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公开(公告)号：CN115109791A
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202210710412.9
申请日：2022-06-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，尤其涉及一种基于IncQ型质粒泛宿主的功能基因递送载体、构建方法和应用。本发明以pLHM‑10‑1质粒为模板，在mob区和rep区处设计引物进行PCR扩增，以pUC19质粒为模板，在Amp区设计引物进行PCR扩增，将扩增产物进行电泳纯化回收，两片段进行重组，转化至大肠杆菌E.Coli Dh5α感受态细胞复苏，再将其涂布于含有氨苄西林(ampicillin，AMP)的培养基上，挑取单菌落，进行菌落PCR，测序验证得到所述递送载体。本发明的载体质粒具有体积小，宿主范围广，可搭载的功能基因种类丰富、抗性标记替换较为简便等优势，适用于不同功能基因的泛宿主递送。
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公开(公告)号：CN115337296B
公开(公告)日：2024-01-19
申请号：CN202210766494.9
申请日：2022-07-01
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K31/201 , A61K9/107 , A61K47/34 , A61P31/04
Abstract: 本发明属于生物材料技术领域，具体公开了一种抑制耐药质粒水平转移的复合材料及其制备方法和应用。本发明提供了一种抑制耐药质粒水平转移的复合材料，其可以作为耐药质粒接合抑制剂，所述复合材料制备步骤如下：S1.将蓖麻油和异佛尔酮二异氰酸酯搅拌混合，依次加入哌嗪、催化剂搅拌反应，再添加N‑甲基二乙醇胺，反应至溶液难以流动时添加丁酮，反应后冷却，中和；S2.向步骤S1所得反应体系中加入亚油酸，加水乳化，搅拌后提纯得到所述复合材料。所述复合材料具有pH响应特性，能够靶向动物结肠、盲肠给药，可显著抑制耐药质粒在肠道内细菌之间发生接合转移；可作为新型有效质粒抑制剂，为质粒介导的耐药基因水平传播防控提供了新方法。
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公开(公告)号：CN115109791B
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN202210710412.9
申请日：2022-06-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，尤其涉及一种基于IncQ型质粒泛宿主的功能基因递送载体、构建方法和应用。本发明以pLHM‑10‑1质粒为模板，在mob区和rep区处设计引物进行PCR扩增，以pUC19质粒为模板，在Amp区设计引物进行PCR扩增，将扩增产物进行电泳纯化回收，两片段进行重组，转化至大肠杆菌E.Coli Dh5α感受态细胞复苏，再将其涂布于含有氨苄西林(ampicillin，AMP)的培养基上，挑取单菌落，进行菌落PCR，测序验证得到所述递送载体。本发明的载体质粒具有体积小，宿主范围广，可搭载的功能基因种类丰富、抗性标记替换较为简便等优势，适用于不同功能基因的泛宿主递送。
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公开(公告)号：CN115337296A
公开(公告)日：2022-11-15
申请号：CN202210766494.9
申请日：2022-07-01
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K31/201 , A61K9/107 , A61K47/34 , A61P31/04
Abstract: 本发明属于生物材料技术领域，具体公开了一种抑制耐药质粒水平转移的复合材料及其制备方法和应用。本发明提供了一种抑制耐药质粒水平转移的复合材料，其可以作为耐药质粒接合抑制剂，所述复合材料制备步骤如下：S1.将蓖麻油和异佛尔酮二异氰酸酯搅拌混合，依次加入哌嗪、催化剂搅拌反应，再添加N‑甲基二乙醇胺，反应至溶液难以流动时添加丁酮，反应后冷却，中和；S2.向步骤S1所得反应体系中加入亚油酸，加水乳化，搅拌后提纯得到所述复合材料。所述复合材料具有pH响应特性，能够靶向动物结肠、盲肠给药，可显著抑制耐药质粒在肠道内细菌之间发生接合转移；可作为新型有效质粒抑制剂，为质粒介导的耐药基因水平传播防控提供了新方法。
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