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公开(公告)号：CN116083330A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202211385885.2
申请日：2022-11-07
申请人： 江南大学 , 无锡新和源发酵技术研究院有限公司
摘要： 本发明公开了一种重组大肠杆菌及其利用阿魏酸合成5‑羟基阿魏酸的方法，属于生物技术领域。本发明在大肠杆菌中外源表达铜绿假单胞菌来源的4‑羟基苯乙酸‑3‑羟基化酶基因，成功构建可以一步转化阿魏酸得到5‑羟基阿魏酸的重组菌，全细胞催化生产5‑羟基阿魏酸24h内产量高达1.97g/L，产率91％。本发明提供的重组菌和全细胞催化体系，工艺简单，环境友好，为工业化生产奠定一定的基础。
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公开(公告)号：CN114164129A
公开(公告)日：2022-03-11
申请号：CN202111366638.3
申请日：2021-11-18
申请人： 江南大学 , 无锡新和源发酵技术研究院有限公司
IPC分类号： C12N1/19 , C12N9/24 , C12N15/56 , C12P13/00 , C12N11/091 , C12N11/089 , C12R1/84
摘要： 本发明公开了一种异源表达黑芥子酶的重组毕赤酵母及其在萝卜硫素制备中的应用，属于生物工程技术领域。本发明首先构建得到一种可异源表达黑芥子酶的重组菌株，并利用该重组菌株发酵生产黑芥子酶后，通过固定化酶催化萝卜硫苷生成萝卜硫素。采用本发明提供的重组毕赤酵母P.pastoris X33/pPICZα‑BMYR制备得到的含有甘蓝蚜虫来源的BMYR在3L发酵罐中制备萝卜硫素时，产量达到0.91g/L，萝卜硫苷的摩尔转化率达到90％，本发明提供的这种生物法制备萝卜硫素的方法，具有反应条件温和、工艺简单、易于控制等优点，同时有利于环境保护，易于推广应用。
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公开(公告)号：CN114164129B
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202111366638.3
申请日：2021-11-18
申请人： 江南大学 , 无锡新和源发酵技术研究院有限公司
IPC分类号： C12N1/19 , C12N9/24 , C12N15/56 , C12P13/00 , C12N11/091 , C12N11/089 , C12R1/84
摘要： 本发明公开了一种异源表达黑芥子酶的重组毕赤酵母及其在萝卜硫素制备中的应用，属于生物工程技术领域。本发明首先构建得到一种可异源表达黑芥子酶的重组菌株，并利用该重组菌株发酵生产黑芥子酶后，通过固定化酶催化萝卜硫苷生成萝卜硫素。采用本发明提供的重组毕赤酵母P.pastoris X33/pPICZα‑BMYR制备得到的含有甘蓝蚜虫来源的BMYR在3L发酵罐中制备萝卜硫素时，产量达到0.91g/L，萝卜硫苷的摩尔转化率达到90％，本发明提供的这种生物法制备萝卜硫素的方法，具有反应条件温和、工艺简单、易于控制等优点，同时有利于环境保护，易于推广应用。
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公开(公告)号：CN112481140A
公开(公告)日：2021-03-12
申请号：CN202011539615.3
申请日：2020-12-23
申请人： 江南大学 , 无锡新和源发酵技术研究院有限公司
摘要： 本发明公开了一种利用微生物固态发酵生产茉莉酸的方法，属于生物技术领域。Lasiodiplodia.sp在接种到含麦粒的固态发酵培养基中，静置发酵6‑15天可以产生4128mg/Kg麦粒的茉莉酸。该方法为微生物发酵生产茉莉酸的放大提供了可行性。
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公开(公告)号：CN112481140B
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202011539615.3
申请日：2020-12-23
申请人： 江南大学 , 无锡新和源发酵技术研究院有限公司
摘要： 本发明公开了一种利用微生物固态发酵生产茉莉酸的方法，属于生物技术领域。Lasiodiplodia.sp在接种到含麦粒的固态发酵培养基中，静置发酵6‑15天可以产生4128mg/Kg麦粒的茉莉酸。该方法为微生物发酵生产茉莉酸的放大提供了可行性。
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公开(公告)号：CN117965514B
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202410147861.6
申请日：2024-02-01
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种芳香族氨基酸解氨酶突变体及其制备反式肉桂酸和对香豆酸的方法，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明以来源于Zea mays的苯丙氨酸解氨酶(ZmPAL2)为出发序列，对第258位、第459位、第484位中至少一个的氨基酸进行取代，所获得的突变体与野生型相比，催化L‑苯丙氨酸的酶活力和转化率显著提升；对第135位以及与以第135位突变为基础组合第258位、第459位、第484位中的至少一个氨基酸突变，所获得的突变体与野生型相比，催化L‑酪氨酸的酶活力和转化率显著提升。以上获得的催化L‑苯丙氨酸和L‑酪氨酸的高活力突变体可应用于反式肉桂酸和对香豆酸的高效生产。
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公开(公告)号：CN115041108B
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202210736527.5
申请日：2022-06-27
申请人： 江南大学
摘要： 本发明涉及聚电解质层层组装多酶及其制备方法。本发明采用一种有效、可重复性高的层层组装固定多酶的方式，将碳酸钙作为模板，合理构造了分别带有聚阴离子和聚阳离子的微球，其利用酶分子表面所带电荷与微球表面电荷之间的静电相互作用进行层层固定。本发明的组装方式操作方便，步骤简洁，减少了酶的损失，使用聚阳离子微球载酶量高达87.70％，聚阴离子载酶量高达71.10％，以初始酶为参考，选择构建的体系相对酶活高达85％。
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公开(公告)号：CN116590250A
公开(公告)日：2023-08-15
申请号：CN202310703925.1
申请日：2023-06-14
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种全细胞催化合成3‑羟基根皮素的方法，属于生物技术领域。本发明提供了铜绿假单胞菌来源的4‑羟基苯乙酸3‑单加氧酶在催化根皮素的3’位羟化生产3‑羟基根皮素中的新用途。并通过对4‑羟基苯乙酸3‑单加氧酶的改造、全细胞催化筛选，获得了对根皮素的转化率提高的突变体。本发明将表达4‑羟基苯乙酸3‑单加氧酶的基因工程菌作为全细胞催化剂，可将4g/L的根皮素转化为1.58g/L的3‑羟基根皮素。
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公开(公告)号：CN115992161A
公开(公告)日：2023-04-21
申请号：CN202211080124.6
申请日：2022-09-05
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种产琥珀酸放线杆菌CRISPRi系统构建方法，属于生物技术领域。本发明提供的CRISPRi系统以表达载体pLGZ92M为骨架载体，其主要作用元件包括cpf1表达元件和crRNA表达元件，其中pckA启动子启动表达dcpf1蛋白，frd启动子启动表达crRNA，由终止子rrnB t1终止子终止。本发明提供的CRISPRi系统只需更换针对靶基因的crRNA即可实现对靶基因产生抑制作用。本发明的方法针对产琥珀酸放线杆菌实现基因抑制，操作过程简单，转化效率高。
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公开(公告)号：CN115041108A
公开(公告)日：2022-09-13
申请号：CN202210736527.5
申请日：2022-06-27
申请人： 江南大学
摘要： 本发明涉及聚电解质层层组装多酶及其制备方法。本发明采用一种有效、可重复性高的层层组装固定多酶的方式，将碳酸钙作为模板，合理构造了分别带有聚阴离子和聚阳离子的微球，其利用酶分子表面所带电荷与微球表面电荷之间的静电相互作用进行层层固定。本发明的组装方式操作方便，步骤简洁，减少了酶的损失，使用聚阳离子微球载酶量高达87.70％，聚阴离子载酶量高达71.10％，以初始酶为参考，选择构建的体系相对酶活高达85％。
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