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公开(公告)号:CN114316037A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202210011223.2
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 秦晓东 , 茹毅 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种O型口蹄疫病毒结构蛋白的抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒146s作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,获得一株高效分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系,并获得了一种鼠单克隆抗体m19。间接免疫荧光试验表明所述单克隆抗体m19对O型不同谱系毒株均具有很好的反应性,而不和A型不同谱系毒株反应。利用单克隆抗体m19和O型结构蛋白兔抗血清建立了O型口蹄疫病毒结构蛋白固相竞争ELISA检测试剂盒,相较于现有抗体,显著提高了检测结果的灵敏度和特异性,适用于O型口蹄疫感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测,同时,也是一种监测口蹄疫非免疫地区感染情况的新方法。
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公开(公告)号:CN111996202A
公开(公告)日:2020-11-27
申请号:CN202010212908.4
申请日:2020-03-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨帆 , 朱紫祥 , 魏婷 , 曹伟军 , 刘华南 , 郑敏 , 张伟 , 田宏 , 张克山 , 刘永杰 , 党文 , 马旭升 , 李丹 , 茹毅 , 何继军 , 郭建宏 , 刘湘涛
IPC: C12N15/41 , C12N15/42 , C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/295 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种重组O型口蹄疫病毒VP1基因的塞内卡重组病毒、重组疫苗株及其制备方法和应用,涉及基因工程技术领域。本发明通过对SVV/FJ/001株进行基因缺失突变改造,同时在SVA cDNA中融合进O型口蹄疫病毒的VP1基因,得到塞内卡重组病毒,该重组病毒能够表达融合进的外源FMDV VP1基因,且表达产物具有良好的反应原性;制备得到的疫苗株抗原产能高,致病性显著降低甚至对猪无致病性,灭活疫苗免疫动物后不仅能激发SVA的免疫应答,而且能产生针对融合基因的免疫活性,该疫苗株显著提高了生物安全性,可用于塞内卡病毒及一种或多种非塞内卡病毒的防控。
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公开(公告)号:CN111394389A
公开(公告)日:2020-07-10
申请号:CN202010212435.8
申请日:2020-03-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/86 , C12N15/66 , C12N7/01 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种针对正链RNA病毒的单质粒拯救系统及基于该系统的塞内卡病毒感染性克隆及构建方法和应用,涉及基因工程技术领域。本发明提供了针对正链RNA病毒的单质粒拯救系统以及利用该拯救系统可定向设计SVA反向重组疫苗及构建SVA定向突变毒株在病毒基因功能、病毒变异及致病机制等研究中的应用。本发明利用聚合酶I和聚合酶II启动子、终止子、核酶等元件构建的单质粒塞内卡病毒拯救系统,实现了在质粒水平上编辑病毒基因组,为病毒定向设计、构建和拯救提供了技术平台。
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公开(公告)号:CN120041452A
公开(公告)日:2025-05-27
申请号:CN202510190008.7
申请日:2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了POLR2H基因或其编码蛋白作为靶点在制备调控小RNA病毒科病毒复制产品和/或疫苗生产中的应用,属于基因工程技术领域。本发明提供了一种POLR2H基因或其编码蛋白作为靶点在制备调控小RNA病毒科病毒复制产品和/或疫苗生产中的应用。上调所述POLR2H基因表达水平能够抑制小RNA病毒科病毒复制,降低所述POLR2H基因表达水平能够促进小RNA病毒科病毒复制。本发明制备的POLR2H基因编码蛋白功能丧失细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒的复制,提高病毒滴度和抗原产量,有助于制备高效的疫苗。
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公开(公告)号:CN120026026A
公开(公告)日:2025-05-23
申请号:CN202510190006.8
申请日:2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明涉及CISD2基因作为靶点在调控小RNA病毒复制和/或疫苗生产中的应用,属于基因工程技术领域。本发明提供了CISD2蛋白或CISD2基因作为靶点在制备调控小RNA病毒科病毒复制产品和/或疫苗生产中的应用,通过上调CISD2基因的表达量抑制小RNA病毒科病毒的复制,降低CISD2基因的表达量促进小RNA病毒科病毒的复制。本发明提供了一种用于敲除CISD2基因的sgRNA,能够靶向敲除CISD2基因,获得CISD2基因编码蛋白功能丧失的细胞系,进一步用于小RNA病毒科病毒及其疫苗的生产,能显著促进小RNA病毒科病毒的复制,提高病毒滴度和抗原产量。
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公开(公告)号:CN120026025A
公开(公告)日:2025-05-23
申请号:CN202510187919.4
申请日:2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明涉及敲除RAB20基因的sgRNA、RAB20基因敲除细胞系及其在病毒和/或疫苗生产中的应用,属于基因工程技术领域。本发明发现在宿主细胞中过表达RAB20会抑制小RNA病毒科病毒的复制,而抑制宿主细胞中RAB20基因表达能促进小RNA病毒科病毒的复制。本发明提供了一种特异性靶向RAB20基因的sgRNA,能够特异性靶向RAB20基因,实现RAB20基因的敲除,获得RAB20基因敲除细胞系,进一步将RAB20基因敲除细胞系作为小RNA病毒科病毒及其疫苗的生产细胞系,能够显著促进小RNA病毒科病毒的复制,提高病毒滴度和抗原产量。
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公开(公告)号:CN118526594A
公开(公告)日:2024-08-23
申请号:CN202410761843.7
申请日:2024-06-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: A61K45/00 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12N15/867 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N7/00 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种TRIM7基因/蛋白为靶点在筛选抑制口蹄疫病毒复制的药物中的应用。具体为:本发明利用CRISPR/Cas9系统构建了TRIM7敲除细胞系,获得的单克隆细胞系对口蹄疫病毒具有抗性表型,能够显著抑制小RNA病毒科病毒在细胞内的复制,而且TRIM7基因的敲除并不影响宿主细胞的正常生长,为研究TRIM7基因在细胞内调控病原微生物复制的分子机制提供了研究工具和材料,也可用于抗小RNA病毒科病毒的动物育种,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN116445486B
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN202310322418.3
申请日:2023-03-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/12 , C12N7/00 , C12N5/10 , A61K39/135 , A61K38/17 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/91 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及KLHL34敲除细胞系的构建及作为小RNA病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。本发明首先发现,抑制宿主细胞中KLHL34基因表达能促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制;其次,本发明提供了一种特异性靶向KLHL34的sgRNA,所述sgRNA能够特异性靶向KLHL34基因,结合CRISPR‑Cas9技术实现了KLHL34基因的敲除,获得的单克隆细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制,提高FMDV
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公开(公告)号:CN116870145A
公开(公告)日:2023-10-13
申请号:CN202310648279.3
申请日:2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 郝荣增 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: A61K39/12 , A61K39/385 , A61K9/14 , A61K47/34 , A61K47/32 , A61K47/36 , A61K47/10 , A61K47/42 , A61K47/02 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种九组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、E165R蛋白、C129R蛋白、P72蛋白和Y蛋白组成的九组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合,其中至少一种抗原与纳米颗粒载体形成含有所述抗原或其抗原表位的纳米颗粒;所述九组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合能够刺激机体产生较强的免疫反应;制备的九组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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公开(公告)号:CN116769928A
公开(公告)日:2023-09-19
申请号:CN202310743827.0
申请日:2023-06-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/6888 , G01N33/68 , A61K38/46 , A61P31/14 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/867 , C12N5/10
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种LTA4H基因/蛋白为靶点在筛选抑制口蹄疫病毒复制的药物中的应用。具体为:①本发明首先发现抑制或沉默LTA4H基因/蛋白能够抑制口蹄疫病毒的复制,可作为靶点用于筛选抑制口蹄疫病毒复制的药物;②以LTA4H为靶点的涉及了靶向LTA4H的sgRNA,结合CRISPR‑Cas9技术在PK‑15细胞中实现了LTA4H的完全敲除,获得的细胞系对口蹄疫病毒具有抗性表型,对未来预防或抑制FMDV感染提供一些理论依据,具有广阔的应用前景。
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