一种转基因青蒿的环境安全评价方法

    公开(公告)号:CN106718179A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201611037837.9

    申请日:2016-11-23

    IPC分类号: A01G7/00 A01G7/06 C12Q1/68

    摘要: 一种转基因青蒿的环境安全评价方法,该方法对转基因青蒿的农艺性状、抗逆性以及基因漂移进行测试,同时以野生型受体青蒿作对照,评估中设置的参数涵盖了转基因青蒿和其野生型受体差异性的各指标,为转基因青蒿的环境释放建立了模型,在说明两者实质等同性上具有重要示范意义,本发明从以上三个方面建立的评价体系操作简单,易于实现,直观性强,结果准确性高,该方法对转基因青蒿的环境安全评价提供了待测指标,为转基因青蒿品种的商业化风险评估提供了技术支撑。

    一种转基因香石竹Moonshade的品系特异性定性、定量PCR检测方法

    公开(公告)号:CN102719552B

    公开(公告)日:2013-12-04

    申请号:CN201210244815.5

    申请日:2012-07-16

    IPC分类号: C12Q1/68 G01N21/64

    摘要: 本发明公开了一种转基因香石竹Moonshade的品系特异性定性、定量PCR检测方法,包括以下步骤:1)转基因香石竹Moonshade基因组DNA的提取;2)转基因香石竹Moonshade外源基因插入位点的左边界旁邻序列的分离和确认;3)转基因香石竹Moonshade定性PCR检测;4)转基因香石竹Moonshade定量PCR检测。本发明建立了适用于转基因香石竹Moonshade的品系特异性定性、定量PCR检测方法,并验证了该检测方法的特异性和灵敏度,为转基因香石竹的进口检测、监管及环境安全评价提供重要依据。

    适合转基因棉花等外源基因检测的内标准基因及其应用

    公开(公告)号:CN1557966B

    公开(公告)日:2010-05-05

    申请号:CN200410016060.9

    申请日:2004-01-18

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明涉及适合于转基因棉花、番茄、水稻、油菜外源基因定性、定量PCR检测及拷贝数分析的内标准基因及其应用。本发明依据内标准基因的种内非特异性、种间特异性、单拷贝或低拷贝数,通过生物信息学分析和分子生物学实验验证,在棉花、番茄、水稻和油菜中寻找到4个内标准基因,分别为棉花的SAD I、番茄的LAT52、水稻的SPS和油菜的HMG I/Y基因。应用PCR方法进行了这些内标准基因的检测灵敏度和精确度实验验证。同时依据这些内标准基因分别建立了转基因棉花、番茄、水稻和油菜外源基因的定性、定量PCR检测系统;根据内标准基因的恒定拷贝数,建立转基因水稻、油菜、棉花、番茄的外源基因拷贝数的荧光定量PCR检测分析平台。

    一种同步检测猪羊牛动物源性成分的微滴PCR引物体系及检测方法

    公开(公告)号:CN105256013B

    公开(公告)日:2018-08-31

    申请号:CN201510629306.8

    申请日:2015-09-29

    摘要: 一种同步检测猪羊牛动物源性成分的微滴PCR引物体系及检测方法,包括如下步骤:以样品总DNA为模板,利用所述引物对I、引物对II和引物对III组成的微滴PCR引物体系进行微滴PCR扩增实验,反应结束后根据琼脂糖凝胶电泳判定结果。其中,所述样品总DNA模板为猪、羊、牛物种肉产品中的一种以上。本发明公开了一种快速、准确、灵敏的微滴PCR同步检测3种动物源性成分的方法,能有效缩短实验时间,大大提高效率,且节省成本,从而有效鉴定猪羊牛制品的真伪及掺假情况。此外,本发明设计的微滴PCR引物体系配合相关试剂制成试剂盒,方便使用,同时为工业化生产及应用提供了可能。

    一种检测转基因玉米Bt11品系的RPA引物及检测方法

    公开(公告)号:CN108034757A

    公开(公告)日:2018-05-15

    申请号:CN201810061953.7

    申请日:2018-01-23

    摘要: 一种检测转基因玉米Bt11品系的RPA引物及检测方法,根据转基因玉米Bt11外源基因草丁膦乙酰转移酶基因PAT及玉米基因组连接区域的序列,设计了RPA引物,该RPA引物包括正向引物F和反向引物R,具体序列为:F:5’‑CTGGGAGGCCAAGGTATCTAATCAGCCATCCC‑3’;R:5’‑CTGCTGTAGCTGGCCTAATCTCAACTGGTCTCC‑3’,建立了基于重组酶聚合酶等温扩增技术的快速检测方法,对转基因玉米Bt11品系进行快速鉴定,特异性强,灵敏度高,短时间内即能实现对目的片段的指数扩增,对环境设备要求低,操作简便,在转基因产品成分检测领域具有广阔的推广应用前景。

    一种提取大型真菌基因组DNA的方法

    公开(公告)号:CN107974449A

    公开(公告)日:2018-05-01

    申请号:CN201710235246.0

    申请日:2017-04-12

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 一种提取大型真菌基因组DNA的方法,利用物理方法和化学方法破碎大型真菌子实体或菌丝细胞结构,采用酚、氯仿和异戊醇去除蛋白质,再用异丙醇沉淀基因组DNA,加入灭菌蒸馏水或缓冲液溶解基因组DNA,采用核酸吸附柱吸附收集基因组DNA,经异硫氰酸胍和乙醇纯化,获得基因组DNA,获得的基因组DNA具有较好的完整性,经琼脂糖凝胶电泳后染色,DNA条带清晰且单一,无拖尾,无杂带,获得的基因组DNA纯度高,其OD260和OD280比值在1.8~2.0之间,产量高,基因组DNA的浓度为20~50ng/μl,操作简单、成本低,适用于各种大型真菌子实体和菌丝的分子生物学研究。