公开(公告)号：CN115109791B

公开(公告)日：2023-09-01

申请号：CN202210710412.9

申请日：2022-06-22

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 孙坚 ,  周士迎 ,  龙腾飞 ,  李龚 ,  何玉张 ,  万磊 ,  黄紫蕾 ,  刘雅红 ,  廖晓萍

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/74 ,  C12N15/65 ,  C12N15/12 ,  C12N15/55

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，尤其涉及一种基于IncQ型质粒泛宿主的功能基因递送载体、构建方法和应用。本发明以pLHM‑10‑1质粒为模板，在mob区和rep区处设计引物进行PCR扩增，以pUC19质粒为模板，在Amp区设计引物进行PCR扩增，将扩增产物进行电泳纯化回收，两片段进行重组，转化至大肠杆菌E.Coli Dh5α感受态细胞复苏，再将其涂布于含有氨苄西林(ampicillin，AMP)的培养基上，挑取单菌落，进行菌落PCR，测序验证得到所述递送载体。本发明的载体质粒具有体积小，宿主范围广，可搭载的功能基因种类丰富、抗性标记替换较为简便等优势，适用于不同功能基因的泛宿主递送。

公开(公告)号：CN115109791A

公开(公告)日：2022-09-27

申请号：CN202210710412.9

申请日：2022-06-22

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 孙坚 ,  周士迎 ,  龙腾飞 ,  李龚 ,  何玉张 ,  万磊 ,  黄紫蕾 ,  刘雅红 ,  廖晓萍

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/74 ,  C12N15/65 ,  C12N15/12 ,  C12N15/55

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，尤其涉及一种基于IncQ型质粒泛宿主的功能基因递送载体、构建方法和应用。本发明以pLHM‑10‑1质粒为模板，在mob区和rep区处设计引物进行PCR扩增，以pUC19质粒为模板，在Amp区设计引物进行PCR扩增，将扩增产物进行电泳纯化回收，两片段进行重组，转化至大肠杆菌E.Coli Dh5α感受态细胞复苏，再将其涂布于含有氨苄西林(ampicillin，AMP)的培养基上，挑取单菌落，进行菌落PCR，测序验证得到所述递送载体。本发明的载体质粒具有体积小，宿主范围广，可搭载的功能基因种类丰富、抗性标记替换较为简便等优势，适用于不同功能基因的泛宿主递送。