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公开(公告)号：CN102808018B
公开(公告)日：2014-04-09
申请号：CN201210153944.3
申请日：2012-05-17
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种奶山羊PITX2基因单核苷酸多态性的检测方法，该方法以奶山羊基因组DNA或包含奶山羊PITX2基因的DNA序列为模板，利用PCR引物对P为引物，扩增奶山羊PITX2基因；通过限制性内切酶RsaI对其进行酶切，再根据琼脂糖凝胶电泳对酶切产物进行片段大小分离，利用凝胶成像系统分析其片段大小，从而确定奶山羊PITX2基因第543位的SNP。该SNP位点的TT基因型和TC基因型可作为显著提高奶山羊乳脂含量，而同时又显著降低乳糖含量、乳浓度的有效DNA标记。
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公开(公告)号：CN103305609A
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201310205614.9
申请日：2013-05-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种黄牛NRIP1基因单核苷酸多态性的检测方法与应用，以包含NRIP1基因的待测牛全基因组DNA为模板，以人为设计的引物对P605为引物，PCR扩增牛NRIP1基因，用限制性内切酶AluI消化PCR扩增产物之后，再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳；根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛NRIP1基因第605位的单核苷酸多态性；由于NRIP1基因涉及体重、日增重等生长性状，本发明所述检测方法为NRIP1基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础，以便用于中国黄牛生长性状的标记辅助选择（MAS）育种，有利于快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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公开(公告)号：CN103290113A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201310169313.5
申请日：2013-05-06
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种快速检测黄牛SIRT1基因启动子区SNP的RFLP方法，以黄牛血液全基因组DNA为模板，以引物对P（F、R）为引物，PCR扩增黄牛SIRT1基因启动子区，用限制性内切酶SmaI消化PCR扩增产物，再对酶切后的片段进行琼脂糖凝胶电泳，根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛SIRT1启动子区单核苷酸多态性。由于SIRT1涉及到的肌肉分化、脂肪生成等重要功能与黄牛肉质性状密切相关，该SNP又能显著影响SIRT1基因的启动子活性，并且与黄牛多种重要经济性状相关，本发明提供的检测方法为SIRT1基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础，可用于中国黄牛生长性状的标记辅助选择，以便于快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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公开(公告)号：CN103205462A
公开(公告)日：2013-07-17
申请号：CN201210525343.0
申请日：2012-12-09
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/861 , C12N15/66 , C12Q1/68 , C12N5/10
Abstract: 本发明一种质粒型腺病毒载体pAd-IGF2及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。所述质粒型腺病毒载体pAd-IGF2的构建方法包括：(1)将秦川牛IGF2基因插入pAdTrack-CMV腺病毒穿梭质粒的CMV启动子之下，构建重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-IGF2；(2)Pme Ⅰ线性化后转化含有pAdEasy-l质粒的E.col iBJ5183感受态细胞，利用E.coli BJ5183内Cre重组酶高效的同源重组系统，在细菌中完成pAdTrack-CMV-IGF2和pAdEasy-1的同源重组；将正确的重组腺病毒质粒命名为pAd-IGF2；(3)pAd-IGF2经Pac Ⅰ酶切线性化后，脂质体转染293A细胞和秦川牛原代肌肉细胞，产生并获得重组病毒颗粒。本发明的质粒型腺病毒载体pAd-IGF2具有可应用于秦川牛IGF2基因功能研究、鉴定和对种子细胞进行改造，调控肌肉生长发育相关基因的代谢。
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公开(公告)号：CN102399819B
公开(公告)日：2013-06-19
申请号：CN201110244070.8
申请日：2011-08-24
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/861 , C12N15/66
Abstract: 构建含秦川牛NRIP1(nuclear receptor interacting protein 1)基因的重组腺病毒载体，可应用于秦川牛NRIP1基因功能研究、鉴定和对种子细胞进行改造，调控肌肉、脂肪、生殖等组织相关基因的代谢。方法是将秦川牛NRIP1基因插入pAdTrack-CMV腺病毒穿梭质粒的CMV启动子之下，构建重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-NRIP1。PmeI线性化后转化含有pAdEasy-1质粒的E.coli BJ5183感受态细胞，利用E.coli BJ5183内Cre重组酶高效的同源重组系统，在细菌中完成pAdTrack-CMV-NRIP1和pAdEasy-1的同源重组。将正确的重组腺病毒质粒命名为pAd-NRIP1。pAd-NRIP1经PacI酶切线性化后，脂质体转染293A细胞产生并获得重组病毒颗粒。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103146809A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201210549050.6
申请日：2012-12-17
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种检测黄牛生长性状的基因诊断试剂盒，是一种LHX3基因检测黄牛生长性状的方法，该方法以包含LHX3基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P为引物，PCR扩增黄牛LHX3基因；通过DNA测序和PCR-SSCP技术进行基因多态性的检测与快速分型。该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与秦川牛生长性状密切相关的分子遗传标记，故本发明提供的检测方法可用于秦川牛肉用和生长性状的分子标记辅助选择，进而快速建立遗传资源优良的黄牛种群。本发明检测方法简单、成本低，检测结果直接、可靠，适用于对LHX3基因第10385位突变的大规模的筛查和诊断。
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公开(公告)号：CN103060439A
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201210532766.5
申请日：2012-12-10
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种检测黄牛生长性状的基因诊断试剂盒，是一种BMP7基因检测黄牛生长性状的方法，该方法以包含BMP7基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P为引物，PCR扩增黄牛BMP7基因；通过DNA测序和PCR-SSCP技术进行基因多态性的检测与快速分型，该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与黄牛生长性状密切相关的分子遗传标记，故本发明提供的检测方法可用于黄牛生长性状的分子标记辅助选择，进而快速建立遗传资源优良的黄牛种群。本发明检测方法简单、成本低，检测结果直接、可靠，适用于对黄牛BMP7基因突变位点的大规模的筛查和诊断。
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公开(公告)号：CN103031376A
公开(公告)日：2013-04-10
申请号：CN201210528854.8
申请日：2012-12-10
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种检测中外不同牛群体的基因诊断试剂盒，属于分子遗传学领域。一种GLI3基因检测中外不同牛群体的方法，包括以引物对P为引物，PCR扩增黄牛GLI3基因；进行DNA测序和SSCP多态性的检测及其不同基因型与经济性状的关联分析。该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与中外不同牛群体中特异分子遗传标记，故本发明提供的检测方法可用于区分中外不同牛群体，进而快速建立遗传资源优良的黄牛种群。本发明的优点是：首次提供了在3个中国黄牛群体中GLI3基因存在一种突变，并且该突变在国外牛品种中不存在多态性。本发明检测方法简单、成本低，检测结果直接、可靠，适用于中外不同牛群体GLI3基因大规模的筛查和诊断。
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公开(公告)号：CN101899500B
公开(公告)日：2012-10-17
申请号：CN201010108118.8
申请日：2010-02-09
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种快速检测黄牛KLF7基因单核苷酸多态性的方法，以包含KLF7基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P1、P2、P3等摩尔比的混合物为引物，PCR扩增黄牛KLF7基因；用限制性内切酶TaqI消化PCR扩增产物之后，再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳；根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛KLF7基因第41401、42025、42075位的单核苷酸多态性。本发明对KLF7基因的SNPs进行了基因分型和基因频率分析，以及与南阳牛不同生长阶段的生长性状之间进行了性状关联分析；结果表明：KLF7基因尤其是P2检测SNP位点可用作黄牛生长性状早期选择(6月龄和12月龄)的分子标记。
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公开(公告)号：CN101921854B
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201010255639.6
申请日：2010-08-18
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种黄牛chemerin基因单核苷酸多态性的检测方法，其基因多态性包括：在黄牛chemerin基因第868位为A或G的碱基多态性；在黄牛chemerin基因第1021位为G或A的碱基多态性。上述黄牛chemerin基因的单核苷酸多态性为：以包含chemerin基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对(包括P和newP)为引物，PCR扩增黄牛chemerin基因；用限制性内切酶PvuII消化PCR扩增产物之后，再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳；根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛chemerin基因第868位和第1021位的单核苷酸多态性；该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与黄牛生产性状密切相关的分子遗传标记，中国黄牛肉用生长性状的标记辅助选择(MAS)，快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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