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公开(公告)号：CN113355275B
公开(公告)日：2024-03-05
申请号：CN202110656125.X
申请日：2021-06-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种羔绵羊睾丸支持细胞、睾丸支持细胞亚克隆及其分离方法和应用，其中，所述支持细胞SCST的保藏编号为CCTCC No.C2019203，将其转染SV40大T抗原基因使其永生化，然后进行压力粗筛、压力分种以及持续传代，得到细胞亚克隆SCST‑T F13，其保藏编号为CCTCC No.C202130，可用于牛结节性皮肤病、羊痘及羊口疮等病毒的分离及规模化繁殖。所述细胞亚克隆可以用含国产血清的培养基培养，降低了生产成本，适合规模化生产应用。本发明的细胞亚克隆与常规原代细胞相比，而且能够明显提高牛结节性皮肤病毒的分离率，且牛结节性皮肤病毒的致病变时间明显缩短、分离病毒的拷贝数比传统细胞提高100倍以上，可以为牛结节性皮肤病毒的规模化繁殖及病毒感染致病机制研究提供工具。
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公开(公告)号：CN117089524A
公开(公告)日：2023-11-21
申请号：CN202310849421.0
申请日：2023-07-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/37 , C12N7/00 , A61K39/275 , A61P31/20 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于羊口疮病毒繁殖的永生化绵羊胎儿成纤维细胞系及其应用。所述的永生化绵羊胎儿成纤维细胞系命名为绵羊胎儿成纤维细胞SFFC‑T，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO：C202206。本发明提出的一种永生化的绵羊胎儿成纤维细胞系，解决了原代绵羊胎儿成纤维细胞培养血清造价高、传代次数有限、细胞生长缓慢等问题，并且构建的永生化绵羊胎儿成纤维细胞系稳定、可靠，能够高效繁殖羊口疮弱毒疫苗，解决了疫苗造价成本高，以及因为原代细胞无法持续传代导致的疫苗批次不稳定等问题。
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公开(公告)号：CN114921589A
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202210524501.4
申请日：2022-05-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6806 , C12Q1/686 , C07K16/08 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于单域抗体9‑4‑1免疫磁珠的直扩检测山羊痘病毒的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括SEQ ID NO.1所示的山羊痘病毒单域抗体9‑4‑1通过链霉亲和素‑生物素与磁珠进行偶联得到的单域抗体9‑4‑1免疫磁珠。本发明使用切胶纯化的单域抗体9‑4‑1蛋白与磁珠进行偶联获得免疫磁珠，免疫磁珠富集山羊痘病毒后，无需提取基因组RNA，可直接对其进行扩增。本发明的提出克服了山羊痘病毒由于形成夹皮时间久，不容易在病毒复制高峰期发现，采集病料病毒含量低微，所以检出率低，容易漏检等现象；以及提取基因组DNA时费时、费财、费力，操作时污染环境等一系列难题，而且高效、灵敏、特异、稳定、实用，本发明的提出为山羊痘病毒病的检测提供了一种高效的技术手段。
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公开(公告)号：CN113136361A
公开(公告)日：2021-07-20
申请号：CN202110656116.0
申请日：2021-06-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种羔绵羊睾丸支持细胞及其分离方法和应用，其中，所述羔绵羊睾丸支持细胞SCST的保藏编号为CCTCC No.C2019203。本发明的SCST细胞可直接用于羊口疮病毒的规模化繁殖；也可转染端粒酶基因使其永生化，然后进行压力粗筛、压力分种以及持续传代，得到亚克隆细胞系，将该亚克隆细胞系用于羊口疮病毒的规模化繁殖。所述亚克隆细胞系可以用含国产血清的培养基培养，降低了生产成本，适合规模化生产应用。本发明提供的亚克隆细胞系与常规原代细胞相比，能够明显提高羊口疮病毒的分离率，且羊口疮病毒的致病变时间明显缩短、分离病毒的拷贝数比原代细胞提高100倍以上，可以为羊口疮病毒的规模化繁殖及病毒感染致病机制研究提供工具。
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