与用BamHI单酶切后的线性化质粒pZ‑oriTRP4进行重组得到最终的自杀质粒pTn558‑GFP‑oriTRP4。将上述自杀质粒转化至大肠杆菌WM3064感受态细胞,得到大肠杆菌供体菌,可将其与金黄色葡萄球菌受体菌株共培养,构建金黄色葡萄球菌荧光菌株。本发明构建的基于金黄色葡萄球菌染色体radc基因定点荧光标记菌株方法效率较高,可用于构建耐药荧光菌株、药动药效学评价或筛选药物中。
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公开(公告)号:CN118077715A
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202410037389.0
申请日:2024-01-10
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于消毒和杀菌技术领域,公开了一种复合消毒组合物,包括硫酸氢钾和冬青精油,上述两者分别单独使用时,抑菌效果微弱,将其进行联合作用后具有明显的协同抑菌效果。因此,本申请进一步地将上述两者加入溶剂中溶解得到新型过硫酸氢钾增效剂。本发明相较于单独的过硫酸氢钾消毒,能够更高效地杀灭细菌并且减少过硫酸氢钾浓度使用,进一步拓展了过硫酸氢钾在消毒和杀菌产品上的应用。
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公开(公告)号:CN117599025A
公开(公告)日:2024-02-27
申请号:CN202311387212.5
申请日:2023-10-25
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K31/122 , A61P31/04
Abstract: 本发明属于细菌感染及药物治疗技术领域,公开了一种抑制沙门菌毒力的天然化合物甲萘醌及其在制备抑制沙门氏菌药物中的应用。本发明通过沙门氏菌体外游动性实验以及体外细胞(结肠上皮细胞,HT‑29)感染保护实验验证了甲萘醌对沙门氏菌游动功能的显著抑制能力;鼠伤寒沙门氏菌感染大蜡螟模型的治疗实验验证甲萘醌抗沙门氏菌感染的能力。为临床上抗沙门氏菌感染提供新的研发策略和先导化合物。相比传统抗生素直接杀死沙门氏菌的作用机制,甲萘醌通过有效抑制沙门氏菌游动能力,减弱细菌致病力,有效防治细菌感染,且不易诱导沙门氏菌产生相关耐药性。
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公开(公告)号:CN115337296B
公开(公告)日:2024-01-19
申请号:CN202210766494.9
申请日:2022-07-01
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K31/201 , A61K9/107 , A61K47/34 , A61P31/04
Abstract: 本发明属于生物材料技术领域,具体公开了一种抑制耐药质粒水平转移的复合材料及其制备方法和应用。本发明提供了一种抑制耐药质粒水平转移的复合材料,其可以作为耐药质粒接合抑制剂,所述复合材料制备步骤如下:S1.将蓖麻油和异佛尔酮二异氰酸酯搅拌混合,依次加入哌嗪、催化剂搅拌反应,再添加N‑甲基二乙醇胺,反应至溶液难以流动时添加丁酮,反应后冷却,中和;S2.向步骤S1所得反应体系中加入亚油酸,加水乳化,搅拌后提纯得到所述复合材料。所述复合材料具有pH响应特性,能够靶向动物结肠、盲肠给药,可显著抑制耐药质粒在肠道内细菌之间发生接合转移;可作为新型有效质粒抑制剂,为质粒介导的耐药基因水平传播防控提供了新方法。
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公开(公告)号:CN116891902A
公开(公告)日:2023-10-17
申请号:CN202310734536.5
申请日:2023-06-20
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明属于微生物学和分子生物学技术领域,具体涉及粪便中与肠道炎症反应相关菌种的特异性引物组和检测定量方法,本发明能够可靠地评估肠道内与炎症反应相关的菌株的丰度,为个体化的营养干预措施和预防相关疾病提供有力支持。通过这种方法,可以更好地了解肠道微生物群在人体健康和疾病中的作用,为营养学、临床医学和微生物生态学等领域的研究提供重要的工具和数据基础。此外,本发明的方法还具有广泛的应用场景,可用于验证引物在不同动物的粪便样本中的特异性。这些优势使得本发明方法成为研究肠道微生物群及其与营养和健康关系的重要工具,为相关领域的进一步研究提供了新的途径和突破口。
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公开(公告)号:CN115137842B
公开(公告)日:2023-09-29
申请号:CN202210573390.6
申请日:2022-05-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,尤其涉及一种治疗溃疡性结肠炎的可吸附纳米囊泡的二氧化硅微球及其制备方法和应用。在溶胶凝胶法中通过分步添加苯基三乙氧基硅烷和氨丙基三乙氧基硅烷,通过带有机官能基的硅烷偶联剂引入所需官能团,来改变二氧化硅微球表面的电负性,使用该方法制备的二氧化硅微球的粒径均一、分散性较好。本发明通过以负载芳香醛化合物的二氧化硅为载体,吸附纳米囊泡对其保护,更高效的利用囊泡缓解炎症,可应用于治疗溃疡性结肠炎。
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公开(公告)号:CN115109791B
公开(公告)日:2023-09-01
申请号:CN202210710412.9
申请日:2022-06-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,尤其涉及一种基于IncQ型质粒泛宿主的功能基因递送载体、构建方法和应用。本发明以pLHM‑10‑1质粒为模板,在mob区和rep区处设计引物进行PCR扩增,以pUC19质粒为模板,在Amp区设计引物进行PCR扩增,将扩增产物进行电泳纯化回收,两片段进行重组,转化至大肠杆菌E.Coli Dh5α感受态细胞复苏,再将其涂布于含有氨苄西林(ampicillin,AMP)的培养基上,挑取单菌落,进行菌落PCR,测序验证得到所述递送载体。本发明的载体质粒具有体积小,宿主范围广,可搭载的功能基因种类丰富、抗性标记替换较为简便等优势,适用于不同功能基因的泛宿主递送。
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