公开(公告)号：CN114703170B

公开(公告)日：2023-11-28

申请号：CN202210448238.5

申请日：2022-04-26

Applicant: 浙江大学

Inventor： 林建平 ,  冯赟 ,  于浩然 ,  朱力 ,  吴绵斌 ,  杨立荣

IPC: C12N9/90 ,  C12N15/61 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/02 ,  C12P19/24 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶的热稳定性突变体及其高通量筛选方法，属于酶工程领域。该高通量筛选方法经过两轮叠加筛选获得的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶三点突变体热稳定性明显提高。该突变体与野生型相比，5min热处理的半失活温度从58.9℃升高至66.0℃，60℃热处理温度下半衰期从2.06min增加至19.52min，同时三点突变体的比酶活从野生型的214.6U/mg增加至338.5U/mg。

公开(公告)号：CN114703170A

公开(公告)日：2022-07-05

申请号：CN202210448238.5

申请日：2022-04-26

Applicant: 浙江大学

Inventor： 林建平 ,  冯赟 ,  于浩然 ,  朱力 ,  吴绵斌 ,  杨立荣

IPC: C12N9/90 ,  C12N15/61 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/02 ,  C12P19/24 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶的热稳定性突变体及其高通量筛选方法，属于酶工程领域。该高通量筛选方法经过两轮叠加筛选获得的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶三点突变体热稳定性明显提高。该突变体与野生型相比，5min热处理的半失活温度从58.9℃升高至66.0℃，60℃热处理温度下半衰期从2.06min增加至19.52min，同时三点突变体的比酶活从野生型的214.6U/mg增加至338.5U/mg。

公开(公告)号：CN119331935A

公开(公告)日：2025-01-21

申请号：CN202411551552.1

申请日：2024-11-01

Applicant: 浙江大学

Inventor： 林建平 ,  冯赟 ,  蒋亦琪 ,  朱力 ,  吴绵斌 ,  杨立荣

IPC: C12P19/26 ,  C12N1/38 ,  C12N1/20 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明提供了一种提高氨甲酰妥布霉素生产菌株发酵产量的方法。该方法对产氨甲酰妥布霉素菌株发酵过程的培养基做了改进，改进的发酵培养基中添加有葡萄糖异构化产物，或者使用葡萄糖异构化产物部分替代原发酵培养基中的葡萄糖。使用本方法后，同一菌株氨甲酰妥布霉素摇瓶发酵产量从原来的3.5g/L提高到3.91g/L，提高了11.7％。本发明在微调发酵培养基配方的基础上，基本不增加额外的发酵成本的同时提高氨甲酰妥布霉素的发酵产量，具有重要的工业应用前景。

公开(公告)号：CN117384922A

公开(公告)日：2024-01-12

申请号：CN202311058977.4

申请日：2023-08-21

Applicant: 浙江大学

Inventor： 林建平 ,  冯赟 ,  蒋亦琪 ,  朱力 ,  吴绵斌 ,  杨立荣

IPC: C12N15/31 ,  C12N15/53 ,  C12N15/76 ,  C12N1/21 ,  C12P17/16 ,  C12R1/465

Abstract: 本发明提供一种提高氨甲酰妥布霉素产量的方法及生产菌株，属于基因工程技术领域。通过敲除Streptoalloteichus tenebrarius基因组中妥布霉素合成基因簇区域内编码Lrp/AsnC家族转录调控因子的tobR基因，并且采用组成型强启动子过表达TobR直接作用的TauD/TfdA家族氧化酶的编码基因tobO，获得一株组合突变菌株，其氨甲酰妥布霉素发酵产量明显提高。该组合突变菌株的氨甲酰妥布霉素摇瓶发酵水平达到3.76g/L，比出发菌株的2.64g/L提高了42.5％。本发明的优点在于：通过在S.tenebrarius中失活tobR基因的同时过表达tobO基因，构建得到氨甲酰妥布霉素高产菌株，用该菌株能够在不增加额外培养基成本的情况下提高氨甲酰妥布霉素发酵产量，降低生产成本，具有重要的工业应用前景。