转录抑制因子LsrR的应用及提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性的方法

    公开(公告)号:CN116179585A

    公开(公告)日:2023-05-30

    申请号:CN202211373171.X

    申请日:2022-11-03

    摘要: 本发明公开了一种提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性的方法,包括敲除转录抑制因子LsrR的步骤,通过构建转录抑制因子LsrR的敲除质粒并将其导入植物乳杆菌中,实现敲除转录抑制因子LsrR,所述环境胁迫为恶劣温度条件、酸碱条件以及胆盐条件中的一种或者几种。本发明鉴定了植物乳杆菌中的转录调控因子并阐明调控多糖合成的调控机制。将基因组数据挖掘与共沉淀共沉淀分析相结合,以确定植物乳杆菌特有的调节蛋白。使用电泳迁移率变动分析(EMSA)来评估该调节剂与启动子DNA的结合以催化多糖合成,并探讨了植物乳杆菌对胆汁盐、冻干、温度、pH和AI‑2的反应机制。提供了一株环境胁迫耐受增强的植物乳杆菌,具体为植物乳杆菌lsrR敲除菌株,增强了植物乳杆菌对环境胁迫的耐受。

    一种通过脂肪酸代谢调控提高抗菌脂肽bacillomycin D产量的方法

    公开(公告)号:CN114854810B

    公开(公告)日:2024-01-26

    申请号:CN202210686685.4

    申请日:2022-06-17

    IPC分类号: C12P21/04 C12N1/20 C12R1/125

    摘要: 本发明属于微生物学发酵领域,具体涉及一种利用脂肪酸代谢调控提高抗菌脂肽bacillomycin D产量的方法:以一株能够合成bacillomycin D的芽孢杆菌为出发菌株,在发酵起始时分别添加0.25~5 mmol/L的丙酸钠、丙酸、丁酸等3种脂肪酸或脂肪酸盐,增加培养基中的游离脂肪酸,进而调控脂肪酸代谢途径,增加活性bacillomycin D发酵产量。本发明在基础培养基中添加丙酸钠、丙酸以及丁酸,均可使bacillomycin D产量显著提高,分别可达到对照组的1.44倍、1.4倍和1.1倍;丙酸钠的添加促进bacillomycin D合成基因的表达,从基因水平上佐证了其对bacillomycin D合成的促进作用。同时,丙酸钠可以引发部分信号因子表达上调,这些上调均可促进bacillomycin D的合成。此外,丙酸钠还可促进部分脂肪酸代谢相关酶的表达上调,进而促进脂肪酸的代谢。

    一种提高Bacillomycin D发酵产量的方法

    公开(公告)号:CN115028686A

    公开(公告)日:2022-09-09

    申请号:CN202210687664.4

    申请日:2022-06-17

    摘要: 本发明提供了一种提高Bacillomycin D发酵产量的方法,以枯草芽孢杆菌fmbJ为出发菌株,通过添加生长因子VC,来提高Bacillomycin D产量。在本发明方法中,在发酵培养基中添加VC,可提高Bacillomycin D合成酶基因的相对表达量,促进氨基酸前体合成途径中关键酶基因转录,促进了degQ、comA、comP、comQ、sigM和spo0A等参与次级代谢产物合成的正调控信号因子的表达量上调,同时下调了一些负调控因子如rapC和abrB,使Bacillomycin D的产量提升至对照组的1.44倍;同时本发明方法成本低、操作简单方便,可以有效降低脂肽的生产成本、提高生产效率,有望用于大规模生产应用。

    一种通过脂肪酸代谢调控提高抗菌脂肽bacillomycin D产量的方法

    公开(公告)号:CN114854810A

    公开(公告)日:2022-08-05

    申请号:CN202210686685.4

    申请日:2022-06-17

    IPC分类号: C12P21/04 C12N1/20 C12R1/125

    摘要: 本发明属于微生物学发酵领域,具体涉及一种利用脂肪酸代谢调控提高抗菌脂肽bacillomycin D产量的方法:以一株能够合成bacillomycin D的芽孢杆菌为出发菌株,在发酵起始时分别添加0.25~5 mmol/L的丙酸钠、丙酸、丁酸等3种脂肪酸或脂肪酸盐,增加培养基中的游离脂肪酸,进而调控脂肪酸代谢途径,增加活性bacillomycin D发酵产量。本发明在基础培养基中添加丙酸钠、丙酸以及丁酸,均可使bacillomycin D产量显著提高,分别可达到对照组的1.44倍、1.4倍和1.1倍;丙酸钠的添加促进bacillomycin D合成基因的表达,从基因水平上佐证了其对bacillomycin D合成的促进作用。同时,丙酸钠可以引发部分信号因子表达上调,这些上调均可促进bacillomycin D的合成。此外,丙酸钠还可促进部分脂肪酸代谢相关酶的表达上调,进而促进脂肪酸的代谢。

    一种双功能融合酶及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN117467684B

    公开(公告)日:2024-09-17

    申请号:CN202311171186.2

    申请日:2023-09-11

    摘要: 本发明涉及一种双功能融合酶及其制备方法和应用,双功能融合酶的制备方法包括:对脱氧雪腐镰刀菌烯醇解毒酶基因dadh和akr13b3进行PCR扩增;构建不同Linker介导的双功能融合酶DADH‑AKR13B3原核表达载体;将双功能融合酶DADH‑AKR13B3在宿主细胞中进行表达。该双功能融合酶将脱氧雪腐镰刀菌烯醇一步酶法解毒为无毒的3‑epi‑DON。上述技术方案中提供的融合酶能有效的将DON直接降解为3‑epi‑DON,可提高酶的催化效率,降低酶的生产成本,在食品和饲料工业中具有潜在的工业化应用前景。

    一种双功能融合酶及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN117467684A

    公开(公告)日:2024-01-30

    申请号:CN202311171186.2

    申请日:2023-09-11

    摘要: 本发明涉及一种双功能融合酶及其制备方法和应用,双功能融合酶的制备方法包括:对脱氧雪腐镰刀菌烯醇解毒酶基因dadh和akr13b3进行PCR扩增;构建不同Linker介导的双功能融合酶DADH‑AKR13B3原核表达载体;将双功能融合酶DADH‑AKR13B3在宿主细胞中进行表达。该双功能融合酶将脱氧雪腐镰刀菌烯醇一步酶法解毒为无毒的3‑epi‑DON。上述技术方案中提供的融合酶能有效的将DON直接降解为3‑epi‑DON,可提高酶的催化效率,降低酶的生产成本,在食品和饲料工业中具有潜在的工业化应用前景。