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公开(公告)号：CN109182235B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201810992061.9
申请日：2018-08-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种可静态和动态调控枯草芽孢杆菌目的蛋白表达量的N端序列元件及应用，属于基因工程领域。本发明是以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)作为表达宿主，通过在目的蛋白编码基因前添加内源性蛋白N端编码前15个氨基酸的核酸序列，并在质粒中游离表达，使得枯草芽孢杆菌目的蛋白的表达实现在不同生长阶段的表达差异调控与表达量的调控。其中调控的类型包括：生长偶联型(等NHbs等)、迟滞表达型(NPdhD等)、持续表达型(NGlnA等)、强烈抑制型(NSat等)。同时，通过调控，使得目的蛋白相对表达量跨越四个数量级，为枯草芽孢杆菌目的蛋白高效表达和基因工程改造奠定了基础。
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公开(公告)号：CN116004693A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202210909414.0
申请日：2022-07-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种正交线性基因表达系统及应用，属于基因工程领域。本发明是以苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)作为表达宿主，通过在胞内构建线性质粒，实现了基因的稳定表达。同时，本发明还实现了线性质粒拷贝数的精确控制。这不仅在苏云金芽孢杆菌内开发了一个稳定的蛋白表达系统，还为苏云金芽孢杆菌合成生物学应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN115851801A
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202211514262.0
申请日：2022-11-29
Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌基因组编辑方法，属于基因工程领域。本发明以枯草芽孢杆菌作为表达宿主，将单链DNA结合蛋白和DNA退火蛋白整合至枯草芽孢杆菌基因组中，得到重组枯草芽孢杆菌，其中，单链DNA结合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，DNA退火蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过在枯草芽孢杆菌基因组中整合表达单链DNA结合蛋白和DNA退火蛋白，可将枯草芽孢杆菌基因组整合同源臂长度缩短至35bp，为枯草芽孢杆菌内实现高效简易的基因编辑提供了工具。
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公开(公告)号：CN115786335A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202210955743.9
申请日：2022-08-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种适用于多种典型模式微生物的高强度启动子，本发明是以P43启动子为基础，通过随机突变和高通量筛选获得了7个高强度启动子序列(PM1～PM7)，并在多种典型模式微生物中使用质粒中进行游离表达，证明了其有效性和通用性。
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公开(公告)号：CN115725486A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202210994809.5
申请日：2022-08-18
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/53 , C12N15/61 , C12N15/60 , C12N15/11 , A23L29/00 , A01N63/23 , A01P7/00 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种利用甲醇为碳源的苏云金芽孢杆菌及其应用，本发明通过在野生型苏云金芽孢杆菌中引入甲醇脱氢酶MdH、MdH激活蛋白AcT、3‑己酮糖‑6‑磷酸合酶HpS、6‑磷酸‑3‑己酮异构酶PhI和NADH脱氢酶NdH，首先实现了苏云金芽孢杆菌消耗0.71g/L甲醇，进一步，通过将Pveg启动子替换为突变后的Pveg启动子，将甲醇消耗量提升至11.7倍，达8.3g/L。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113481139A
公开(公告)日：2021-10-08
申请号：CN202110867868.1
申请日：2021-07-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产胍基乙酸的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法，属于枯草芽孢杆菌代谢工程和基因工程技术领域。本发明得到的重组枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是由野生型枯草芽孢杆菌为出发菌株，通过在枯草基因组上引入外源的精氨酸：甘氨酸脒基转移酶而得到的一株高产胍基乙酸的重组菌株，其产量达到12.8g/L，第一次实现在枯草芽孢杆菌中进行胍基乙酸的合成。这为枯草芽孢杆菌代谢工程高效生产胍基乙酸奠定了基础。
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公开(公告)号：CN108220322A
公开(公告)日：2018-06-29
申请号：CN201810091280.X
申请日：2018-01-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高枯草芽孢杆菌蛋白表达量的DNA，属于基因工程领域。本发明是以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)作为表达宿主，通过在目的蛋白N端添加编码来源于枯草芽孢杆菌冷休克蛋白(CspD)等高表达蛋白的N端15个氨基酸的核苷酸序列，并在质粒中游离表达，使重组枯草芽孢杆菌目的蛋白表达量达对照的2.27倍，为枯草芽孢杆菌基因蛋白高效表达和基因工程改造奠定了基础。
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公开(公告)号：CN114874967B
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202210690512.X
申请日：2022-06-17
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/55 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12N15/53 , C12N15/56 , C12N15/31 , C12P19/26 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种产N‑乙酰神经氨酸的重组大肠杆菌及其构建方法，属于代谢工程和基因工程技术领域。本发明构建的重组大肠杆菌(Escherichia coli)是由大肠杆菌BL21(DE3)为出发菌株，通过在基因组上敲除nanATEK基因,nagABE基因、manXYZ基因、poxB基因，并引入外源的UDP‑N‑乙酰氨基葡糖‑2‑差向异构酶编码基因NeuC和N‑乙酰神经氨酸合酶编码基因NeuB，并且重组表达由诱导型启动子T7调控的内源酶glmM，glmU和glmS突变体glmSA而得到的一株产N‑乙酰神经氨酸的重组菌株，其产量达到3.85g/L，为工业化生产N‑乙酰神经氨酸奠定了基础。
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公开(公告)号：CN115807268A
公开(公告)日：2023-03-17
申请号：CN202210909416.X
申请日：2022-07-29
Applicant: 江南大学
IPC: C40B40/06 , C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12R1/07
Abstract: 本发明涉及一种苏云金芽孢杆菌启动子文库及其应用。本发明以苏云金芽孢杆菌为研究对象，以绿色荧光蛋白为报告基因，通过上述所选启动子驱动报告基因表达，根据菌株对数生长期及生长稳定期的转录组数据，筛选出不同表达强度的启动子构建启动子文库，丰富了该菌株的表达调控元件，促进了生物催化的发展。
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公开(公告)号：CN115717152A
公开(公告)日：2023-02-28
申请号：CN202211514538.5
申请日：2022-11-29
Abstract: 本发明公开了一种控制枯草芽孢杆菌基因组同源重组概率的方法，属于基因工程领域。本发明以枯草芽孢杆菌为出发菌株，敲除了编码RecA蛋白的基因recA或诱导表达基因recA，通过诱导物质的添加调控微生物的同源重组，使得到的工程菌株产量稳定性大大提高。
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