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公开(公告)号:CN116479031A
公开(公告)日:2023-07-25
申请号:CN202310255632.1
申请日:2023-03-16
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12N15/81 , C12N15/65 , C12N15/53 , C12N1/19 , A62D3/02 , C12N15/66 , C12R1/85 , A62D101/26 , A62D101/28
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种利用布拉迪酵母表达四环素降解酶Tet(X)的方法与应用。通过LoxP/Cre重组酶系统构建尿嘧啶营养缺陷型酵母菌株S.boulardi/URA3‑/‑为表达宿主,将携带经序列优化后tet(X4)基因的质粒pCEV‑αf‑opt(X4)的Zeocin筛选标记ble改造为Uracil筛选标记URA3,同时构建表达载体中的α因子信号肽,实现外源蛋白Tet(X)的胞外分泌表达。以抗生素作为质粒稳定压力的菌株未表达出目的蛋白,而以Uracil为压力的菌株相比前者表达明显增强。构建后的工程酵母外源基因表达的Tet(X)在NADPH、Mg2+、O2的参与下表现出生物功能,对四代四环素类抗生素均具有高效的降解作用。
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公开(公告)号:CN116334115A
公开(公告)日:2023-06-27
申请号:CN202310255638.9
申请日:2023-03-16
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体公开了一种胞内表达四环素降解酶Tet(X)的基因工程酵母菌及应用。本发明以毕赤酵母GS115为表达宿主菌,以GAP或TEF1为启动子替代pPIC9K‑opt(X4)质粒的甲醇诱导型启动子,并删除质粒的分泌信号肽,构建得到能在胞内自主表达四环素降解酶Tet(X)的基因工程菌。该基因工程酵母裂解产物可在不额外添加辅酶NADPH的前提下能够高效降解不同环境样本中的四环素残留。通过基因工程菌制备的酶制剂具有良好的储存稳定性,同时对环境的pH和温度均具有良好的耐受性。该基因工程酵母生物降解策略具有低成本,高效率,低风险,应用范围广的优点。
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公开(公告)号:CN116479030A
公开(公告)日:2023-07-25
申请号:CN202310255631.7
申请日:2023-03-16
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12N15/81 , C12N15/55 , C12N1/19 , C12N15/64 , C12N9/18 , A61K48/00 , A61K38/46 , A61P39/02 , A23L33/135 , C12R1/85
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种表达红霉素降解酶EreA的布拉迪酵母的构建及应用。本发明首先构建尿嘧啶营养缺陷型菌株S.boulardi/URA3‑/‑,将携带优化的opereA基因插入到含URA3基因的质粒pURA中,提取阳性转化子质粒转至S.boulardi/URA3‑/‑感受态,经过比对染色体和质粒介导的工程酵母表达水平筛选得到高水平表达的工程益生菌酵母。该工程酵母可高效表达红霉素降解酶EreA,具有生物功能,对体内和体外的红霉素均具有高效的降解作用。该工程酵母的使用不会影响红霉素在组织和血浆中的分布,对全身治疗作用无影响,且杜绝了临床重要耐药基因ereA的外泄。
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公开(公告)号:CN115572731A
公开(公告)日:2023-01-06
申请号:CN202210921282.3
申请日:2022-08-02
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种基于Tn558转座子构建的能表达荧光的自杀型质粒、构建方法及应用。该自杀型质粒的构建方法包括:将Tn558和sfGFP进行重叠PCR得到Tn558::sfGFP片段,该片段与用BamHI单酶切后的线性化质粒pZ‑oriTRP4进行重组得到最终的自杀质粒pTn558‑GFP‑oriTRP4。将上述自杀质粒转化至大肠杆菌WM3064感受态细胞,得到大肠杆菌供体菌,可将其与金黄色葡萄球菌受体菌株共培养,构建金黄色葡萄球菌荧光菌株。本发明构建的基于金黄色葡萄球菌染色体radc基因定点荧光标记菌株方法效率较高,可用于构建耐药荧光菌株、药动药效学评价或筛选药物中。
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公开(公告)号:CN118743708A
公开(公告)日:2024-10-08
申请号:CN202410719030.1
申请日:2024-06-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K31/7024 , A61K31/047 , A61K9/14 , A61P1/00 , A61P29/00
Abstract: 本发明属于生物医药、兽药技术领域,公开了一种具有pH响应性的无载体纳米药物组合物,有效活性成分包括单宁酸和叶黄素。其中,单宁酸和叶黄素的摩尔比为1~20:20~1。本发明将单宁酸与叶黄素通过自组装技术,制备了二元无载体纳米颗粒,氢键的产生使其获得pH响应性,能在酸性条件下保持稳定,碱性条件下缓慢释放,即能绕过胃酸环境保持稳定。本发明提供的具有pH响应的无载体纳米颗粒具有良好的安全性以及抗氧化、抗炎活性,降低药量的同时能明显改善DSS诱导的小鼠结肠炎症状;本发明为开发无载体药物递送体系和炎症性肠病的临床治疗提供技术支持,在临床上具有巨大的发展前景。
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公开(公告)号:CN118086354A
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202410048748.2
申请日:2024-01-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/81 , A61K38/47 , A61P1/00 , A61P31/04 , C12N15/65 , C12N15/63 , C12N9/36 , C07K19/00 , A23K20/189 , C12R1/865
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种表达人溶菌酶的布拉迪酵母系统及其构建方法与应用,本发明首次通过将融合了鸡溶菌酶信号肽的hLYZ基因转入益生菌S.bΔCUP1ΔURA3中,构建得到工程酵母S.bΔCUP1ΔURA3/pCUP1‑cf‑hLYZ,该工程酵母可分泌表达具有抑菌活性的hLYZ。通过小鼠灌胃试验可见,该工程酵母能在小鼠肠道原位环境中通过Cu2+诱导表达hLYZ,且在肠道中展现出一定的功能活性。
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公开(公告)号:CN117947078A
公开(公告)日:2024-04-30
申请号:CN202410048747.8
申请日:2024-01-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/81 , C12N15/63 , C12N1/19 , C12N15/65 , C07K14/08 , C07K19/00 , A61K39/12 , A61P31/14 , A61P37/04 , C12R1/865
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种肠道原位诱导表达PCV2Cap蛋白的布拉迪酵母系统及其构建方法与应用,本发明首次通过将融合了α因子信号肽的PCV2Cap基因序列转入益生菌S.bΔCUP1ΔURA3中,构建得到工程S.bΔCUP1ΔURA3/pCUP1‑αf‑PCV2Cap,该工程酵母可分泌表达PCV2Cap蛋白。通过小鼠灌胃试验可见,该工程酵母能在小鼠肠道原位环境中通过Cu2+诱导表达PCV2Cap蛋白,且具有一定的免疫原性,能分别诱导产生Th1型和Th2型免疫应答。
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公开(公告)号:CN115350197A
公开(公告)日:2022-11-18
申请号:CN202210782586.6
申请日:2022-07-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K31/575 , A61K31/431 , A61K31/546 , A61P31/04 , C07J13/00
Abstract: 本发明涉及泽泻醇A‑24‑醋酸酯的新用途,具体涉及泽泻醇A‑24‑醋酸酯在提高MRSA对β‑内酰胺类抗生素敏感性方面的应用。本发明提供了泽泻醇A‑24‑醋酸酯在制备提高MRSA对β‑内酰胺类抗生素敏感性方面的增效剂的应用。研究发现泽泻醇A‑24‑醋酸酯与β‑内酰胺类药物(苯唑西林、头孢西丁)在体内和体外均具有很好的协同效果,泽泻醇A‑24‑醋酸酯或β‑内酰胺类抗生素单独作用对MRSA菌株的杀菌效果微乎其微,但两者联用杀菌效果显著提高。泽泻醇A‑24‑醋酸酯与现有抗菌药配伍从而提高其抗菌效果,使其恢复对多重耐药病原菌的敏感性,对临床实现抗生素替代和解决细菌耐药性具有重要意义。
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公开(公告)号:CN113907094B
公开(公告)日:2022-10-28
申请号:CN202111154376.4
申请日:2021-09-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于紫外杀菌技术领域,公开了一种紫外杀菌增效剂及其联合紫外进行杀菌的方法。本研究基于A波段紫外线(UVA)和法国丝柏精油杀菌效果微弱(单独作用时杀菌量在0.5log‑1.5log),将其进行联合作用后具有明显的协同杀菌效果。本发明相较于传统的紫外杀菌技术,能够更高效地杀灭细菌并且减少紫外灯质量对于消毒效果的影响。
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公开(公告)号:CN113994983A
公开(公告)日:2022-02-01
申请号:CN202111154366.0
申请日:2021-09-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于紫外杀菌技术领域,公开了一种紫外杀菌增效剂及其联合紫外进行杀菌的方法。本研究基于A波段紫外线(UVA)和葡萄柚精油杀菌效果微弱(单独作用时杀菌量在0.5log‑1.5log),将其进行联合作用后具有明显的协同杀菌效果。本发明相较于传统的紫外杀菌技术,能够更高效地杀灭细菌并且减少紫外灯质量对于消毒效果的影响。
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