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公开(公告)号：CN116479030A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310255631.7
申请日：2023-03-16
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12N15/81 , C12N15/55 , C12N1/19 , C12N15/64 , C12N9/18 , A61K48/00 , A61K38/46 , A61P39/02 , A23L33/135 , C12R1/85
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体公开了一种表达红霉素降解酶EreA的布拉迪酵母的构建及应用。本发明首先构建尿嘧啶营养缺陷型菌株S.boulardi/URA3‑/‑，将携带优化的opereA基因插入到含URA3基因的质粒pURA中，提取阳性转化子质粒转至S.boulardi/URA3‑/‑感受态，经过比对染色体和质粒介导的工程酵母表达水平筛选得到高水平表达的工程益生菌酵母。该工程酵母可高效表达红霉素降解酶EreA，具有生物功能，对体内和体外的红霉素均具有高效的降解作用。该工程酵母的使用不会影响红霉素在组织和血浆中的分布，对全身治疗作用无影响，且杜绝了临床重要耐药基因ereA的外泄。
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公开(公告)号：CN116479031A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310255632.1
申请日：2023-03-16
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12N15/81 , C12N15/65 , C12N15/53 , C12N1/19 , A62D3/02 , C12N15/66 , C12R1/85 , A62D101/26 , A62D101/28
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体公开了一种利用布拉迪酵母表达四环素降解酶Tet(X)的方法与应用。通过LoxP/Cre重组酶系统构建尿嘧啶营养缺陷型酵母菌株S.boulardi/URA3‑/‑为表达宿主，将携带经序列优化后tet(X4)基因的质粒pCEV‑αf‑opt(X4)的Zeocin筛选标记ble改造为Uracil筛选标记URA3，同时构建表达载体中的α因子信号肽，实现外源蛋白Tet(X)的胞外分泌表达。以抗生素作为质粒稳定压力的菌株未表达出目的蛋白，而以Uracil为压力的菌株相比前者表达明显增强。构建后的工程酵母外源基因表达的Tet(X)在NADPH、Mg2+、O2的参与下表现出生物功能，对四代四环素类抗生素均具有高效的降解作用。
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公开(公告)号：CN116334115A
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202310255638.9
申请日：2023-03-16
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体公开了一种胞内表达四环素降解酶Tet(X)的基因工程酵母菌及应用。本发明以毕赤酵母GS115为表达宿主菌，以GAP或TEF1为启动子替代pPIC9K‑opt(X4)质粒的甲醇诱导型启动子，并删除质粒的分泌信号肽，构建得到能在胞内自主表达四环素降解酶Tet(X)的基因工程菌。该基因工程酵母裂解产物可在不额外添加辅酶NADPH的前提下能够高效降解不同环境样本中的四环素残留。通过基因工程菌制备的酶制剂具有良好的储存稳定性，同时对环境的pH和温度均具有良好的耐受性。该基因工程酵母生物降解策略具有低成本，高效率，低风险，应用范围广的优点。
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公开(公告)号：CN119020386A
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202411238972.4
申请日：2024-09-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/70 , C07K14/255 , C07K1/34 , C07K1/14 , C12N15/31 , G01N33/569 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了沙门膜孔蛋白OmpC及其应用，本OmpC蛋白通过原核表达系统大肠杆菌BL21(DE3)进行表达，由于用原核系统表达出的OmpC蛋白属于包涵体蛋白，所以我们根据包涵体蛋白的特性进行了多次纯化条件的摸索以及透析复性条件的摸索；最后将获得的蛋白作为Elisa检测板的包被抗原。本发明中蛋白的制备方法简单，成本低，容易大批量制备，可应用于ELISA检测方法中，应用前景好。
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公开(公告)号：CN115536158A
公开(公告)日：2022-12-30
申请号：CN202211150403.5
申请日：2022-09-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: C02F3/34 , C02F101/38
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种复合酶及降解四环素的应用；本发明中通过Cu基MOF固定TET(X4)的方式构建TM降解体系，MOF的多孔结构和比表面积可以有效保护酶的稳定性和可用性，进而提高酶的活性。同时，在TC存在下通过级联催化反应快速生成·OH和·O2‑降解TC，具有明显的协同降解效果，并且远大于一次性使用TET(X4)和MOF。本发明操作简单，效率高，不需要高温高压、电、光辐射、声等反应条件，室温下即可发挥降解效果，反应要求较低。本发明应用范围广，实用性强，在强污染环境介质(制药废水)中能充分发挥作用，具有良好的降解效果。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110042111A
公开(公告)日：2019-07-23
申请号：CN201910290890.7
申请日：2019-04-12
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物治理技术领域，具体涉及一种能够降解四环素类抗生素的基因及其编码得到的蛋白和应用。所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。所述基因来源于大肠杆菌LHM10-1菌株，大肠杆菌LHM10-1菌株于2019年3月28日保藏于广东省微生物菌种保藏中心（GDMCC），保藏编号为GDMCC No：60622。利用本发明提供的基因及其编码得到的蛋白，能够有效降解四环素族抗生素药物（以四环素的降解为例），利用所述基因，以此成功构建了其大肠杆菌克隆表达菌株。进一步地，应用于四环素族抗生素药物的降解，并且能够在24小时降解93.70%的四环素，效果显著，应用前景好。
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公开(公告)号：CN117887745A
公开(公告)日：2024-04-16
申请号：CN202311571556.1
申请日：2023-11-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/70 , C07K14/255 , G01N33/531 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了了一种沙门菌鞭毛蛋白FimH的制备及其在Elisa检测中的应用，本FimH蛋白是沙门菌的鞭毛，通过原核表达系统大肠杆菌BL21(DE3)进行表达，接着按照不可溶蛋白的处理方法进行亲和层析纯化，变性，再复性；并对所制备的蛋白用Bradford试剂盒进行浓度的测定。最后将获得的蛋白作为Elisa检测板的包被抗原。本发明中蛋白的制备方法简单，成本低，容易大批量制备，可应用于ELISA检测方法中，应用前景好。
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公开(公告)号：CN117683799A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311571584.3
申请日：2023-11-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/70 , C07K14/255 , G01N33/531 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种沙门膜孔蛋白OmpC的制备方法及其在检测中的应用，本OmpC蛋白通过原核表达系统大肠杆菌BL21(DE3)进行表达，接着按照不可溶蛋白的处理方法进行亲和层析纯化，变性，再复性；并对所制备的蛋白用Bradford试剂盒进行浓度的测定。最后将获得的蛋白作为Elisa检测板的包被抗原。本发明中蛋白的制备方法简单，成本低，容易大批量制备，可应用于ELISA检测方法中，应用前景好。
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公开(公告)号：CN110042111B
公开(公告)日：2020-10-20
申请号：CN201910290890.7
申请日：2019-04-12
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物治理技术领域，具体涉及一种能够降解四环素类抗生素的基因及其编码得到的蛋白和应用。所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。所述基因来源于大肠杆菌LHM10‑1菌株，大肠杆菌LHM10‑1菌株于2019年3月28日保藏于广东省微生物菌种保藏中心（GDMCC），保藏编号为GDMCC No：60622。利用本发明提供的基因及其编码得到的蛋白，能够有效降解四环素族抗生素药物（以四环素的降解为例），利用所述基因，以此成功构建了其大肠杆菌克隆表达菌株。进一步地，应用于四环素族抗生素药物的降解，并且能够在24小时降解93.70%的四环素，效果显著，应用前景好。
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公开(公告)号：CN118086354A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410048748.2
申请日：2024-01-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/81 , A61K38/47 , A61P1/00 , A61P31/04 , C12N15/65 , C12N15/63 , C12N9/36 , C07K19/00 , A23K20/189 , C12R1/865
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种表达人溶菌酶的布拉迪酵母系统及其构建方法与应用，本发明首次通过将融合了鸡溶菌酶信号肽的hLYZ基因转入益生菌S.bΔCUP1ΔURA3中，构建得到工程酵母S.bΔCUP1ΔURA3/pCUP1‑cf‑hLYZ，该工程酵母可分泌表达具有抑菌活性的hLYZ。通过小鼠灌胃试验可见，该工程酵母能在小鼠肠道原位环境中通过Cu2+诱导表达hLYZ，且在肠道中展现出一定的功能活性。
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