公开(公告)号：CN106148568A

公开(公告)日：2016-11-23

申请号：CN201610536974.0

申请日：2016-07-08

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 ,  内蒙古河套农牧业技术研究院

Inventor： 尚佑军 ,  张志东 ,  陈妍 ,  吴锦艳 ,  王光祥 ,  刘湘涛 ,  尹双辉 ,  田宏 ,  杨顺利 ,  刘永杰 ,  张克山 ,  栾志舫

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种免疫磁珠试剂盒及其在检测小反刍兽疫病毒抗原中的用途，属于生物技术领域。本发明所述的试剂盒包括兔抗PPRV N蛋白IgG偶联的免疫磁珠、以PPRVM基因片段为靶点检测小反刍兽疫病毒抗原的引物对，RT‑PCR反应混合液及RNA聚合酶。所述引物对的序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示。本发明的提出克服了小反刍兽疫病毒抗原检测过程中PPRV病原易降解，且病原RNA提取过程中使用的待检毒液体积有限导致所提取的RNA无法达到RT‑PCR检测的最低要求，而出现假阴性结果的问题，为小反刍兽疫病毒抗原的检测提供了一种有效的技术手段。

公开(公告)号：CN101914501B

公开(公告)日：2012-10-10

申请号：CN201010251915.1

申请日：2010-08-07

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 孙世琪 ,  郭慧琛 ,  杨顺利 ,  沈小燕 ,  尹双辉 ,  尚佑军 ,  刘湘涛 ,  殷宏 ,  才学鹏

IPC: C12N7/04 ,  C12N15/42 ,  C12N15/63 ,  A61K39/135 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开一种亚洲I型口蹄疫病毒样颗粒及制备方法和用途。本发明的亚洲I型口蹄疫病毒样颗粒是由亚洲I型口蹄疫病毒的结构蛋白VP0、VP3和VP1构成，其中VP0的基因序列为SEQ 1，其中VP3的基因序列为SEQ 3，其中VP1的基因序列为SEQ 2。本发明的亚洲I型口蹄疫病毒样颗粒制备方法是通过扩增得到结构蛋白VP0、VP3和VP1，再经酶切后得到重组表达载体，再经小泛素样修饰蛋白酶酶切融合蛋白后在体外组装得到口蹄疫病毒样颗粒。

公开(公告)号：CN102702349A

公开(公告)日：2012-10-03

申请号：CN201210148523.1

申请日：2012-05-15

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 刘湘涛 ,  尹双辉 ,  杨顺利 ,  尚佑军 ,  孙世琪 ,  靳野 ,  田宏 ,  周广清

IPC: C07K16/10 ,  C12N15/11 ,  C12N15/63 ,  C12N5/10 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明公开了一种抗口蹄疫AsiaI型病毒的双峰驼VHH重链抗体及其制备方法和用途，属于生物技术领域。本发明首次利用重组的AsiaI型病毒样颗粒抗原免疫双峰驼，利用噬菌体展示技术建立AsiaI VHH免疫抗体库，筛选与口蹄疫AsiaI型病毒抗原具有良好亲和力的高特异性单域抗体，本发明所述的抗体具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO.1所示的序列同源性在98%以上的氨基酸序列。本发明的AsiaI VHH重链抗体对于研究AsiaI病毒感染机理和建立高度敏感和特异的抗原快速检测或诊断试剂具有重要意义。

公开(公告)号：CN102660545A

公开(公告)日：2012-09-12

申请号：CN201210180401.0

申请日：2012-06-04

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 刘湘涛 ,  吴锦艳 ,  田宏 ,  陈妍 ,  尚佑军 ,  尹双辉 ,  王光祥 ,  靳野 ,  张克山 ,  杨顺利 ,  刘永杰

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/867 ,  C12N7/04 ,  C12N5/07 ,  C12N15/10

Abstract: 一种用于抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的RNAi及其制备方法，所述包含siRNA序列、shRNA慢病毒表达载体构建、复制缺陷型慢病毒的获得、慢病毒感染Marc-145细胞（绿猴肾细胞）以及抑制PRRSV复制效果的验证方法，该序列具有明显抑制PRRSV在敏感细胞上复制的作用。本发明对猪瘟病毒体内外复制进行RNA干扰的探索，构建靶向猪瘟病毒基因组的特定保守基因区段的慢病毒载体介导的稳定整合的RNA干扰技术，有望构建靶向猪繁殖与呼吸综合征病毒的siRNA的转基因动物。为RNAi应用于猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因功能研究以及猪瘟的防治积累了必要的实验数据，为动物的抗病育种提供前期准备。

公开(公告)号：CN101914501A

公开(公告)日：2010-12-15

申请号：CN201010251915.1

申请日：2010-08-07

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 孙世琪 ,  郭慧琛 ,  杨顺利 ,  沈小燕 ,  尹双辉 ,  尚佑军 ,  刘湘涛 ,  殷宏 ,  才学鹏

IPC: C12N7/04 ,  C12N15/42 ,  C12N15/63 ,  A61K39/135 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开一种亚洲I型口蹄疫病毒样颗粒及制备方法和用途。本发明的亚洲I型口蹄疫病毒样颗粒是由亚洲I型口蹄疫病毒的结构蛋白VP0、VP3和VP1构成，其中VP0的基因序列为SEQ 1，其中VP3的基因序列为SEQ 3，其中VP1的基因序列为SEQ 2。本发明的亚洲I型口蹄疫病毒样颗粒制备方法是通过扩增得到结构蛋白VP0、VP3和VP1，再经酶切后得到重组表达载体，再经小泛素样修饰蛋白酶酶切融合蛋白后在体外组装得到口蹄疫病毒样颗粒。