公开(公告)号：CN102174112A

公开(公告)日：2011-09-07

申请号：CN201110028081.2

申请日：2011-01-26

Applicant: 兰州大学

Inventor： 祝秉东 ,  章国平 ,  胡丽娜 ,  王秉翔 ,  达泽蛟 ,  辛奇 ,  张颖 ,  万艳

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/70 ,  A61K39/04 ,  A61P31/06 ,  C12R1/32 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种无标签结核融合蛋白TB10-Ag85B，利用基因工程技术，将结核分枝杆菌的基因TB10.4和Ag85B进行重组融合，构建重组质粒，进行诱导表达，获得重组基因的表达物，最后将重组基因表达物进行纯化，克隆构建了不带有任何标签的结核分枝杆菌融合蛋白TB10.4-Ag85B。本发明的优点在于：解决了融合蛋白所带有的标签会影响到动物实验以及更进一步的临床学试验的后续问题，并且通过利用不同的色谱分析方法使融合蛋白得到了有效的纯化，有望成为结核病预防的候选疫苗。

公开(公告)号：CN102174113A

公开(公告)日：2011-09-07

申请号：CN201110028082.7

申请日：2011-01-26

Applicant: 兰州大学

Inventor： 祝秉东 ,  章国平 ,  胡丽娜 ,  王秉翔 ,  达泽蛟 ,  高娃 ,  张颖 ,  万艳

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/70 ,  A61K39/04 ,  A61P31/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种无标签结核融合蛋白TB10-TB8，利用基因工程技术，将结核分枝杆菌的基因TB10.4和TB8.4进行重组融合，构建重组质粒pET30a-TB10.4-TB8.4，进行诱导表达，获得重组基因的表达物，最后将重组基因表达物进行纯化，克隆构建了不带有任何标签的结核分枝杆菌融合蛋白TB10.4-TB8.4。本发明的优点在于：解决了融合蛋白所带有的标签会影响到动物实验以及更进一步的临床学试验的后续问题，并且通过利用不同的色谱分析方法使融合蛋白得到了有效的纯化，有望成为结核病预防的候选疫苗。

公开(公告)号：CN102154324A

公开(公告)日：2011-08-17

申请号：CN201010613320.6

申请日：2010-12-29

Applicant: 兰州大学

Inventor： 祝秉东 ,  牛红霞 ,  胡丽娜 ,  李青 ,  王秉翔 ,  达泽蛟 ,  辛奇 ,  万艳 ,  马维民

IPC: C12N15/31 ,  C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  C07K1/20 ,  C07K1/18 ,  C07K1/16 ,  A61K39/04 ,  A61P31/06

CPC classification number: C07K14/34 ,  A61K39/04 ,  C07K2319/00 ,  C07K2319/40 ,  Y02A50/478

Abstract: 本发明公开了结核分枝杆菌融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3的构建、表达和纯化方法及其应用，将Mtb10.4和Hsp16.3基因进行PCR扩增并依次插入到克隆载体的多克隆位点中,构建重组载体；然后在大肠杆菌中表达；最后进行纯化得到融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3，该融合蛋白可在结核亚单位疫苗中应用。本发明的优点在于：该融合蛋白疫苗可诱导动物较强的细胞和体液免疫反应；通过动物攻毒实验表明，该疫苗在BCG免疫基础上，具有加强免疫作用，可提高和延长BCG的保护效果；且该疫苗无明显毒副作用。

公开(公告)号：CN102154324B

公开(公告)日：2012-11-28

申请号：CN201010613320.6

申请日：2010-12-29

Applicant: 兰州大学

Inventor： 祝秉东 ,  牛红霞 ,  胡丽娜 ,  李青 ,  王秉翔 ,  达泽蛟 ,  辛奇 ,  万艳 ,  马维民

IPC: C12N15/31 ,  C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  C07K1/20 ,  C07K1/18 ,  C07K1/16 ,  A61K39/04 ,  A61P31/06

CPC classification number: C07K14/34 ,  A61K39/04 ,  C07K2319/00 ,  C07K2319/40 ,  Y02A50/478

Abstract: 本发明公开了结核分枝杆菌融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3的构建、表达和纯化方法及其应用，将Mtb10.4和Hsp16.3基因进行PCR扩增并依次插入到克隆载体的多克隆位点中,构建重组载体；然后在大肠杆菌中表达；最后进行纯化得到融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3，该融合蛋白可在结核亚单位疫苗中应用。本发明的优点在于：该融合蛋白疫苗可诱导动物较强的细胞和体液免疫反应；通过动物攻毒实验表明，该疫苗在BCG免疫基础上，具有加强免疫作用，可提高和延长BCG的保护效果；且该疫苗无明显毒副作用。

公开(公告)号：CN102453096A

公开(公告)日：2012-05-16

申请号：CN201010528541.3

申请日：2010-11-02

Applicant: 兰州大学

Inventor： 祝秉东 ,  章国平 ,  王秉翔 ,  胡丽娜 ,  达泽蛟 ,  张颖 ,  李小娟 ,  唐克峰 ,  万艳

IPC: C07K19/00 ,  C07K1/20 ,  C07K1/18 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  A61K39/04 ,  A61P31/06

Abstract: 本发明涉及一种无标签结核融合蛋白ESAT6-Ag85B，利用基因工程技术，将结核分枝杆菌的基因ESAT6和Ag85B进行重组融合，构建重组质粒，进行诱导表达，获得重组基因的表达物，最后将重组基因表达物进行纯化，克隆构建了不带有任何标签的结核分枝杆菌融合蛋白ESAT6-Ag85B。本发明的优点在于：解决了融合蛋白所带有的标签会影响到动物实验以及更进一步的临床学试验的后续问题，并且通过利用不同的色谱分析方法使融合蛋白得到了有效的纯化，有望成为结核病预防的候选疫苗。