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公开(公告)号：CN118345103A
公开(公告)日：2024-07-16
申请号：CN202410647197.1
申请日：2024-05-23
申请人： 万华化学集团股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种L‑丙氨酸生物传感器及其制备方法和应用。所述生物传感器包括含有转录调控因子A4IT56编码基因、诱导型启动子、组成型启动子和荧光蛋白编码基因的重组表达载体。所述L‑丙氨酸生物传感器对L‑丙氨酸具有良好的响应度，可以灵敏地检测L‑丙氨酸的浓度，此外可基于酶标仪进行检测，可以快速筛选得到L‑丙氨酸的高产菌株，具有较高的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN116970545A
公开(公告)日：2023-10-31
申请号：CN202310949284.8
申请日：2023-07-28
申请人： 万华化学集团股份有限公司
IPC分类号： C12N1/21 , C12N9/12 , C12N9/04 , C12N9/10 , C12N9/88 , C12N15/52 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12N15/31 , C12N15/77 , C07K14/34 , C07K14/195 , C12P17/12 , C12R1/15
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，涉及工业微生物的育种，特别涉及一种生产四氢嘧啶的基因工程菌株的构建方法与应用。该菌株从谷氨酸棒杆菌ATCC13032基因组水平出发，异源过表达四氢嘧啶操纵子ectABC、天冬氨酸激酶突变基因lysCT311I及磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因ppc，实现了碳通量的高效引流；借助esaI/esaR群体感应系统调控高丝氨酸脱氢酶编码基因hom、L‑天冬氨酸‑4‑半醛水解酶编码基因dapA和柠檬酸合酶编码基因gltA表达，动态下调竞争支路代谢通量，平衡了菌体生长和产物生产；过表达本源苏氨酸外排蛋白编码基因thrE，并敲除脯氨酸摄取蛋白编码基因proP，提升了四氢嘧啶的转运效率。所构建菌株经5L发酵罐分批补料发酵40h，四氢嘧啶产量达70.4g/L，转化率为0.25g/g葡萄糖，具有良好的工业化应用前景。
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公开(公告)号：CN113699052B
公开(公告)日：2023-08-11
申请号：CN202010430275.4
申请日：2020-05-20
申请人： 万华化学(四川)有限公司 , 万华化学集团股份有限公司
摘要： 本发明公开了一株生产虾青素的重组酿酒酵母及其应用。本发明公开的重组酿酒酵母组成型表达β‑胡萝卜素酮化酶基因CrtW，诱导型表达β‑胡萝卜素羟化酶基因CrtZ，将中间产物β‑胡萝卜素合成为虾青素，所述β‑胡萝卜素酮化酶基因CrtW和β‑胡萝卜素羟化酶基因CrtZ的拷贝数之比为3:1‑3:2。利用本发明提供的重组酿酒酵母生产虾青素，虾青素的摇瓶发酵产量可达14.70mg/g DCW，同时纯度可达96.69％。
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公开(公告)号：CN117660269A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202211042214.6
申请日：2022-08-29
申请人： 万华化学(四川)有限公司 , 万华化学集团股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种生产丙二酸的重组大肠杆菌及其制备方法与应用。本发明公开的重组大肠杆菌能够以葡萄糖为原料，由草酰乙酸‑天冬氨酸途径合成丙二酸，其具有降低的丙酮酸激酶和/或丙酮酸甲酸裂解酶和/或乳酸脱氢酶和/或磷酸转乙酰酶—乙酸激酶的表达量和/或活性，并分模块组成型过量表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、天冬氨酸转氨酶和天冬氨酸‑α‑脱羧酶以及β‑丙氨酸丙酮酸转氨酶、琥珀酸半醛脱氢酶和丙酮酸羧化酶。本发明提供的重组大肠杆菌能提高丙二酸产量，且产生的杂质少，可简化后期的分离纯化流程，有利于工业化生产。
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公开(公告)号：CN117535280A
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202210913355.4
申请日：2022-08-01
申请人： 万华化学集团股份有限公司
IPC分类号： C12N11/12 , C12N11/084 , C12N11/089 , C12N11/10 , C12N11/14 , C12P7/46 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了一种利用农作物秸秆固定化微生物菌种发酵生产丁二酸的方法，包括秸秆的预处理与变性、变性秸秆吸附菌体、固定化菌种细胞微球的制备、固定化微球的改性、固定化发酵的步骤。本发明制备的固定化微球通过表面活性剂进行微球表面变性处理，使得载体的通透性增强，便于CO2进入固定化微球内，传质效果好，机械能力强，且包埋的菌体不渗漏，提高了丁二酸发酵产量，由游离细胞发酵产酸的50g/L提高至90g/L左右，产酸速率由0.8g/L/h提高至1.5g/L/h，转化率由75%提高至最高95%，可反复发酵至少15个批次，仍能保持高效的生产效率，且连续多批次发酵使用后的固定化载体还可以继续回收利用。
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公开(公告)号：CN117402850A
公开(公告)日：2024-01-16
申请号：CN202311714304.X
申请日：2023-12-14
申请人： 万华化学集团股份有限公司
摘要： 本发明公开糖基转移酶突变体及其制备方法和应用。所述糖基转移酶突变体的氨基酸序列包括以下序列中任意一种：（1）在SEQ ID NO:12所示序列基础上发生G19R、T88K、L153V、F278I或Y346H突变中任意一种或至少两种的序列；或，（2）由如（1）所述序列经取代、缺失或添加一个或至少两个氨基酸残基获得，且与（1）所述序列功能相同或相似的序列；或，（3）与（1）或（2）所述序列具有至少90%序列同一性，且与（1）所述序列功能相同或相似的序列。本发明提供的糖基转移酶突变体改变了糖基转移酶的特异性，提高bola‑槐糖脂的产量，降低了成本，具有较高的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN117230127A
公开(公告)日：2023-12-15
申请号：CN202210636191.5
申请日：2022-06-07
申请人： 万华化学(四川)有限公司 , 万华化学集团股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种发酵制备丁二酸的方法，该方法包括如下步骤：（1）种子液的培养；（2）发酵培养基的配制及种子培养液接种；（3）前期中性pH菌体生长阶段；（4）低pH厌氧发酵产丁二酸阶段；（5）发酵连续液流出发酵罐进行疏水沸石吸附；（6）吸附后发酵液返回发酵罐内继续发酵，同时加新鲜培养基维持发酵体积恒定；（7）向吸附丁二酸的疏水沸石中加入热水，进行解吸附。此工艺可以避免向发酵体系中加入pH中和剂，使发酵产生的丁二酸以分子态存在，发酵结束后无需进行酸化，另外，疏水沸石的使用既可实现在线分离丁二酸，同时又可以脱色，能够缩短分离路线，提高产品收率，降低分离成本。
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公开(公告)号：CN116463230A
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202210028472.2
申请日：2022-01-11
申请人： 万华化学集团股份有限公司
IPC分类号： C12N1/19 , C12N15/81 , C12N15/90 , C12N15/31 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12P5/02 , C12R1/865
摘要： 本发明公开了一种生产角鲨烯的酿酒酵母的构建方法。本发明公开的重组酿酒酵母将法尼基焦磷酸合成酶FPPS和角鲨烯合成酶SQS共定位到脂滴表面表达，将HMG1基因替换成截短的tHMG1基因，敲除了OPI3和CHO2基因，并表达了外源PLIN3基因。本发明利用分子定位技术将合成角鲨烯的关键酶FPPS和SQS共定位于酿酒酵母的脂滴表面，拉近了参与连续催化的酶的空间距离，并利用脂滴贮存角鲨烯，减轻了角鲨烯对宿主细胞的毒性，进一步通过调节脂滴的大小和数量，使角鲨烯产量提高了6倍。
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公开(公告)号：CN113444706B
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202010220394.7
申请日：2020-03-25
申请人： 万华化学集团股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种印迹脂肪酶及其应用。本发明公开一种制备印迹脂肪酶的方法，包括以高光学纯度L‑乳酸作为印迹模板对脂肪酶进行生物印迹的步骤。本发明将该印迹脂肪酶用于发酵制备L‑乳酸，得到的L‑乳酸光学纯度高，并且不需要对菌株进行改造，操作简便，成本低廉，能够适用于高光学纯度L‑乳酸的工业化生产。
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公开(公告)号：CN114277065A
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN202111649937.8
申请日：2021-12-30
申请人： 万华化学集团股份有限公司
摘要： 本发明属于生物化工领域，提供一种混合发酵联产乳酸和丁二酸的方法，包括：(1)将产乳酸菌株和产丁二酸菌株混合，(2)好氧培养阶段，用于生长菌体；(3)厌氧培养阶段，用于生产乳酸和丁二酸。本发明方法能够提高产物中丁二酸含量，使丁二酸易于回收，降低回收成本。
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