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公开(公告)号:CN108504654A
公开(公告)日:2018-09-07
申请号:CN201810330296.1
申请日:2018-04-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗塞尼卡谷病毒VHH抗体的酵母cDNA文库及其构建方法和用途,本发明从塞尼卡谷病毒灭活疫苗免疫的骆驼外周血中分离得到淋巴细胞,通过RT-PCR的方法得到抗塞尼卡谷病毒VHH抗体的cDNA片段,将VHH抗体的cDNA片段与pGADT7-Rec共转化酵母感受态细胞,得到抗塞尼卡谷病毒VHH抗体的酵母cDNA文库。结果表明该文库的滴度约为7.2×106cfu/ml,文库的重组率为100%。进一步对文库进行初步功能性鉴定,表明所构建的酵母文库中存在具有抗塞尼卡谷病毒的VHH抗体。本发明的提出为筛选抗塞尼卡谷病毒VHH抗体提供了平台,并且为塞尼卡谷的早期治疗和诊断提供了新的方法。
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公开(公告)号:CN107894508A
公开(公告)日:2018-04-10
申请号:CN201710771982.8
申请日:2017-08-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/532
CPC classification number: G01N33/6854 , G01N33/532 , G01N33/56983
Abstract: 本发明公开了一种用于塞内卡病毒抗体检测的固相竞争ELISA试剂盒及其应用。所述的试剂盒包括塞内卡病毒灭活抗原包被的酶标板以及HRP标记的塞内卡病毒兔抗IgG。本发明使用HRP标记兔抗IgG,替代传统ELISA中的一抗和二抗,简化了操作步骤。同时通过改变包被稳定工艺将SVV灭活抗原包被到固相载体表面,改变酶标抗体稀释液的配制工艺,可使酶标抗体工作液稳定保存而不改变其活性和效价,建立了特异检测SVV抗体的固相竞争ELISA试剂盒及其检测方法。本发明的提出弥补了SVV ELISA抗体检测的空缺,克服了现有VNT检测SVV抗体检测中重复性和敏感性低、操作程序繁琐的问题,为SVV抗体检测提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN106483291A
公开(公告)日:2017-03-08
申请号:CN201610778727.1
申请日:2016-08-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535 , C07K16/10
CPC classification number: G01N33/577 , C07K16/1009 , C07K2317/33 , G01N33/535 , G01N33/56983
Abstract: 本发明公开了一种基于型特异性单抗的Asia1型口蹄疫病毒抗体固相竞争ELISA试剂盒。含有HRP标记的Asia1型口蹄疫特异性单抗。本发明的试剂盒可用于Asia1型口蹄疫病毒抗体水平监测。替代现有ELISA中口蹄疫兔抗、豚鼠抗血清及抗豚鼠酶标抗体,简化ELISA方法步骤,提高稳定性、大幅度缩短检测时间,从24h缩短至1.5小时内,突破了原来ELISA需要一抗和二抗等反应过程。
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公开(公告)号:CN106084032A
公开(公告)日:2016-11-09
申请号:CN201610385207.4
申请日:2016-06-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/705 , C12N15/12 , C12N15/79 , A61K38/17 , A61P31/14
CPC classification number: C07K14/705 , A61K38/00
Abstract: 本发明涉及分子生物学领域,公开了一种猪天然免疫分子LGP2的突变体蛋白LGP2S169A及其制备和应用。LGP2S169A突变体蛋白序列为SEQ ID No.4中氨基酸所示。所述构建含有SEQ ID No.4中氨基酸序列的LGP2S169A的质粒所表达的蛋白具有良好的抗口蹄疫病毒的作用,为制备抗口蹄疫病毒药物或佐剂提供了新的靶点和理论支持。
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公开(公告)号:CN104651531A
公开(公告)日:2015-05-27
申请号:CN201510035254.1
申请日:2015-01-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/708 , C12Q1/6851 , C12Q2561/101 , C12Q2545/113
Abstract: 本发明公开用于检测青少年复发性呼吸道乳头瘤HPV11亚型的高度特异性引物对,和用于青少年复发性呼吸道乳头瘤HPV11亚型一步法TapMan 荧光定量PCR检测试剂盒。本发明的用于检测青少年复发性呼吸道乳头瘤状病毒的高度特异性引物对序列分别为SEQ ID No.1和 SEQ ID No.2,检测试剂盒内还有序列为 SEQ ID No.3的探针。本发明可对青少年复发性呼吸道乳头瘤HPV11亚型定量扩增、检测,可减少污染、提高了检测的精准度、操作简单快捷,非常适用于临床快速分型检测及该病毒流行病学调查的应用。
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公开(公告)号:CN102212554B
公开(公告)日:2014-03-12
申请号:CN201110082256.8
申请日:2011-04-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种肠道病毒71型感染性克隆及其构建方法。本发明的肠道病毒71型感染性克隆的构建方法是:从EV17病毒毒株提取的RNA为模板,用下述三对引物分别扩增出L1、L2和L3三个片段;再将L1片段经酶切后与真核表达载体连接,再转化至大肠杆菌中获得亚克隆质粒PL1,再将经PL1质粒与L2片段经酶切后连接转化为质粒PL2,再将质粒PL2与L3片段经酶切后连接转化,获得含L1、L2和L3片段的全基因组cDNA克隆的重组质粒;再将重组质粒转染至非洲绿猴肾细胞宿主细胞,得到EV711型感染性克隆。
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公开(公告)号:CN103266091A
公开(公告)日:2013-08-28
申请号:CN201310175324.4
申请日:2013-05-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/86 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种利用反向遗传操作技术制备的A型口蹄疫重组疫苗株及其制备方法和应用,一种是效价高、抗原匹配性和免疫保护率高的A型口蹄疫重组疫苗株,另一种是效价高、抗原匹配性、免疫保护率高且对宿主无致病性的A型口蹄疫重组无致病性疫苗株,疫苗株的抗原核苷酸序列为SEQIDNO:1所示,利用反向遗传操作系统能够拯救出病毒的真核质粒,用制备的重组疫苗株制成灭活苗,免疫猪和牛后可有效刺激机体产生免疫应答,并提供猪和牛体免疫保护作用,对A型AISA拓扑型毒株的10000倍牛半数感染剂量(BID50)攻毒实验,免疫保护率达100%,50%保护剂量(PD50)为10.81~13.59,可用于我国及其周边国家A型口蹄疫病毒的预防和控制。
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公开(公告)号:CN120041452A
公开(公告)日:2025-05-27
申请号:CN202510190008.7
申请日:2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了POLR2H基因或其编码蛋白作为靶点在制备调控小RNA病毒科病毒复制产品和/或疫苗生产中的应用,属于基因工程技术领域。本发明提供了一种POLR2H基因或其编码蛋白作为靶点在制备调控小RNA病毒科病毒复制产品和/或疫苗生产中的应用。上调所述POLR2H基因表达水平能够抑制小RNA病毒科病毒复制,降低所述POLR2H基因表达水平能够促进小RNA病毒科病毒复制。本发明制备的POLR2H基因编码蛋白功能丧失细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒的复制,提高病毒滴度和抗原产量,有助于制备高效的疫苗。
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公开(公告)号:CN120026026A
公开(公告)日:2025-05-23
申请号:CN202510190006.8
申请日:2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明涉及CISD2基因作为靶点在调控小RNA病毒复制和/或疫苗生产中的应用,属于基因工程技术领域。本发明提供了CISD2蛋白或CISD2基因作为靶点在制备调控小RNA病毒科病毒复制产品和/或疫苗生产中的应用,通过上调CISD2基因的表达量抑制小RNA病毒科病毒的复制,降低CISD2基因的表达量促进小RNA病毒科病毒的复制。本发明提供了一种用于敲除CISD2基因的sgRNA,能够靶向敲除CISD2基因,获得CISD2基因编码蛋白功能丧失的细胞系,进一步用于小RNA病毒科病毒及其疫苗的生产,能显著促进小RNA病毒科病毒的复制,提高病毒滴度和抗原产量。
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公开(公告)号:CN120026025A
公开(公告)日:2025-05-23
申请号:CN202510187919.4
申请日:2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明涉及敲除RAB20基因的sgRNA、RAB20基因敲除细胞系及其在病毒和/或疫苗生产中的应用,属于基因工程技术领域。本发明发现在宿主细胞中过表达RAB20会抑制小RNA病毒科病毒的复制,而抑制宿主细胞中RAB20基因表达能促进小RNA病毒科病毒的复制。本发明提供了一种特异性靶向RAB20基因的sgRNA,能够特异性靶向RAB20基因,实现RAB20基因的敲除,获得RAB20基因敲除细胞系,进一步将RAB20基因敲除细胞系作为小RNA病毒科病毒及其疫苗的生产细胞系,能够显著促进小RNA病毒科病毒的复制,提高病毒滴度和抗原产量。
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