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公开(公告)号：CN102206631A
公开(公告)日：2011-10-05
申请号：CN201110054992.2
申请日：2011-03-08
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明一种开源方式筛选靶向结合人DYRK1A基因靶位点的锌指蛋白的方法，属于基因工程技术领域。该方法包括：(1)3个锌指蛋白库的构建；(2)报告载体和报告菌株的构建；(3)有效锌指库的筛选；(4)有效锌指库的连接、组装；(5)利用细菌双杂交原理筛选出具有较高特异性和亲和力的三锌指蛋白。本发明所述的方法具有获得的锌指蛋白特异性和亲和性较高，组装的锌指核酸酶有更高的效率的优点。
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公开(公告)号：CN112941107A
公开(公告)日：2021-06-11
申请号：CN202110365085.3
申请日：2021-04-01
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/55 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种原核Argonaute蛋白的基因编辑应用，通过构建源于细菌的Argonaute蛋白的原核表达载体，以及在转化宿主细胞后对该Argonaute蛋白的表达载体和共转化载体的降解的检测以及基因组位点的检测，发现了其具有被特异性转录本激活并靶向特定DNA靶序列的能力，并且在真核细胞中转录的导向RNA的参与下，实现了对基因组靶序列进行inDel频率为3％的基因编辑。实验结果表明原核Argonaute蛋白可以用于细胞内基因编辑工具的开发。
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公开(公告)号：CN111961686A
公开(公告)日：2020-11-20
申请号：CN202010888329.1
申请日：2020-08-28
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9和PiggyBac实现双等位精确基因组编辑的系统。构建CRISPR/Cas9表达载体、PiggyBac系统介导的供体载体以及PiggyBac转座酶表达载体，通过CRISPR/Cas9表达载体打靶基因组，造成DNA双链断裂，使用PiggyBac系统介导的供体载体进行HDR修复，再利用PiggyBac转座酶表达载体进行筛选标记的删除，从而实现高效、精确的双等位无筛选标记的基因组编辑，可应用于畜禽转基因育种。
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公开(公告)号：CN107760707B
公开(公告)日：2020-05-19
申请号：CN201710381327.1
申请日：2017-05-25
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了增强基因表达的自激活Gal4/UAS系统表达盒的建立，通过优化UAS数目及GAL4激活/结合域类型，找到一种增强效果较好的表达盒，由自身强启动子CMV启动，借助Gal4/UAS系统使转录和翻译效率提高，从而产生自动激活、级联放大的效果；在转染后第5‑10天维持较高的增强效果，第8天表达活性最高，说明表达盒增强基因表达的稳定性；在专门生产重组蛋白的CHO细胞中，增强效果大概是9倍。与现有基因表达盒相比，结构简单、增强效果显著，为基因治疗的非病毒转染途径和重组蛋白生产中增强目的基因表达提供了一种途径和新方法。
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公开(公告)号：CN104857507B
公开(公告)日：2020-05-12
申请号：CN201510266475.X
申请日：2015-05-22
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A61K39/00 , A61K48/00 , A61K38/38 , A61K39/39 , A61K47/46 , A61P37/04 , C12N1/19 , C12N15/85 , C12N15/12
Abstract: 本发明一种由口服酵母携带DNA片段活体靶向水产动物肠道免疫细胞，诱导水产动物产生免疫反应的制备方法。该疫苗生产成本低，使用方法简单，适合大规模生产，而且与传统减毒疫苗相比对动物无毒力威胁。可用在鱼类贝类等水产动物的多种细菌性、病毒性和寄生虫等口服DNA疫苗的开发应用上，使水产动物健康生长，减少水产业在疾病方面的损失，同时避免目前DNA疫苗所存在的弊端。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106755049B
公开(公告)日：2020-04-21
申请号：CN201611020358.6
申请日：2016-11-14
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种基于人工核酸酶的可视化细胞修复效率报告系统及其建立方法，包括由插入有目的基因靶位点的报告基因I表达盒、完整的报告基因II表达盒以及报告基因I的截短序列构建的双荧光报告系统表达载体，本发明所述基于人工核酸酶的可视化细胞修复效率报告系统利用并模拟真核细胞内的不同修复机制对报告系统中的相应的荧光表达盒进行修复，可通过流式细胞仪对双荧光报告系统表达载体两种报告基因的表达进行量化，在载体水平一次性报告检测真核细胞中某一确定基因位点HR、SSA和NHEJ的修复效率。
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公开(公告)号：CN106191116A
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201610703246.4
申请日：2016-08-22
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明提供基于CRISPR/Cas9的外源基因敲入整合系统及其建立方法和应用，系统包括同时具有报告/供体功能的载体及Cas9表达载体，所述报告/供体载体包括两条目标基因同源臂以及位于两条目标基因同源臂之间的外源序列片段；两条目标基因同源臂在目标基因上的同源序分别列位于目标基因靶序列的两侧并与目标基因靶序列相接；外源序列片段包括依次排列的启动子、抗性基因、剪切肽序列、报告基因以及polyA尾，抗性基因内部插入有两段该抗性基因的SSA修复同源序列，并且在两段SSA修复同源序列之间插入有目标基因靶序列。本发明构建了一套能够高效定点精确靶向整合外源基因到內源基因序列的敲入系统，而且能够进行较高效率的双染色体等位基因的双敲入。
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公开(公告)号：CN103520713B
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201310485936.3
申请日：2013-10-16
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种ApoB100酵母重组疫苗及其制备方法和应用，该酵母重组疫苗以酵母作为宿主细胞，转染包含ApoB100基因片段的真核表达载体；所述的ApoB100基因片段的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，所述的真核表达载体为JMB88-HA-OVA-hApoB100。该酵母重组疫苗通过口服的方式饲喂，能够在酵母中被硫酸铜诱导下表达OVA-hApoB融合蛋白，并在体内被裂解释放，经过抗原呈递引起集体的体液和细胞免疫反应，达到缓解和治疗动脉粥样硬化的目的，可应用于动脉粥样硬化的药物的制备。
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公开(公告)号：CN116515904A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310388217.3
申请日：2023-04-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/65 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12N9/22 , C12N15/113 , G01N21/64 , G01N15/14 , C12Q1/02
Abstract: 本发明公开了一种红绿光切换式交通信号灯基因编辑阳性报告富集系统。构建了新型的红绿光“切换式”报告载体以及相应的验证用CRISPR/Cas系统的表达载体。通过CRISPR/Cas系统同时打靶基因组、报告载体，利用SSA修复机制对报告载体中的双荧光报告基因及抗性基因一体化表达盒进行修复。该报告富集系统可以简单、快速检测被转染细胞中的核酸酶活性，并高效富集基因编辑阳性细胞。
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公开(公告)号：CN111909890B
公开(公告)日：2022-07-01
申请号：CN202010820786.7
申请日：2020-08-14
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/071 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于细胞培养领域，具体涉及一种绒山羊毛乳头细胞的分离、鉴定方法。具体技术方案为：使用SOX2+和/或FGF7+和/或APOD+和/或HHIP+作为毛乳头细胞的标记基因。本发明首次提出了一种可准确分离、鉴定绒山羊毛乳头细胞的方法。在分离上，本发明联合使用酶消化法和机械分离法共同获得细胞，并提供了一种可专用于培养绒山羊毛乳头细胞的培养基，以快速获得所需细胞。在鉴定上，本发明首次联合使用了几种新的标记基因，可快速、准确鉴定所需细胞。
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