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公开(公告)号：CN103290113A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201310169313.5
申请日：2013-05-06
申请人： 西北农林科技大学
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明公开了一种快速检测黄牛SIRT1基因启动子区SNP的RFLP方法，以黄牛血液全基因组DNA为模板，以引物对P（F、R）为引物，PCR扩增黄牛SIRT1基因启动子区，用限制性内切酶SmaI消化PCR扩增产物，再对酶切后的片段进行琼脂糖凝胶电泳，根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛SIRT1启动子区单核苷酸多态性。由于SIRT1涉及到的肌肉分化、脂肪生成等重要功能与黄牛肉质性状密切相关，该SNP又能显著影响SIRT1基因的启动子活性，并且与黄牛多种重要经济性状相关，本发明提供的检测方法为SIRT1基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础，可用于中国黄牛生长性状的标记辅助选择，以便于快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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公开(公告)号：CN103290123B
公开(公告)日：2014-09-10
申请号：CN201310204434.9
申请日：2013-05-28
申请人： 西北农林科技大学
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明公开了一种黄牛IGF2基因单核苷酸多态性的检测方法及试剂盒，以包含IGF2基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，PCR扩增黄牛IGF2基因；通过DNA测序和限制性片段长度多态性聚合酶链反应技术（PCR-RFLP）进行基因多态性的检测与快速分型，该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与黄牛生长性状密切相关的分子遗传标记。本发明提供的检测方法可用于黄牛生长性状的分子标记辅助选择，进而快速建立遗传资源优良的黄牛种群。本发明检测方法简单、成本低，检测结果直接、可靠，适用于对黄牛IGF2基因突变位点的大规模的筛查和诊断。
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公开(公告)号：CN103290113B
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201310169313.5
申请日：2013-05-06
申请人： 西北农林科技大学
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明公开了一种快速检测黄牛SIRT1基因启动子区SNP的RFLP方法，以黄牛血液全基因组DNA为模板，以引物对P（F、R）为引物，PCR扩增黄牛SIRT1基因启动子区，用限制性内切酶SmaI消化PCR扩增产物，再对酶切后的片段进行琼脂糖凝胶电泳，根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛SIRT1启动子区单核苷酸多态性。由于SIRT1涉及到的肌肉分化、脂肪生成等重要功能与黄牛肉质性状密切相关，该SNP又能显著影响SIRT1基因的启动子活性，并且与黄牛多种重要经济性状相关，本发明提供的检测方法为SIRT1基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础，可用于中国黄牛生长性状的标记辅助选择，以便于快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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公开(公告)号：CN102296110B
公开(公告)日：2016-08-10
申请号：CN201110201228.3
申请日：2011-07-18
申请人： 西北农林科技大学
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明公开了一种快速检测黄牛FGF21基因SNP的RFLP方法，以包含FGF21基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P1、P2、P3为引物，PCR扩增黄牛FGF21基因，发现4个SNP位点；针对这4个SNP位点分别设计引物对F159、F297、F940、F1151，依次人为引入SalI、XhoI、XbaI、MspI酶切位点，进行PCR扩增，用上述四种限制性内切酶分别酶切该PCR扩增产物，再用琼脂糖凝胶电泳检测酶切后的片段，根据电泳结果鉴定黄牛FGF21基因第159位、第297位、第940位、第1151位的单核苷酸多态性。由于FGF21基因功能涉及体重等生长性状，本发明提供的检测方法为FGF21基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础，以便用于中国黄牛生长性状的标记辅助选择，快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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公开(公告)号：CN103290123A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201310204434.9
申请日：2013-05-28
申请人： 西北农林科技大学
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明公开了一种黄牛IGF2基因单核苷酸多态性的检测方法及试剂盒，以包含IGF2基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，PCR扩增黄牛IGF2基因；通过DNA测序和限制性片段长度多态性聚合酶链反应技术（PCR-RFLP）进行基因多态性的检测与快速分型，该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与黄牛生长性状密切相关的分子遗传标记。本发明提供的检测方法可用于黄牛生长性状的分子标记辅助选择，进而快速建立遗传资源优良的黄牛种群。本发明检测方法简单、成本低，检测结果直接、可靠，适用于对黄牛IGF2基因突变位点的大规模的筛查和诊断。
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公开(公告)号：CN103031336A
公开(公告)日：2013-04-10
申请号：CN201210524888.X
申请日：2012-12-10
申请人： 西北农林科技大学
IPC分类号： C12N15/861 , C12N15/66 , C12N5/10 , C12Q1/68 , G01N33/68
摘要： 本发明牛质粒型腺病毒载体pAd-ZBED6及其构建方法和用途，属于基因工程技术领域。牛质粒型腺病毒载体pAd-ZBED6的构建方法包括：(1)将秦川牛ZBED6基因插入pAdTrack-CMV腺病毒穿梭质粒的CMV启动子之下，构建重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-ZBED6；(2)Pme I线性化后转化含有pAdEasy-l质粒的E.coli BJ5183感受态细胞，利用E.coli BJ5183内Cre重组酶高效的同源重组系统，在细菌中完成pAdTrack-CMV-ZBED6和pAdEasy-1的同源重组，将正确的重组腺病毒质粒命名为pAd-ZBED6；(3)pAd-ZBED6经Pac I酶切线性化后，脂质体转染293A细胞和秦川牛原代肌肉细胞，产生并获得重组病毒颗粒。本发明可应用于秦川牛ZBED6基因功能研究、鉴定和对种子细胞进行改造，调控肌肉生长发育相关基因的代谢。
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公开(公告)号：CN102296110A
公开(公告)日：2011-12-28
申请号：CN201110201228.3
申请日：2011-07-18
申请人： 西北农林科技大学
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明公开了一种快速检测黄牛FGF21基因SNP的RFLP方法，以包含FGF21基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P1、P2、P3为引物，PCR扩增黄牛FGF21基因，发现4个SNP位点；针对这4个SNP位点分别设计引物对F159、F297、F940、F1151，依次人为引入SalI、XhoI、XbaI、MspI酶切位点，进行PCR扩增，用上述四种限制性内切酶分别酶切该PCR扩增产物，再用琼脂糖凝胶电泳检测酶切后的片段，根据电泳结果鉴定黄牛FGF21基因第159位、第297位、第940位、第1151位的单核苷酸多态性。由于FGF21基因功能涉及体重等生长性状，本发明提供的检测方法为FGF21基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础，以便用于中国黄牛生长性状的标记辅助选择，快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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