适合转基因棉花等外源基因检测的内标准基因及其应用

    公开(公告)号:CN1557966A

    公开(公告)日:2004-12-29

    申请号:CN200410016060.9

    申请日:2004-01-18

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明涉及适合于转基因棉花、番茄、水稻、油菜外源基因定性、定量PCR检测及拷贝数分析的内标准基因及其应用。本发明依据内标准基因的种内非特异性、种间特异性、单拷贝或低拷贝数,通过生物信息学分析和分子生物学实验验证,在棉花、番茄、水稻和油菜中寻找到4个内标准基因,分别为棉花的SADI、番茄的LAT52、水稻的SPS和油菜的HMGI/Y基因。应用PCR方法进行了这些内标准基因的检测灵敏度和精确度实验验证。同时依据这些内标准基因分别建立了转基因棉花、番茄、水稻和油菜外源基因的定性、定量PCR检测系统;根据内标准基因的恒定拷贝数,建立转基因水稻、油菜、棉花、番茄的外源基因拷贝数的荧光定量PCR检测分析平台。

    适合转基因棉花等外源基因检测的内标准基因及其应用

    公开(公告)号:CN1557966B

    公开(公告)日:2010-05-05

    申请号:CN200410016060.9

    申请日:2004-01-18

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明涉及适合于转基因棉花、番茄、水稻、油菜外源基因定性、定量PCR检测及拷贝数分析的内标准基因及其应用。本发明依据内标准基因的种内非特异性、种间特异性、单拷贝或低拷贝数,通过生物信息学分析和分子生物学实验验证,在棉花、番茄、水稻和油菜中寻找到4个内标准基因,分别为棉花的SAD I、番茄的LAT52、水稻的SPS和油菜的HMG I/Y基因。应用PCR方法进行了这些内标准基因的检测灵敏度和精确度实验验证。同时依据这些内标准基因分别建立了转基因棉花、番茄、水稻和油菜外源基因的定性、定量PCR检测系统;根据内标准基因的恒定拷贝数,建立转基因水稻、油菜、棉花、番茄的外源基因拷贝数的荧光定量PCR检测分析平台。