一种抗蛋白酶降解的猪源抗菌肽突变体及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN113185614A

    公开(公告)日:2021-07-30

    申请号:CN202110437861.6

    申请日:2021-04-22

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种抗蛋白酶降解的猪源抗菌肽突变体及其制备方法与应用,属于基因工程领域。一种猪源抗菌肽突变体PMAP‑36(kr‑rr),对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞杆菌、枯草芽孢杆菌、溶壁微球菌和短小芽孢杆菌具有显著的抑菌活性,对大肠杆菌E.coli也有抑制作用。重组酵母菌株P.pastoris X33/pPCIZ‑oriopSP(d4)‑PMAP36,实现了PMAP‑36(kr‑rr)在毕赤酵母X‑33中高水平分泌表达。抑菌结果显示,PMAP‑36(kr‑kk)发酵液抑菌活力显著高于PMAP‑36。本研究为抗菌肽PMAP‑36(kr‑kk)在饲料中的安全生产与应用奠定了基础。

    热稳定性提高的葡萄糖氧化酶突变体及其编码基因和应用

    公开(公告)号:CN112760299A

    公开(公告)日:2021-05-07

    申请号:CN202110175757.4

    申请日:2021-02-06

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了热稳定性提高的葡萄糖氧化酶突变体及其编码基因和应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明以来源于黑曲霉(Aspergillus niger)的葡萄糖氧化酶GOD作为母本,经多位点定点突变后得到热稳定性提高的葡萄糖氧化酶GODm。与野生型GOD在75℃下处理5min后失活相比,本发明中的突变体仍然有52.37%的酶活残余,比酶活达到534.93U/mg月是野生型GOD的2倍。本发明的突变体酶GODm热稳定性具有明显优势,有利于运输与保存,大大拓宽该酶在高温下的应用潜力。

    一种反式茴香脑加氧酶的突变体和突变株

    公开(公告)号:CN108795889B

    公开(公告)日:2021-04-20

    申请号:CN201810663221.5

    申请日:2018-06-25

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种反式茴香脑加氧酶的突变体和突变株,所述反式茴香脑加氧酶的突变体与野生型反式茴香脑加氧酶氨基酸序列相比,其185位氨基酸Glu变为Asp,所述反式茴香脑加氧酶的突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO 1所示。合成对茴香醛、藜芦醛、洋茉莉醛、香兰素的转化速率分别为原始菌株的1.91、2.08、1.33、1.92倍,5F4在生物法合成芳香醛香料中,展现了良好的应用潜力,同时5F4的催化时pH的适应性更广泛,更适合用工业生产应用,能够降低成本,提高生产效率。

    一种比活提高的溶菌酶突变体

    公开(公告)号:CN111206025A

    公开(公告)日:2020-05-29

    申请号:CN202010127139.8

    申请日:2020-02-28

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种比活提高的溶菌酶突变体,属于生物工程技术领域。本发明公开了一种利用基因工程在人源溶菌酶C末端添加疏水短肽Val-Ile-Pro-Leu-Phe而得到的人源溶菌酶突变体,其比活提高了126%。本发明还公开了一种含突变人源溶菌酶基因的重组质粒,以及经过该重组质粒转化毕赤酵母后获得的高效表达人源溶菌酶突变体的重组毕赤酵母基因工程菌。本发明获得的人源溶菌酶突变体具有比活高,制备简单的特点,具有潜在的临床应用价值,在饲料、食品工业上也具有广泛的用途。

    一种基于CRISPR-Cas9的产琥珀酸放线杆菌的碱基编辑器构建方法及应用

    公开(公告)号:CN118546923A

    公开(公告)日:2024-08-27

    申请号:CN202310166351.9

    申请日:2023-02-24

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9的产琥珀酸放线杆菌的碱基编辑器构建方法及应用,属于基因工程领域。本发明提供的产琥珀酸放线杆菌碱基编辑器可用于产琥珀酸放线杆菌DNA水平特定位点的特异性突变。本发明构建的胞嘧啶碱基编辑器CBE和腺嘌呤碱基编辑器ABE,分别成功介导C·G‑‑T·A和A·T‑‑G·C。碱基编辑器CBE是由rAPOBEC1、nCas9(D10A)和UGI融合蛋白1表达元件和sgRNA表达元件组成的质粒;碱基编辑器ABE是由TadA8e和nCas9(D10A)融合蛋白2表达元件和sgRNA表达元件组成的质粒;且碱基编辑器上都含有温度敏感复制启动蛋白pSG5Rep。本发明开发的适用于产琥珀酸放线杆菌的碱基编辑器,操作简单,转化效率高,具有一定的应用价值。

    一种多酶级联反应催化合成茉莉酮的方法

    公开(公告)号:CN118480580A

    公开(公告)日:2024-08-13

    申请号:CN202410555370.5

    申请日:2024-05-07

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种多酶级联反应催化合成茉莉酮的方法,属于合成生物技术领域。本发明的级联反应涉及大豆脂氧合酶、拟南芥来源的丙二烯氧化物合酶和丙二烯氧化物环化酶、棉铃虫来源的谷胱甘肽转移酶、以及酿酒酵母;通过这些酶的级联反应将底物α‑亚麻酸转化为异‑12氧代植物二烯酸,继而由酿酒酵母转化生成茉莉酮,实现了生物催化合成茉莉酮。该方法区别于传统的从植物中萃取以及化学合成,有效扩展了茉莉酮的获取方式。

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