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公开(公告)号：CN104151433A
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201410390880.8
申请日：2014-08-11
Applicant: 兰州大学
Abstract: 本发明提供一种结核分枝杆菌融合蛋白，是序列表中序列2和序列4中的蛋白质。并提供了其制备方法和应用。本发明将融合蛋白LT70与佐剂DDA+PolyI:C进行联合构建结核亚单位疫苗，实验结果显示该疫苗可以在小鼠体内有效诱导结核抗原特异性的细胞和体液免疫应答，并且在小鼠毒力株攻击保护效率试验中具有较强的免疫保护力，保护时间较为持久，保护效果强于BCG，亦具有强化BCG免疫的作用，是一有效的结核病候选疫苗。
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公开(公告)号：CN102453096A
公开(公告)日：2012-05-16
申请号：CN201010528541.3
申请日：2010-11-02
Applicant: 兰州大学
Abstract: 本发明涉及一种无标签结核融合蛋白ESAT6-Ag85B，利用基因工程技术，将结核分枝杆菌的基因ESAT6和Ag85B进行重组融合，构建重组质粒，进行诱导表达，获得重组基因的表达物，最后将重组基因表达物进行纯化，克隆构建了不带有任何标签的结核分枝杆菌融合蛋白ESAT6-Ag85B。本发明的优点在于：解决了融合蛋白所带有的标签会影响到动物实验以及更进一步的临床学试验的后续问题，并且通过利用不同的色谱分析方法使融合蛋白得到了有效的纯化，有望成为结核病预防的候选疫苗。
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公开(公告)号：CN102180974A
公开(公告)日：2011-09-14
申请号：CN201110068820.0
申请日：2011-03-22
Applicant: 兰州大学
CPC classification number: A61K39/04 , C07K14/35 , C07K2319/00
Abstract: 本发明公开了一种结核杆菌融合蛋白，是序列表中序列2的蛋白质，并提供了其制备方法和制备疫苗的应用。本发明所提供的构建并表达纯化去标签融合蛋白ESAT6-Ag85B-Mpt64190-198-Mtb8.4(EAMM)，目的是建立针对结核杆菌的免疫应答，以提高疫苗保护效果。本发明所构造的融合蛋白EAMM和佐剂混合作为结核亚单位疫苗，诱导Th1型细胞免疫为主的免疫反应和体液免疫反应，具有较强的免疫原性并且有很好的抗结核保护效果。
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公开(公告)号：CN115920021B
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202211334750.3
申请日：2022-10-28
Applicant: 兰州大学
IPC: A61K39/04 , A61K39/39 , A61P31/06 , C07K19/00 , C07K1/36 , C07K1/30 , C07K1/18 , C07K1/16 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供一种结核亚单位疫苗，所述结核亚单位疫苗包括融合蛋白LT33、融合蛋白LT28和佐剂；所述融合蛋白LT33由ESAT6、CFP10、Rv1738依次连接制备而成；所述融合蛋白LT28由MPT6461‑170、Rv19788‑60和Rv264521‑80依次连接制备而成。本发明还提供其制备方法。采用本发明的结核亚单位疫苗，可以在小鼠体内有效诱导结核抗原特异性的细胞和体液免疫应答反应，同时，该疫苗可以介导小鼠针对结核分枝杆菌H37Rv感染的保护。该疫苗有望成为一种新型的结核亚单位疫苗。具有较好的应用开发前景。
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公开(公告)号：CN104098700A
公开(公告)日：2014-10-15
申请号：CN201410187154.6
申请日：2014-05-05
Applicant: 兰州大学
IPC: C07K19/00 , C07K1/36 , C07K1/30 , C07K1/20 , C07K1/18 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K39/04 , A61P31/06 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了结核分枝杆菌融合蛋白EAMMH，同时还提供了其构建、表达和纯化方法及其应用。该融合蛋白以可溶形式表达，明显改善了EAMM以包涵体进行表达的缺点。该融合蛋白与佐剂联合构建的结核亚单位疫苗（LT69）具有较强的免疫保护力，优于传统的BCG疫苗及EAMM＋MH联合疫苗；该疫苗作为加强型疫苗可以明显增强BCG初始免疫的免疫力及抗结核的保护效果，并且一定程度上减轻肺脏的病理损伤；此外，该亚单位疫苗包含了结核分枝杆菌生长期和潜伏期的多种抗原，可诱导较强的针对各期结核菌抗原的特异性细胞免疫和体液免疫应答，对不同代谢状态的结核菌均据有防护作用，且保护时间长，有望成为临床结核病预防的有效疫苗。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102174113A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201110028082.7
申请日：2011-01-26
Applicant: 兰州大学
Abstract: 本发明涉及一种无标签结核融合蛋白TB10-TB8，利用基因工程技术，将结核分枝杆菌的基因TB10.4和TB8.4进行重组融合，构建重组质粒pET30a-TB10.4-TB8.4，进行诱导表达，获得重组基因的表达物，最后将重组基因表达物进行纯化，克隆构建了不带有任何标签的结核分枝杆菌融合蛋白TB10.4-TB8.4。本发明的优点在于：解决了融合蛋白所带有的标签会影响到动物实验以及更进一步的临床学试验的后续问题，并且通过利用不同的色谱分析方法使融合蛋白得到了有效的纯化，有望成为结核病预防的候选疫苗。
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公开(公告)号：CN102154324A
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN201010613320.6
申请日：2010-12-29
Applicant: 兰州大学
CPC classification number: C07K14/34 , A61K39/04 , C07K2319/00 , C07K2319/40 , Y02A50/478
Abstract: 本发明公开了结核分枝杆菌融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3的构建、表达和纯化方法及其应用，将Mtb10.4和Hsp16.3基因进行PCR扩增并依次插入到克隆载体的多克隆位点中,构建重组载体；然后在大肠杆菌中表达；最后进行纯化得到融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3，该融合蛋白可在结核亚单位疫苗中应用。本发明的优点在于：该融合蛋白疫苗可诱导动物较强的细胞和体液免疫反应；通过动物攻毒实验表明，该疫苗在BCG免疫基础上，具有加强免疫作用，可提高和延长BCG的保护效果；且该疫苗无明显毒副作用。
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公开(公告)号：CN102190733A
公开(公告)日：2011-09-21
申请号：CN201110068819.8
申请日：2011-03-22
Applicant: 兰州大学
Abstract: 本发明公开了一种无标签结核杆菌融合蛋白ESAT6-RpfE，是序列表中序列2的蛋白质，并提供了其制备方法和制备疫苗的应用。本发明选用的结核分枝杆菌早期分泌蛋白ESAT6，是抗结核免疫反应的主要配体，有较强的免疫原性和免疫反应性。RPF是一种细菌复活生长因子，以自分泌或旁分泌的形式促进休眠菌的复苏和生长，也是细菌生长真正必需的分泌蛋白之一。RPF蛋白是迄今为止发现的第1个能使休眠的细菌恢复生长繁殖能力的分泌型蛋白，是宿主免疫系统识别的靶抗原，能引起较强的免疫应答，刺激宿主机体产生的特异性抗体，能阻断RPF蛋白对MTB的作用，阻止MTB在体内的复苏和复发，因此RPF蛋白可能是预防和控制MTB感染的一种新型途径。
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公开(公告)号：CN102174112A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201110028081.2
申请日：2011-01-26
Applicant: 兰州大学
Abstract: 本发明涉及一种无标签结核融合蛋白TB10-Ag85B，利用基因工程技术，将结核分枝杆菌的基因TB10.4和Ag85B进行重组融合，构建重组质粒，进行诱导表达，获得重组基因的表达物，最后将重组基因表达物进行纯化，克隆构建了不带有任何标签的结核分枝杆菌融合蛋白TB10.4-Ag85B。本发明的优点在于：解决了融合蛋白所带有的标签会影响到动物实验以及更进一步的临床学试验的后续问题，并且通过利用不同的色谱分析方法使融合蛋白得到了有效的纯化，有望成为结核病预防的候选疫苗。
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公开(公告)号：CN102180974B
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201110068820.0
申请日：2011-03-22
Applicant: 兰州大学
CPC classification number: A61K39/04 , C07K14/35 , C07K2319/00
Abstract: 本发明公开了一种结核杆菌融合蛋白，是序列表中序列2的蛋白质，并提供了其制备方法和制备疫苗的应用。本发明所提供的构建并表达纯化去标签融合蛋白ESAT6-Ag85B-Mpt64190-198-Mtb8.4(EAMM)，目的是建立针对结核杆菌的免疫应答，以提高疫苗保护效果。本发明所构造的融合蛋白EAMM和佐剂混合作为结核亚单位疫苗，诱导Th1型细胞免疫为主的免疫反应和体液免疫反应，具有较强的免疫原性并且有很好的抗结核保护效果。
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