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    液滴生成方法和系统
    2.
    发明公开
    液滴生成方法和系统 无效

    公开(公告)号：CN108707536A

    公开(公告)日：2018-10-26

    申请号：CN201810316477.9

    申请日：2018-04-10

    申请人： 广东顺德墨赛生物科技有限公司

    发明人： 刘经龙 ,  何关金 ,  梁帅 ,  何霖

    IPC分类号： C12M1/00 ,  C12M1/36 ,  C12M1/34

    CPC分类号： C12Q1/686 ,  C12Q2563/159 ,  C12Q2565/607

    摘要： 本发明涉及一种液滴生成系统，包括：气源、下压装置、气压传感器、压力调节装置以及控制器；所述气源通过所述压力调节装置与所述下压装置连接；所述控制器与所述下压装置、所述压力调节装置以及所述气压传感器连接。本发明提供一种液滴生成方法和系统，并且是自带气源的液滴生成系统，这样大大增加了此系统的便携性，利用气压传感器采集数据对液体腔进气口的气体压强数据变化，利用PID控制算法，实时控制调整压力调节装置输出气体的压强，结合反馈实际气体压强调节自带气源的气泵输出气体压强，进而实现稳定及准确输出气体的压强，完成液滴生成所需气体压强的控制。

    单核苷酸检测方法
    3.
    发明公开
    单核苷酸检测方法 无效

    公开(公告)号：CN108699592A

    公开(公告)日：2018-10-23

    申请号：CN201780012530.X

    申请日：2017-02-24

    申请人： 贝斯4创新公司

    发明人： 巴纳比·巴姆福思

    IPC分类号： C12Q1/6827 ,  C12Q1/6869

    CPC分类号： C12Q1/6827 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q2521/319 ,  C12Q2521/331 ,  C12Q2521/501 ,  C12Q2525/125 ,  C12Q2525/131 ,  C12Q2525/307 ,  C12Q2563/159 ,  C12Q2565/107 ,  C12Q2565/301 ,  C12Q2565/629 ,  C12Q2525/301

    摘要： 一种核酸测序方法，其特征在于以下步骤：(1)通过所述核酸的渐进的焦磷酸解产生单核苷酸流；(2)通过在聚合酶和连接酶存在下使所述单核苷酸之一与相应的探针系统反应产生至少一个基本上双链的寡核苷酸已用探针，所述探针系统包含(a)第一单链寡核苷酸，其标记有处于不可检测状态的特征性可检测元件类型的第一区和第二区，所述第一区和第二区分别位于第三区的X’和Y’端侧，所述第三区包含包括捕获位点的限制性酶识别位点元件和在其X’侧的外切核酸酶阻断位点(其中X’为3’并且Y’为5’或X’为5’并且Y是3’)，和(b)第二和第三单链寡核苷酸，其能够与第一寡核苷酸上捕获位点侧翼的互补区杂交；(2a)(i)当且仅当捕获的单核苷酸包含被取代的核碱基时，用常规或切口取代依赖性限制性内切核酸酶处理所述已用探针以在所述识别位点切割所述第一寡核苷酸链，或(ii)当且仅当捕获的单核苷酸包含未取代的核碱基时，用常规或切口取代敏感性限制性内切核酸酶处理所述已用探针以在所述识别位点切割所述第一寡核苷酸链；(3)用在对应于所述第一寡核苷酸的X’‑Y’方向上具有双链外切核酸活性的酶消化已用探针的所述第一寡核苷酸链，以产生处于可检测状态的来自所述第一区，所述第二区，或所述第一和第二区的可检测元件和单链第四寡核苷酸，所述单链第四寡核苷酸至少部分是所述第一寡核苷酸的互补序列；(4)使所述第四寡核苷酸与另一个第一寡核苷酸反应以产生对应于已用探针的基本上双链的寡核苷酸产物；(5)在循环中重复步骤(2a)，(3)和(4)，和(6)检测在步骤(3)的每次重复中释放的可检测元件，其中如果使用的内切核酸酶是常规类型，则所述第二或第三寡核苷酸分别在其X’或Y’端或其附近包括引导内切核酸降解的连接。还公开了相应的生物探针系统。

    一种微体积细胞核酸扩增方法
    6.
    发明公开
    一种微体积细胞核酸扩增方法 有权

    公开(公告)号：CN108315389A

    公开(公告)日：2018-07-24

    申请号：CN201711393816.5

    申请日：2017-12-21

    申请人： 中国科学院微生物研究所

    发明人： 杜文斌 ,  徐鹏 ,  贠娟莉 ,  戴欣 ,  郑小伟 ,  黄力

    IPC分类号： C12Q1/6844 ,  C12Q1/686

    CPC分类号： C12Q1/6844 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2531/119 ,  C12Q2537/143 ,  C12Q2563/159

    摘要： 本发明提供一种微体积细胞核酸扩增方法，包括：a)包裹少量细胞的微液滴加入到预先加载油相的小型容器中，并离心使其沉降；b)细胞裂解液液滴通过油相液面以下微体积注射加入到小型容器中,并离心使其沉降与细胞液滴融合，实现细胞的裂解和核酸物质的释放；c)裂解中止液液滴通过微体积注射加入，并离心使其与裂解后细胞液滴融合，对裂解反应进行中和或终止；d)一种或一种以上扩增反应液通过微体积注射加入，并离心融合，在适当温度下，对基因组、转录组或特定核酸序列进行扩增。本发明提供的细胞核酸扩增方法操作简单、成本低、通量高，反应体积可缩小至纳升级别。

    A型塞内卡病毒的微滴数字RT-PCR检测引物和探针及其应用
    7.
    发明公开
    A型塞内卡病毒的微滴数字RT-PCR检测引物和探针及其应用 无效

    公开(公告)号：CN107937618A

    公开(公告)日：2018-04-20

    申请号：CN201711475661.X

    申请日：2017-12-29

    申请人： 中国检验检疫科学研究院

    发明人： 张舟 ,  张永宁 ,  吴绍强 ,  林祥梅

    IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

    CPC分类号： C12Q1/701 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q2563/159 ,  C12Q2563/107

    摘要： 本发明属于分子检测技术领域，具体公开了一种A型塞内卡病毒的微滴数字RT-PCR检测引物和探针及其应用。所述引物为：上游引物：5’-CACTACTCGAGAAGCTGCAAT-3’，下游引物：5’-TCCATCTTGCCTGCAGGTACT-3’；所述探针为：5’-R-CTTCGCTGACTACGGTGCCGTACCGAGT-Q-3’，R为荧光报告基团，Q为荧光淬灭基团。利用本发明所提供的微滴数字RT-PCR检测引物和探针可以实现对SVA样品的精准检测，灵敏度可达到2个病毒拷贝；且对不含有SVA的检测样本均无扩增信号，表明其具有良好的特异性。该方法步骤简便且易于操作，有很强的实用性和灵活性，是实际应用中检测A型塞内卡病毒的有效方法。

    用于Pacbio平台的DNA大片段文库构建方法和试剂盒
    10.
    发明公开
    用于Pacbio平台的DNA大片段文库构建方法和试剂盒 无效

    公开(公告)号：CN107794575A

    公开(公告)日：2018-03-13

    申请号：CN201710962325.1

    申请日：2017-10-16

    申请人： 深圳华大基因股份有限公司

    发明人： 马倩倩 ,  钟宏彬 ,  梁浩 ,  唐玉婧 ,  安莹

    IPC分类号： C40B50/06 ,  C12Q1/6869

    CPC分类号： C40B50/06 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q2561/113 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2563/159

    摘要： 本申请公开了一种用于Pacbio平台的DNA大片段文库构建方法和试剂盒。本申请用于Pacbio平台的DNA大片段文库构建方法，包括对打断的DNA大片段进行ExoVII酶处理；然后依序进行第一次DNA损伤修复、末端修复处理和加接头处理、外切酶ExoIII和ExoVII双酶切处理；然后，采用核酸电泳和片段回收系统对双酶切处理的产物进行片段分选；对片段分选产物进行第二次DNA损伤修复，即获得适用于Pacbio平台的DNA大片段文库。本申请的DNA大片段文库构建方法，整个建库过程无需使用Pacbio建库试剂盒，大大降低了建库成本，为第三代测序和Pacbio核酸测序平台的推广应用奠定了物质基础。