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公开(公告)号：CN102296110B
公开(公告)日：2016-08-10
申请号：CN201110201228.3
申请日：2011-07-18
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种快速检测黄牛FGF21基因SNP的RFLP方法，以包含FGF21基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P1、P2、P3为引物，PCR扩增黄牛FGF21基因，发现4个SNP位点；针对这4个SNP位点分别设计引物对F159、F297、F940、F1151，依次人为引入SalI、XhoI、XbaI、MspI酶切位点，进行PCR扩增，用上述四种限制性内切酶分别酶切该PCR扩增产物，再用琼脂糖凝胶电泳检测酶切后的片段，根据电泳结果鉴定黄牛FGF21基因第159位、第297位、第940位、第1151位的单核苷酸多态性。由于FGF21基因功能涉及体重等生长性状，本发明提供的检测方法为FGF21基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础，以便用于中国黄牛生长性状的标记辅助选择，快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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公开(公告)号：CN102399819A
公开(公告)日：2012-04-04
申请号：CN201110244070.8
申请日：2011-08-24
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/861 , C12N15/66
Abstract: 构建含秦川牛NRIP1(nuclear receptor interacting protein 1)基因的重组腺病毒载体，可应用于秦川牛NRIP1基因功能研究、鉴定和对种子细胞进行改造，调控肌肉、脂肪、生殖等组织相关基因的代谢。方法是将秦川牛NRIP1基因插入pAdTrack-CMV腺病毒穿梭质粒的CMV启动子之下，构建重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-NRIP1。PmeI线性化后转化含有pAdEasy-1质粒的E.coli BJ5183感受态细胞，利用E.coli BJ5183内Cre重组酶高效的同源重组系统，在细菌中完成pAdTrack-CMV-NRIP1和pAdEasy-1的同源重组。将正确的重组腺病毒质粒命名为pAd-NRIP1。pAd-NRIP1经PacI酶切线性化后，脂质体转染293A细胞产生并获得重组病毒颗粒。
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公开(公告)号：CN103305609A
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201310205614.9
申请日：2013-05-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种黄牛NRIP1基因单核苷酸多态性的检测方法与应用，以包含NRIP1基因的待测牛全基因组DNA为模板，以人为设计的引物对P605为引物，PCR扩增牛NRIP1基因，用限制性内切酶AluI消化PCR扩增产物之后，再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳；根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛NRIP1基因第605位的单核苷酸多态性；由于NRIP1基因涉及体重、日增重等生长性状，本发明所述检测方法为NRIP1基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础，以便用于中国黄牛生长性状的标记辅助选择（MAS）育种，有利于快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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公开(公告)号：CN102399819B
公开(公告)日：2013-06-19
申请号：CN201110244070.8
申请日：2011-08-24
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/861 , C12N15/66
Abstract: 构建含秦川牛NRIP1(nuclear receptor interacting protein 1)基因的重组腺病毒载体，可应用于秦川牛NRIP1基因功能研究、鉴定和对种子细胞进行改造，调控肌肉、脂肪、生殖等组织相关基因的代谢。方法是将秦川牛NRIP1基因插入pAdTrack-CMV腺病毒穿梭质粒的CMV启动子之下，构建重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-NRIP1。PmeI线性化后转化含有pAdEasy-1质粒的E.coli BJ5183感受态细胞，利用E.coli BJ5183内Cre重组酶高效的同源重组系统，在细菌中完成pAdTrack-CMV-NRIP1和pAdEasy-1的同源重组。将正确的重组腺病毒质粒命名为pAd-NRIP1。pAd-NRIP1经PacI酶切线性化后，脂质体转染293A细胞产生并获得重组病毒颗粒。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102206705A
公开(公告)日：2011-10-05
申请号：CN201110062693.3
申请日：2011-03-18
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种检测黄牛Angptl6基因单核苷酸多态性的方法，以包含Angptl6基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P(包含P1和P2)为引物，用PCR法扩增黄牛Angptl6基因，然后用限制性内切酶ScaI消化PCR扩增产物，再对酶切后的片段进行琼脂糖凝胶电泳，根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛Angptl6基因(GenBank Accession number：NW_003104015)第2359位的单核苷酸多态性。由于Angptl6基因功能对生长发育性状具有重要生物学功能，本发明提供的检测方法为Angptl6基因的SNP与生长性状关联的建立奠定了基础。本发明还发现，Angptl6基因单核苷酸多态性对体长指数有显著影响，故本发明提供的检测方法可用于中国黄牛肉用和生长性状的分子标记辅助选择，进而快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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公开(公告)号：CN102206705B
公开(公告)日：2013-02-13
申请号：CN201110062693.3
申请日：2011-03-18
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种检测黄牛Angptl6基因单核苷酸多态性的方法，以包含Angptl6基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P(包含P1和P2)为引物，用PCR法扩增黄牛Angptl6基因，然后用限制性内切酶ScaI消化PCR扩增产物，再对酶切后的片段进行琼脂糖凝胶电泳，根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛Angptl6基因(GenBank Accession number：NW_003104015)第2359位的单核苷酸多态性。由于Angptl6基因功能对生长发育性状具有重要生物学功能，本发明提供的检测方法为Angptl6基因的SNP与生长性状关联的建立奠定了基础。本发明还发现，Angptl6基因单核苷酸多态性对体长指数有显著影响，故本发明提供的检测方法可用于中国黄牛肉用和生长性状的分子标记辅助选择，进而快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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公开(公告)号：CN102296110A
公开(公告)日：2011-12-28
申请号：CN201110201228.3
申请日：2011-07-18
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种快速检测黄牛FGF21基因SNP的RFLP方法，以包含FGF21基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P1、P2、P3为引物，PCR扩增黄牛FGF21基因，发现4个SNP位点；针对这4个SNP位点分别设计引物对F159、F297、F940、F1151，依次人为引入SalI、XhoI、XbaI、MspI酶切位点，进行PCR扩增，用上述四种限制性内切酶分别酶切该PCR扩增产物，再用琼脂糖凝胶电泳检测酶切后的片段，根据电泳结果鉴定黄牛FGF21基因第159位、第297位、第940位、第1151位的单核苷酸多态性。由于FGF21基因功能涉及体重等生长性状，本发明提供的检测方法为FGF21基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础，以便用于中国黄牛生长性状的标记辅助选择，快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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公开(公告)号：CN102251038A
公开(公告)日：2011-11-23
申请号：CN201110201229.8
申请日：2011-07-18
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种检测黄牛TMEM18(transmembrane protein 18)基因单核苷酸多态性的方法，其基因多态性包括：在黄牛TMEM18基因第3843位为A或G的碱基多态性；在黄牛TMEM18基因第3873位为G或A的碱基多态性。上述黄牛TMEM18基因的单核苷酸多态性为：以包含TMEM18基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对1F和2F为引物，PCR扩增黄牛TMEM18基因；分别用限制性内切酶XspI和MluI消化PCR扩增产物之后，再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳；根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛TMEM18基因第3843位和第3873位的单核苷酸多态性；该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与黄牛生产性状密切相关的分子遗传标记，以便于中国黄牛肉用生长性状的标记辅助选择(MAS)，快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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公开(公告)号：CN102251038B
公开(公告)日：2016-08-03
申请号：CN201110201229.8
申请日：2011-07-18
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种检测黄牛TMEM18(transmembrane protein 18)基因单核苷酸多态性的方法，其基因多态性包括：在黄牛TMEM18基因第3843位为A或G的碱基多态性；在黄牛TMEM18基因第3873位为G或A的碱基多态性。上述黄牛TMEM18基因的单核苷酸多态性为：以包含TMEM18基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对1F和2F为引物，PCR扩增黄牛TMEM18基因；分别用限制性内切酶XspI和MluI消化PCR扩增产物之后，再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳；根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛TMEM18基因第3843位和第3873位的单核苷酸多态性；该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与黄牛生产性状密切相关的分子遗传标记，以便于中国黄牛肉用生长性状的标记辅助选择(MAS)，快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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